本发明专利技术涉及一种人乳头瘤病毒HPV致癌基因蛋白作为抗原,用于检测抗人乳头瘤病毒HPV的抗体,其选自如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列或者与它们具有80%同源性的氨基酸序列中的一种或几种。还提供了包括上述抗原的免疫检测试剂盒。以及上述抗原和试剂盒的应用。本发明专利技术的用于检测抗HPV抗体的抗原可以高灵敏度、高特异性和高稳定性地检测血液或唾液中的HPV抗体,从而可以为医生准确诊断病人有HPV病毒致癌基因转化的宫颈上皮内瘤变和子宫颈癌带来依据,进而及时采取治疗,以防止癌症发生,或癌症扩散,及时减轻病人痛苦,由其制成的免疫检测试剂盒可以快速简单准确地检测血液或唾液中的HPV抗体,适于大规模推广应用。
【技术实现步骤摘要】
用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原及相关免疫检测试剂盒
本专利技术涉及抗体检测
,特别涉及抗人乳头瘤病毒(HumanPapillomavirus, HPV)抗体检测
,具体是指一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原及相关免疫检测试剂盒,尤其可用于国内流行的高危险型人乳头瘤病毒(HPV)亚型HPV16 和 HPV18。
技术介绍
子宫颈癌是第二位常见女性恶性肿瘤,人乳状瘤病毒(HPV)是其发生的必要条件。尽管人群HPV感染很普遍,如:宫颈癌高发区妇女35岁以后感染率仍高达20.8%。但超过80%的HPV DNA阳性妇女不会进展为癌症或癌前病变。因此HPV DNA检测缺陷是无法分辨一过性感染和可引起宫颈病变的感染,导致较高假阳性率。大量研究显示,HPV致癌基因表达产物(癌蛋白oncoprotein)有很高的致癌活性,因此这些生物标志物有可以作为比HPVDNA更为准确有特异性的宫颈癌预测指标。高危HPV E2、E6、E7癌蛋白(oncoprotein)的表达水平和宫颈癌前病变不同阶段直接相关。利用这一特性可以构建全新的宫颈癌分子筛查指标。对HPV致癌机理的 研究表明,高危型HPV的早期表达蛋白E6,E7蛋白在宫颈癌的发生中起着重要作用。在宫颈高度病变和癌症患者的宫颈上皮细胞中HPV E6及E7蛋白一般呈过度表达,持续表达和过量表达的E6,E7致癌蛋白可与宿主细胞调控蛋白(如,P53和Rb蛋白等)相互作用,使肿瘤抑制因子失活,导致细胞永生化和恶性转化。除了 HPV DNA检测和HPV致癌蛋白检测,血液(体液)中HPV抗体也证明对HPV感染及宫颈癌发病史有很大的相关性。HPV LI血液抗体可用标准ELISA方法检测,提供HPV感染信息。随着HPV感染时间的延长,HPV诱导产生了抗HPV抗体,故可检测到血清中抗HPV抗体。Wikstrom等检测了 47例男性现症尖锐湿疣患者和32例曾有尖锐湿疣病史患者的男性对HPV6型和HPVll型衣壳蛋白的血清IgG抗体,并与205例无生殖器尖锐湿疣病史的男性比较,结果,血清中抗HPV6型的IgG抗体在曾有尖锐湿疣病史的男性中为35%,在现症尖锐湿疣中为27%,而在对照组为10%。这表明抗HPV6IgG抗体的出现发生在尖锐湿疣病期的晚些时候,同时IgG阳性也反映曾感染过这种病毒。Stone等报道了利用此方法对于美国普通人群7218例HPV-16的感染率研究,结果表明女性阳性率17.9%,男性阳性率7.9% (Stone, K.M., et al., Seroprevalenceof HumanPapiIlomavirus Typel6Infection in the United States.2002.TheJournal of Infectious Diseases2002;186:1396-402)。 HPV LI 抗体 ELISA 方法在配合HPV疫苗(Merck公司Gardasil预防性疫苗)的研发及临床试验过程中曾被广泛釆用。Luevano等用蛋白芯片例宫颈癌病人的血清样品进行了高通量检测分析(Luevano, M., et al., High-Throughput Profling of the Humoral Immune ResponsesAgainst Thirteen Human PapillomavirusTypes by Proteome Microarrays.2010.Virology.2010; 405 (I):31 - 40),分析 13 个 HPV 型的总共 54604 种蛋白的抗体 profiling,结果表明了血液中致癌蛋白的抗体与宫颈癌、高度病变、低度病变、及无症状普通人有较强的相关性(Luevano, M., et al., High-Throughput Profling of the HumoralImmune Responses Against Thirteen Human Papillomavirus Types by ProteomeMicroarrays.2010.Virology.2010;405(I):31 - 40)。因此,为了实现HPV抗体检测的高灵敏度、高特异性和高稳定性,需要提供新的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原。
技术实现思路
为了解决上述存在的问题,本专利技术的目的是提供一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原及相关免疫检测试剂盒,该用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原可以高灵敏度、高特异性和高稳定性地检测血液或唾液中的HPV抗体,从而可以为医生准确诊断病人宫颈上皮内瘤变和子宫颈癌带来依据,进而及时采取治疗,以防止癌症发生,或癌症扩散,及时减轻病人痛苦,由其制成的免疫检测试剂盒可以快速简单准确地检测血液或唾液中的HPV抗体,适于大规模推广应用。为了实现上述目的,在本专利技术的第一方面,提供了一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原,其特点是,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原选自如SEQ ID N0:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO: 3所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列以及与SEQ ID N0:5所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列中的一种或几种。较佳地,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原的第m+2位、第m+3位、第m+5位、第 m+6 位以及第 m+8-m+12 位氨基酸依次是 Asp、Ser、Glu、Glu、Asp、Glu、lie、Asp 和Gly,其中 m ^ O0较佳地,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原采用化学合成或生物工程方法获得。例:重组蛋白,融合蛋白。在本专利技术的第二方面,提供了一种免疫检测试剂盒,其特点是,包括上述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原。较佳地,所述免疫检测试剂盒还包括载体,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原包被在所述载体上。较佳地,所述免疫检测试剂盒还包括标记的抗人乳头瘤病毒抗体的二抗。二抗用来检测人血清中的抗体IgG,IgM,或IgA.所用标记物可以是辣根过氧化物酶,碱性磷酸酶,荧光分子FITC (或其它荧光标记),化学发光检测。检测方法可以是显色法,荧光方法,化学发光,电化学发光法进行定性、定量分析。更佳地,所述的标记的抗人乳头瘤病毒抗体的二抗是辣根过氧化物酶标记的抗人乳头瘤病毒抗体的二抗。在本专利技术的第三方面,提供了上述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原或上述的免疫检测试剂盒在检测人体液中抗人乳头瘤病毒抗体中的应用。较佳地,所述体液是血液或唾液。本专利技术的有益效果在于:本专利技术的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原选自如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID N0:3所示的氨基酸序列、如S本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原,其特征在于,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原选自如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列以及与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列中的一种或几种。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原,其特征在于,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原选自如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、如SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列、如SEQ ID N0:3所示的氨基酸序列、如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列、如SEQ IDNO: 5所示的氨基酸序列、与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列、与SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列以及与SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列具有80%同源性的氨基酸序列中的一种或几种。2.根据权利要求1所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原,其特征在于,所述的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的...
【专利技术属性】
技术研发人员:常小迦,张杰成,许虹,
申请(专利权)人:艾托金生物医药苏州有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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