基于环介导等温扩增技术的胡萝卜成分快速检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于环介导等温扩增技术的胡萝卜成分快速检测试剂盒及其检测方法，属于食品和饮料中植物源性成分的定性检测技术，具体地说是用环介导等温扩增技术检测食品和饮料中胡萝卜成分的试剂盒及方法。试剂盒包括10×Bstbuffer、dNTP、硫酸镁、甜菜碱、上游内引物、下游内引物、上游外引物、下游外引物、上游环引物、下游环引物、BstDNA聚合酶、显色剂和阳性对照；其中10×Bstbuffer中含有三羟基甲基氨基甲烷、氯化钾、硫酸铵、硫酸镁和曲拉通X-100；胡萝卜成分的环介导等温扩增检测方法包括食品和饮料DNA的提取、胡萝卜成分的环介导等温扩增和结果判定。本发明专利技术的试剂盒快速、特异性强、操作简便、重复性好，方法灵敏度很高，可检测含量低至0.001%的胡萝卜成分。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，属于利用核酸扩增技术进行植物源性成分快速检测的
。
技术介绍
全球经济一体化和贸易国际化的的不断扩大，对于发展中的中国，是机遇也是挑战。目前，我国已成为世界上第五大农产品出口国，农产品进出口贸易持续增长。美国、欧盟、日本等发达国家和地区为了维护本国的经济利益，争夺国际市场，竭力通过名目繁多的检验项目和严格甚至苛刻的技术标准，对进口农产品设置贸易障碍，导致我国农产品出口增长遭受较大压力。就进出口的农产品而言，合格的产品，不仅要无毒无害，满足安全卫生要求；而且要无搀杂搀假，满足品质要求。其中品质合格，又主要包含两方面的含义:1.原料来源与标签一致。2.组分含量与标签一致。欧盟自2006年I月I日起开始实施新的食品卫生法规，新法规突出了食品生产过程中的可追溯管理与食品的可追溯性，强调食品的身份鉴定标识与健康标识。我国国家标准GB 7718-94《食品标签通用标准》和国家出入境检验检疫局发布的《进出口食品标签管理办法》，也明确提出食品标签标注内容应与食品相符。为此，国家质检总局专门发文，要求严厉打击制假制劣的违法行为，对假冒伪劣产品要依法没收并监督销毁本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于环介导等温扩增技术的胡萝卜成分快速检测试剂盒，其特征在于，其中的试剂包括（1）‑（4）：（1）环介导等温扩增反应液A包括10×Bst buffer反应缓冲液、1‑2mmol/L dNTP、5‑7mmol/L硫酸镁、0.8‑1µmol/L上游内引物、0.8‑1µmol/L下游内引物、0.1‑0.2µmol/L上游外引物、0.1‑0.2µmol/L下游外引物、0.4‑0.6µmol/L上游环引物、0.4‑0.6µmol/L下游环引物和0.7‑0.9mol/L甜菜碱；其中10×Bst buffer反应缓冲液含有200mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷‑盐酸、100mmol/L氯化钾...

【技术特征摘要】
1.一种基于环介导等温扩增技术的胡萝卜成分快速检测试剂盒，其特征在于，其中的试剂包括(I) - (4): (1)环介导等温扩增反应液A 包括 IOXBst buffer 反应缓冲液、l-2mmol/L dNTP、5_7mmol/L硫酸镁、0.8_lMmol/L上游内引物、0.8-lMmol/L下游内引物、0.1-0.2Mmol/L上游外引物、0.1-0.2Mmol/L下游外引物、0.4-0.6Mmol/L上游环引物、0.4-0.6Mmol/L下游环引物和0.7-0.9mol/L甜菜碱； 其中IOXBst buffer反应缓冲液含有200mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mmol/L氯化钾、100mmol/L硫酸铵、20mmol/L硫酸镁和I %曲拉通X-100 ； 其中上游内引物的序列为:5’-AACCACCGATGTCGCGATGCCTTTTGTGTGCGGTTGGC-3’ ；下游内引物的序列为:5’ - GTCGTTGTGTATACCCGCCGCGGGTCACAATCGAAGTGCA-3’ ；上游外引物的序列为:5’ - GAAATTGGCCTCCCGTGC-3’ ；下游外引物的序列为:5’ -GCTTAAACTCAGCGGGTAGT-3’ ；上...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙敏，高宏伟，肖西志，刘彩霞，
申请(专利权)人：山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：山东;37