从丝状菌生产有用代谢产物的方法技术

本发明专利技术涉及从丝状菌生产莽草酸等有用代谢产物的方法。通过包括以下工序的生产方法，能够得到有用代谢产物，该工序为通过抑制丝状菌的生长，特别是通过赋予比570nm短的中心波长的光刺激，使菌丝中的有用代谢产物的含量增加。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及从丝状菌生产莽草酸等有用代谢产物的方法。通过包括以下工序的生产方法，能够得到有用代谢产物，该工序为通过抑制丝状菌的生长，特别是通过赋予比570nm短的中心波长的光刺激，使菌丝中的有用代谢产物的含量增加。【专利说明】
本专利技术涉及。更详细地涉及通过在丝状菌培养时施加特定波长的光刺激等，使菌丝中的莽草酸等代谢产物含量增加的方法。
技术介绍
莽草酸是植物、微生物中包含的各种芳香族化合物共同的生物合成中间体，对植物、微生物而言是极其重要的物质。另外，该莽草酸是作为新型流行性感冒治疗药的奥司他韦(Oseltamivir) (TAMIFLU/达菲)(注册商标)的制造原料使用之外，还可以作为多种医药品、农药制造原料使用的极其有用的化合物。莽草酸现在主要通过从八角茴香(八角)中提取、精制而制造。但是，从天然物的提取法的情况下，其成分含量有不固定等的问题，因此研究着能够稳定地进行制造的方法。例如，作为合成的制造方法，报告了从奎尼酸使用维尔斯梅尔试剂(Vilsmeier reagent) >选择性地脱水制造莽草酸衍生物的方法(专利文献I)，从间苯二甲酸制造二氨基莽草酸的方法(专利文献2)，从呋喃制造二氨基莽草酸的方法(专利文献3)等。这些方法都是莽草酸衍生物的制造方法，为了制造目标莽草酸还需要进一步的工序。另外，作为从奎尼酸的制造方法，报告了使用来自醋酸菌的莽草酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶，以2阶段制造莽草酸的方法(专利文献4)，使奎尼酸成为奎尼酸酯的缩醛体后，再开始制造莽草酸的方法(专利文献5)等。作为利用微生物的制造方法，报告了使用柠檬酸杆菌属微生物的制造方法(专利文献6和7)等，还报告了以在咖啡渣中包含的绿原酸为原料，使具有绿原酸分解酶的微生物作为微生物催化剂使其反应而制造莽草酸的方法(专利文献8)等。另外，作为利用发酵法的制造方法，还已知使用大肠杆菌由发酵使其生成的方法(非专利文献I)。另一方面，目前为止，本专利技术的专利技术人报告了作为担子菌的一种的平菇的菌体生长被蓝色光抑制、以及对蓝色光显示基因表达应答(非专利文献2和3)。但是，完全不知道平菇通过受到蓝色光刺激，生长被抑制，由此会产生怎样的代谢产物。现有技术文献专利文献专利文献1:日本特许第3641384号公报专利文献2:日本特开2001-354635号公报专利文献3:日本特开2001-288152号公报专利文献4:日本特开2007-300809号公报专利文献5:日本特开平11-349583号公报专利文献6:日本特开2000-78967号公报专利文献7:日本特开2002-281993号公报专利文献8:日本特开2009-201473号公报 非专利文献非专利文献I:B.A.Bohm, Chemical Reviews, 65，435-466 (1965)非专利文献2:Nakano et al., Biosci Biotechnol Biochem.2010 ；74 (10):2160-5非专利文献3 =Nakano et al.，J.Light&Vis.Env.，35(1):90-942011
技术实现思路
专利技术所要解决的课题以往的莽草酸的制造方法，因为在制造中都需要几个阶段的工序，所以，在制造中必需要长时间和高成本，存在不适合大量生产的问题。本专利技术的专利技术人在为了解决该问题而进行的研究中，获得了通过对丝状菌进行光刺激可以生产有用代谢产物的发现，即，通过用蓝色光刺激平菇等丝状菌，菌丝体中的莽草酸量飞跃性地增加，除此以外，来自用蓝色光刺激后的菌体中的有机层的提取物显示抗肿瘤作用等，进一步进行深入研究，结果完成了本专利技术。用于解决课题的方法即，本专利技术涉及以下的丝状菌的有用代谢产物及其生产方法。 一种有用代谢产物的生产方法，其包括通过抑制丝状菌的生长，使菌丝中的有用代谢产物的含量增加的生长抑制工序。在中记载的有用代谢产物的生产方法，其中，生长抑制工序通过对丝状菌赋予比570nm短的中心波长的光刺激，抑制该丝状菌的生长。在或中记载的方法，其包括从丝状菌中提取有用代谢产物的工序。在~的任意一项中记载的方法，其中，丝状菌为担子菌。在中记载的方法，其中，担子菌为平菇属。在~的任意一项中记载的方法，其中，光刺激为蓝色光的光刺激。在~的任意一项中记载的方法,其中，以IOymolnT2S4以上照射光刺激。在~的任意一项中记载的方法，其中，以断续的照射给予光刺激。在~的任意一项中记载的方法，其中，有用代谢产物为莽草酸。在~的任意一项中记载的方法，其中，有用代谢产物为抗肿瘤性物质。由~的任意一项中记载的方法生产得到的有用代谢产物。专利技术的效果本专利技术的有用代谢产物的生产方法，能够从丝状菌有效地生产在医药等中所使用的生理活性物质和成为医药品原料的前体等。通过本专利技术，例如，能够从丝状菌有效地生产莽草酸。本专利技术的莽草酸的制造方法，只通过一阶段的工序，就能够使丝状菌的菌丝中的莽草酸含量飞跃性地增加、积累。本专利技术的方法因为使用市售的廉价材料，能够高效率地得到莽草酸，所以，能够以低成本且短时间制造莽草酸，可以稳定地供给莽草酸。本专利技术的莽草酸的制造方法是利用由光产生的菌类的生长抑制机理的方法，推断通过对暗处培养的丝状菌给予光刺激，在菌丝中生物合成莽草酸后，阻断芳香族氨基酸生物合成路径，使莽草酸在菌丝中积累，由此能够使莽草酸含量飞跃性地增加。另外，也能够以得到的莽草酸为起始物质，得到新的产物。即，本专利技术的芳香族氨基酸生物合成路径的阻断机理不仅得到莽草酸，而且通过加上再使其进一步反应的工序，能够提供用于得到以莽草酸为前体所合成的其它物质的手段。通过在药剂等中应用这些被合成的物质，能够贡献于医疗领域。此外，本专利技术的有用代谢产物的生产方法，还能够生产抗肿瘤性物质等生理活性物质。由本专利技术生产的抗肿瘤性物质，能够有效地抑制参与癌转移的FABP5基因的表达，即使微量，抗肿瘤效果也高，能够提供安全的抗肿瘤剂。【专利附图】【附图说明】图1是表示照射的光的波长与平菇菌丝生长的关系的图。图2是表示照射的蓝色光的强度与平菇菌丝生长的关系的图。图3是表示断续地进行蓝色光照射时的平菇菌丝生长变化的图。图4是表示通过有机成分添加的细胞数的观察结果的照片图。图5是表示利用半定量PCR法的β -actin基因的表达解析结果的图。图6是表示利用半定量PCR法的c-myc基因的表达解析结果的图。图7是表示利用半定量PCR法的Smad4基因的表达解析结果的图。图8是表示利用定量PCR法的FABP5基因的表达解析结果的图。【具体实施方式】在本专利技术的有用代谢产物的生产方法中使用的丝状菌，可以使用担子菌类、子囊菌类、接合菌类、变形菌类等，但特别优选担子菌类。在担子菌中包含平菇属和香菇属等，具体地包含糖皮侧耳菌(Pleurotus ostreatus)、刺芳:侧耳菌(Pleurotus eryngii)、埃杜香恭(Lentinula edodes)等。在本专利技术中使用的担子菌优选平燕属,特别优选平燕。本专利技术的有用代谢产物的生产方法，可以包括通过抑制丝状菌的生长而使菌丝中的有用代谢产物的含量增加的生长抑制工序。这样的生长抑制工序，优选通过赋予光刺激，抑制丝状菌的生长。光刺激优选为单色可见光，包含紫色、蓝紫色、蓝色、蓝本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种有用代谢产物的生产方法，其特征在于：包括通过抑制丝状菌的生长，使菌丝中的有用代谢产物的含量增加的生长抑制工序。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：小嶋政信，藤井博，
申请(专利权)人：国立大学法人信州大学，
类型：发明
国别省市：日本;JP