编码新型疱疹抗原的核酸分子、包含所述核酸分子的疫苗及其使用方法技术

本文提供编码疱疹病毒抗原的新型共有氨基酸序列的核酸序列、以及遗传构建体/载体和表达所述序列的疫苗。本文还提供使用所提供的疫苗产生针对疱疹的免疫应答的方法。

Nucleic acid molecules encoding novel herpes antigens, vaccines containing the nucleic acid molecules, and methods of use thereof

The present invention provides a nucleic acid sequence of a novel common amino acid sequence encoding herpes virus antigens, as well as a genetic construct / vector and a vaccine expressing the sequence. The present invention also provides methods for producing an immune response to herpes using the vaccine provided.

【技术实现步骤摘要】
编码新型疱疹抗原的核酸分子、包含所述核酸分子的疫苗及其使用方法专利
本专利技术涉及编码人疱疹家族病毒(Herp)蛋白及其片段的核酸序列；改进的疱疹疫苗、改进的用于诱导针对疱疹的免疫应答的方法、改进的用于针对疱疹病毒预防性和/或治疗性免疫个体的方法。专利技术背景疱疹病毒科(疱疹病毒或疱疹家族病毒)是具有相对大的复杂基因组的囊膜、双链DNA病毒的家族名称。它们在大量脊椎动物宿主的细胞核中复制，包括在人中分离的八种变体，多种各自在马、牛、鼠、猪、鸡、龟、蜥蜴、鱼中，并且甚至在一些无脊椎动物，例如牡蛎中。人疱疹病毒感染具地方性以及性接触是传播多种疱疹病毒的重要方法，所述多种疱疹病毒包括单纯性疱疹病毒1和2(HSV-1、HSV-2)、也包括人巨细胞病毒(HHV-5)以及可能包括卡波西肉瘤疱疹病毒(HHV-8)。遗传性疱疹的日益流行和新生儿感染的对应增加以及在人癌症中作为辅因子的艾普斯登-巴尔病毒(Epstein-Barrvirus)(HHV-4)和卡波西肉瘤疱疹病毒使得急切需要更好理解该复杂、以及极其成功的病毒家族。所有疱疹病毒病毒粒子的病毒粒子结构均由四种结构元件组成：1.核心：核心由形成环形的dsDNA的单一线性分子组成。2.衣壳：围绕核心的是由162个衣壳粒构成的具有100nm直径的二十面体衣壳。3.被膜：在衣壳和囊膜之间的是无定形、有时不对称、称为被膜的特征物。它由病毒酶组成，其中一些是控制细胞的化学过程和将它们转化生成病毒粒子所需的，其中一些抵御宿主细胞的即时应答，以及另外一些的功能尚不清楚。4.囊膜：囊膜是病毒粒子的外层以及由改变的宿主膜和十二种独特的病毒糖蛋白构成。它们在电子显微图中作为嵌入囊膜中短刺突出现。疱疹病毒基因组的长度范围为120至230kbp，它具有31％至75％G+C含量的碱性组合物以及含有60至120个基因。因为复制发生在细胞核内，所以疱疹病毒既能使用宿主的转录机制又能使用DNA修复酶以支持具有复杂基因阵列的大基因组。疱疹病毒基因，类似于它们真核宿主的基因，没有排列在操纵子中，并且在大部分情况下，它们具有单独的启动子。然而，不同于真核基因，极其少的疱疹病毒基因被剪接。基因被表征为细胞培养中生长必需或者非必需的。必需基因调节转录以及它们是构建病毒粒子所需要的。大部分的非必需基因用于增强病毒生长的细胞环境，使病毒抵御宿主免疫系统以及促进细胞间扩散。大量非必需基因实际上是体内感染中生长所需要的。仅在实验室细胞培养的受限环境中，它们是非必需的。所有疱疹病毒基因组含有直接和倒转的冗长末端重复。有六个末端重复排列，并且理解这些重复子如何在病毒中成功作用是目前令人感兴趣的研究部分。表征疱疹病毒科家族的成员的四种生物性能是：疱疹病毒表达参与核酸的代谢(例如胸苷激酶)、DNA合成(例如DNA解旋酶/引发酶)和蛋白的加工(例如蛋白激酶)的酶；疱疹病毒在细胞核内合成病毒基因组以及组装衣壳；它们产生的病毒感染不可避免伴随细胞破坏；以及疱疹病毒能够在它们宿主中形成和维持潜伏状态以及在细胞应力下再激活。潜伏状态包括维持在细胞核中病毒基因组稳定，仅有限地表达病毒基因的少量亚型。疱疹病毒家族，其包括巨细胞病毒和单纯疱疹病毒，可在受感染个体的体液(包括尿液、唾液、母乳、血液、眼泪、精液和阴道液)中找到。在美国，50％至80％的40岁成年人为HCMV阳性，并且没有治愈者。虽然大部分感染是“沉默式”，但HCMV能够导致未出生的婴儿和免疫缺失人群患病。HCMV阳性母亲能够导致唐氏综合征(Downsyndrome)、胎儿酒精综合征和神经管缺陷。而且，约33％的第一次被HCMV感染的妇女在怀孕时传递病毒给未出生的婴儿。目前，150个婴儿中有1个出生就有先天性HCMV感染以及750个婴儿中有1个由于HCMV出生就有先天性或者发育成永久性残疾。而且，HCMV在发展中国家和社会经济条件较差的地区很广泛。因此，开发针对HCMV的预防性和/或治疗性疫苗将降低世界上与病毒相关疾病和疾患的发病率和医疗费用。目前报道使用减毒/灭活病毒或重组蛋白的疫苗策略产生最好约35％的效能水平。由于识别诸如gB、gH、gM和gN的病毒糖蛋白的抗体(Ab)在保护条件下观察到，据认为，针对这些病毒表面靶中和Ab的引发是重要的。而且，已知T细胞表位出现在包括UL83(pp65)的特定病毒蛋白中，其特异性限定靶向pp65表位的基于T细胞的疫苗方法。已经研究用于接种针对动物和人疾病的核酸序列的直接施用，并且大量尝试集中在核酸递送的有效和高效方法以生成期望抗原的必需表达，从而得到免疫原应答，并最终取得该技术的成功。DNA疫苗具有超过诸如减毒活疫苗和基于重组蛋白疫苗的传统接种方法的多种概念上的优势。DNA疫苗安全、稳定、容易生产、以及在人体中耐受性好，临床前试验表明几乎没有质粒整合的证据[Martin,T.，等人，质粒DNA疟疾疫苗：在肌内注射后基因组整合的可能性.HumGeneTher,1999.10(5):第759-68页；Nichols,W.W.,等人，至宿主细胞基因组内的可能DNA疫苗整合.AnnNYAcadSci,1995.第772:30-9页]。此外，由于疫苗的效能不受对载体的预先存在的抗体滴度的影响的事实，DNA疫苗完全适于重复施用[Chattergoon,M.,J.Boyer,和D.B.Weiner，遗传免疫：疫苗和免疫治疗的新纪元.FASEBJ,1997.11(10):第753-63页]。然而，DNA疫苗的临床采用的一个主要障碍是当转移至较大动物时平台的免疫原性降低[Liu,M.A.和J.B.Ulmer,质粒DNA疫苗的人临床试验.AdvGenet,2005.55:第25-40页]。在DNA疫苗免疫原的工程化中目前技术进展包括密码子优化、RNA优化以及免疫球蛋白前导序列的加入提高了DNA疫苗的表达和免疫原性[Andre,S.,等人，通过使用具有优化的密码子用途的合成gp120序列进行DNA接种来引发增强的免疫应答.JVirol,1998.72(2):第1497-503页；Deml,L.,等人，密码子用途优化对编码人免疫缺陷病毒1型Gag蛋白的DNA候选疫苗的表达和免疫原性的多重效应.JVirol,2001.75(22):第10991-1001页；Laddy,D.J.,等人，基于共有区的针对禽流感的新型DNA疫苗的免疫原性.Vaccine,2007.25(16):第2984-9页；Frelin,L.,等人，密码子优化和mRNA扩增有效增强丙型肝炎病毒非结构3/4A基因的免疫原性.GeneTher,2004.11(6):第522-33页]，以及在质粒递送体系中最近开发的技术，例如电穿孔[Hirao,L.A.,等人，通过电穿孔进行的皮内/皮下免疫提高了猪和恒河猴中质粒疫苗递送和效能.Vaccine,2008.26(3):第440-8页；Luckay,A.,等人，质粒DNA疫苗设计和体内电穿孔对在恒河猴中所得疫苗特异性免疫应答的效应.JVirol,2007.81(10):第5257-69页；Ahlen,G.,等人，体内电穿孔通过增加局部DNA摄取、蛋白表达、炎症和CD3+细胞的浸润来增强丙型肝炎病毒非结构3/4ADNA的免疫原性.JImmunol,本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸分子，其包含编码选自以下的一种或多种蛋白的疱疹病毒抗原的编码序列：包含VZV‑gH(直至SEQ ID NO:99的位置841的N‑末端区)的蛋白，与VZV‑gH具有95％同源性的蛋白；包含VZV‑gL(从SEQ ID NO:99的位置849起的C‑末端区)的蛋白，与VZV‑gL具有95％同源性的蛋白；包含VZV‑gM(直至SEQ ID NO:101的位置435的N‑末端区)的蛋白，与VZV‑gM具有95％同源性的蛋白；包含VZV‑gN(从SEQ ID NO:101的位置443起的C‑末端区)的蛋白，与VZV‑gN具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:97的蛋白，与SEQ ID NO:97具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:111的蛋白，与SEQ ID NO:111具有95％同源性的蛋白；包含VZV‑gE(直至SEQ ID NO:109的位置623的N‑末端区)的蛋白，与VZV‑gE具有95％同源性的蛋白；包含VZV‑gI(从SEQ ID NO:109的位置631起的C‑末端区)的蛋白，与VZV‑gI具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:113的蛋白，与SEQ ID NO:113具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:2的蛋白；与SEQ ID NO:2具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:4的蛋白；与SEQ ID NO:4具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:6的蛋白；与SEQ ID NO:6具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:10的蛋白；与SEQ ID NO:10具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:12的蛋白；与SEQ ID NO:12具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:14的蛋白；与SEQ ID NO:14具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:16的蛋白；与SEQ ID NO:16具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:18的蛋白；与SEQ ID NO:18具有95％同源性的蛋白；包含包含SEQ ID NO:20的蛋白的蛋白；与SEQ ID NO:20具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:85的蛋白，与SEQ ID NO:85具有95％同源性的蛋白；包含HSV1‑gH(直至SEQ ID NO:87的位置838的N‑末端区)的蛋白，与HSV1‑gH具有95％同源性的蛋白；包含HSV1‑gL(从SEQ ID NO:87的位置846起的C‑末端区)的蛋白，与HSV1‑gL具有95％同源性的蛋白；包含HSV1‑gC(直至SEQ ID NO:89的位置511的N‑末端区)的蛋白，与HSV1‑gC具有95％同源性的蛋白；包含HSV1‑gD(从SEQ ID NO:89的位置519起的C‑末端区)的蛋白，与HSV1‑gD具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:91的蛋白，与SEQ ID NO:91具有95％同源性的蛋白；包含HSV2‑gH(直至SEQ ID NO:93的位置838的N‑末端区)的蛋白，与HSV2‑gH具有95％同源性的蛋白；包含HSV2‑gL(从SEQ ID NO:93的位置846起的C‑末端区)的蛋白，与HSV2‑gL具有95％同源性的蛋白；包含HSV2‑gC(直至SEQ ID NO:95的位置480的N‑末端区)的蛋白，与HSV2‑gC具有95％同源性的蛋白；包含HSV2‑gD(从SEQ ID NO:95的位置488起的C‑末端区)的蛋白，与HSV2‑gD具有95％同源性的蛋白；包含SEQ ID NO:103的蛋白，与SEQ ID NO:103具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1‑gH(直至SEQ ID NO:105的位置858的N‑末端区)的蛋白，与CeHV1‑gH具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1‑gL(从SEQ ID NO:105的位置866起的C‑末端区)的蛋白，与CeHV1‑gL具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1‑gC(直至SEQ ID NO:107的位置467的N‑末端区)的蛋白，与CeHV1‑gC具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1‑gD(从SEQ ID NO:107的位置475起的C‑末端区)的蛋白，与CeHV1‑gD具有95％同源性的蛋白；及其包含至少10个氨基酸的免疫片段。...

【技术特征摘要】
2011.01.31 US 61/438,0891.一种核酸分子，其包含编码选自以下的一种或多种蛋白的疱疹病毒抗原的编码序列：包含VZV-gH(直至SEQIDNO:99的位置841的N-末端区)的蛋白，与VZV-gH具有95％同源性的蛋白；包含VZV-gL(从SEQIDNO:99的位置849起的C-末端区)的蛋白，与VZV-gL具有95％同源性的蛋白；包含VZV-gM(直至SEQIDNO:101的位置435的N-末端区)的蛋白，与VZV-gM具有95％同源性的蛋白；包含VZV-gN(从SEQIDNO:101的位置443起的C-末端区)的蛋白，与VZV-gN具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:97的蛋白，与SEQIDNO:97具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:111的蛋白，与SEQIDNO:111具有95％同源性的蛋白；包含VZV-gE(直至SEQIDNO:109的位置623的N-末端区)的蛋白，与VZV-gE具有95％同源性的蛋白；包含VZV-gI(从SEQIDNO:109的位置631起的C-末端区)的蛋白，与VZV-gI具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:113的蛋白，与SEQIDNO:113具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:2的蛋白；与SEQIDNO:2具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:4的蛋白；与SEQIDNO:4具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:6的蛋白；与SEQIDNO:6具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:10的蛋白；与SEQIDNO:10具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:12的蛋白；与SEQIDNO:12具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:14的蛋白；与SEQIDNO:14具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:16的蛋白；与SEQIDNO:16具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:18的蛋白；与SEQIDNO:18具有95％同源性的蛋白；包含包含SEQIDNO:20的蛋白的蛋白；与SEQIDNO:20具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:85的蛋白，与SEQIDNO:85具有95％同源性的蛋白；包含HSV1-gH(直至SEQIDNO:87的位置838的N-末端区)的蛋白，与HSV1-gH具有95％同源性的蛋白；包含HSV1-gL(从SEQIDNO:87的位置846起的C-末端区)的蛋白，与HSV1-gL具有95％同源性的蛋白；包含HSV1-gC(直至SEQIDNO:89的位置511的N-末端区)的蛋白，与HSV1-gC具有95％同源性的蛋白；包含HSV1-gD(从SEQIDNO:89的位置519起的C-末端区)的蛋白，与HSV1-gD具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:91的蛋白，与SEQIDNO:91具有95％同源性的蛋白；包含HSV2-gH(直至SEQIDNO:93的位置838的N-末端区)的蛋白，与HSV2-gH具有95％同源性的蛋白；包含HSV2-gL(从SEQIDNO:93的位置846起的C-末端区)的蛋白，与HSV2-gL具有95％同源性的蛋白；包含HSV2-gC(直至SEQIDNO:95的位置480的N-末端区)的蛋白，与HSV2-gC具有95％同源性的蛋白；包含HSV2-gD(从SEQIDNO:95的位置488起的C-末端区)的蛋白，与HSV2-gD具有95％同源性的蛋白；包含SEQIDNO:103的蛋白，与SEQIDNO:103具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1-gH(直至SEQIDNO:105的位置858的N-末端区)的蛋白，与CeHV1-gH具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1-gL(从SEQIDNO:105的位置866起的C-末端区)的蛋白，与CeHV1-gL具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1-gC(直至SEQIDNO:107的位置467的N-末端区)的蛋白，与CeHV1-gC具有95％同源性的蛋白；包含CeHV1-gD(从SEQIDNO:107的位置475起的C-末端区)的蛋白，与CeHV1-gD具有95％同源性的蛋白；及其包含至少10个氨基酸的免疫片段。2.根据权利要求1所述的核酸分子，其编码选自以下的一种或多种蛋白：SEQIDNO:97；VZV-gH(直至SEQIDNO:99的位置841的N-末端区)；VZV-gL(从SEQIDNO:99的位置849起的C-末端区)；VZV-gM(直至SEQIDNO:101的位置435的N-末端区)；VZV-gN(从SEQIDNO:101的位置443起的C-末端区)；VZV-gE(直至SEQIDNO:109的位置623的N-末端区)；VZV-gI(从SEQIDNO:109的位置631起的C-末端区)；SEQIDNO:111；以及SEQIDNO:113；SEQIDNO:2；SEQIDNO:4；SEQIDNO:6；SEQIDNO:10；SEQIDNO:12；SEQIDNO:14，SEQIDNO:16；SEQIDNO:18，SEQIDNO:20；SEQIDNO:22；SEQIDNO:24；SEQIDNO:26；SEQIDNO:28；SEQIDNO:30；SEQIDNO:32；SEQIDNO:34；SEQIDNO:36；SEQIDNO:38；SEQIDNO:40；SEQIDNO:42；SEQIDNO:44；SEQIDNO:46；SEQIDNO:48；SEQIDNO:50；SEQIDNO:52；SEQIDNO:54；SEQIDNO:56；SEQIDNO:58；SEQIDNO:60；SEQIDNO:85；HSV1-gH(直至SEQIDNO:87的位置838的N-末端区)；HSV1-gL(从SEQIDNO:87的位置846起的C-末端区)；HSV1-gC(直至SEQIDNO:89的位置511的N-末端区)；HSV1-gD(从SEQIDNO:89的位置519起的C-末端区)；SEQIDNO:91；HSV2-gH(直至SEQIDNO:93的位置838的N-末端区)；HSV2-gL(从SEQIDNO:93的位置846起的C-末端区)；HSV2-gC(直至SEQIDNO:95的位置480的N-末端区)；HSV2-gD(从SEQIDNO:95的位置488起的C-末端区)；SEQIDNO:103；CeHV1-gH(直至SEQIDNO:105的位置858的N-末端区)；CeHV1-gL(从SEQIDNO:105的位置866起的C-末端区)；CeHV1-gC(直至SEQIDNO:107的位置467的N-末端区)；CeHV1-gD(从SEQIDNO:107的位置475起的C-末端区)。3.根据权利要求1所述的核酸分子，其包含选自以下的一种或多种序列：编码VZV-gI并包含SEQIDNO:98的核酸序列；编码VZV-gI并与SEQIDNO:98具有95％同源性的核酸序列；编码VZV-gH并包含SEQIDNO:100中核苷酸13-2535的核酸序列；编码VZV-gH并与SEQIDNO:100中核苷酸13-2535具有95％同源性的核酸序列；编码VZV-gL并包含SEQIDNO:100中核苷酸2557-3033的核酸序列；编码VZV-gL并与SEQIDNO:100中核苷酸2557-3033具有95％同源性的核酸序列；编码VZV-gM并包含SEQIDNO:102中核苷酸13-1317的核酸序列；编码VZV-gM并与SEQIDNO:102中核苷酸13-1317具有95％同源性的核酸序列；编码VZV-gN并包含SEQIDNO:102中核苷酸1339-1599的核酸序列；编码VZV-gN并与SEQIDNO:102中核苷酸1339-1599具有95％同源性的核酸序列；编码VZV-gE并包含SEQIDNO:110中核苷酸13-1881的核酸序列；编码VZV-gE并与SEQIDNO:110中核苷酸13-1881具有95％同源性的核酸序列；编码VZV-gI并包含SEQIDNO:110中核苷酸1903-2964的核酸序列；编码VZV-gI并与SEQIDNO:110中核苷酸1903-2964具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:112的核酸序列；与SEQIDNO:112具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:114的核酸序列；与SEQIDNO:114具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:1的核酸序列；与SEQIDNO:1具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:3的核酸序列；与SEQIDNO:3具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:5的核酸序列；与SEQIDNO:5具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:9的核酸序列；与SEQIDNO:9具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:11的核酸序列；与SEQIDNO:11具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:13的核酸序列；与SEQIDNO:13具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:15的核酸序列；与SEQIDNO:15具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:17的核酸序列；与SEQIDNO:17具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:19的核酸序列；与SEQIDNO:19具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:86的核酸序列；与SEQIDNO:86具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV1-gH的DNA序列的核酸序列；与编码HSV1-gH的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV1-gL的DNA序列的核酸序列；与编码HSV1-gL的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV1-gC的DNA序列的核酸序列；与编码HSV1-gC的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV1-gD的DNA序列的核酸序列；与编码HSV1-gD的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:92的核酸序列；与SEQIDNO:92具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV2-gH的DNA序列的核酸序列；与编码HSV2-gH的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV2-gL的DNA序列的核酸序列；与编码HSV2-gL的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV2-gC的DNA序列的核酸序列；与编码HSV2-gC的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码HSV2-gD的DNA序列的核酸序列；与编码HSV2-gD的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含SEQIDNO:104的核酸序列；与SEQIDNO:104具有95％同源性的核酸序列；包含编码CeHV1-gH的DNA序列的核酸序列；与编码CeHV1-gH的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码CeHV1-gL的DNA序列的核酸序列；与编码CeHV1-gL的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码CeHV1-gC的DNA序列的核酸序列；与编码CeHV1-gC的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；包含编码CeHV1-gD的DNA序列的核酸序列；与编码CeHV1-gD的DNA序列具有95％同源性的核酸序列；以及包含编码含有至少10个氨基酸的免疫片段的核酸序列的其片段。4.根据权利要求1所述的核酸分子，其包含选自以下的一种或多种核苷酸序列：SEQIDNO:98；编码VZV-gH的SEQIDNO:100中的核苷酸13-2535；编码VZV-gL的SEQIDNO:100中的核苷酸2557-3033；编码VZV-gM的SEQIDNO:102中的核苷酸13-1317；编码VZV-gN的SEQIDNO:102中的核苷酸1339-1599；编码VZV-gE的SEQIDNO:110中的核苷酸13-1881；编码VZV-gI的SEQIDNO:110中的核苷酸1903-2964；SEQID...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·B·韦纳，D·J·夏洛克，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学托管会，
类型：发明
国别省市：美国,US