抗CGRP组合物及其用途制造技术

本发明专利技术是针对于对CGRP具有结合特异性的抗体和其片段。本发明专利技术的另一个实施方案涉及本文所述的抗体和其结合片段，其包含本文所述的VH、VL和CDR多肽的序列，以及编码其的多核苷酸。本发明专利技术还涵盖抗CGRP抗体和其结合片段缀合于一种或多种功能性或可检测部分的缀合物。本发明专利技术还涵盖制造所述抗CGRP抗体和其结合片段的方法。本发明专利技术的实施方案还涉及抗CGRP抗体和其结合片段用于诊断、评估以及治疗与CGRP相关的疾病和病症的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CGRP组合物及其用途本申请要求了2011年5月20日提交的名称为“抗CGRP组合物及其用途(ANTI-CGRPCOMPOSITIONSANDUSETHEREOF)”的美国临时申请No.61/488,660（代理人备案No.67858.730300）的权益，该临时申请特此以全文引用的方式并入。本申请包含通过EFS-Web以ASCII格式提交的序列表并且特此以全文引用的方式并入。所述ASCII副本创建于2012年5月18日，命名为67858o730301.txt并且大小为203,815字节。专利技术背景专利
本专利技术涉及对人类降钙素基因相关肽（CalcitoninGeneRelatedPeptide，下文为“CGRP”）具有结合特异性的抗体和其片段（包括Fab片段）。本专利技术还涉及筛选与CGRP相关的疾病和病症的方法，以及通过施用所述抗体或其片段来预防或治疗与CGRP相关的疾病和病症的方法。相关背景描述降钙素基因相关肽(CGRP)是以长度为37个氨基酸的多功能神经肽形式产生。两种形式的CGRP，即CGRP-α和CGRP-β形式，存在于人类中并且具有类似的活性。CGRP-α与CGRP-β在人类中相差三个氨基酸，并且是源自不同的基因。CGRP肽家族包括胰淀素(amylin)、肾上腺髓质素(adrenomedullin)以及降钙素，但各自具有不同的受体和生物活性。Doods,H.,Curr.Op.Invest.Drugs,2(9):1261-68(2001)。CGRP是从众多组织如三叉神经中释放，当被活化时在脑膜中释放神经肽，从而介导神经源性炎症，其特征为血管舒张、血管渗漏以及肥大细胞退化。Durham,P.L.,NewEng.J.Med.,350(11):1073-75(2004)。CGRP的生物作用是通过CGRP受体(CGRP-R)介导，该CGRP受体由七次跨膜成分结合受体相关膜蛋白(RAMP)组成。CGRP-R进一步需要受体成分蛋白(RCP)的活性，该受体成分蛋白(RCP)对于通过G蛋白与腺苷酸环化酶有效偶联以及cAMP的产生是必要的。Doods,H.,Curr.Op.Invest.Drugs,2(9):1261-68(2001)。偏头痛是影响美国约10%成年群体的神经血管病症，并且典型地伴随着剧烈的头痛。约20-30%的偏头痛患者经历先兆，包括先于事件和/或伴随事件的局灶性神经现象。认为CGRP在偏头痛发展中起到显著作用。例如，在偏头痛的头痛期间在颈静脉血中鉴定出血浆CGRP浓度升高，排除其他神经肽。此外，根据Arulmozhi等人，在偏头痛患者中鉴定出下列：(1)血浆CGRP浓度与偏头痛之间存在强相关性；(2)输注CGRP产生类偏头痛的头痛；(3)基线CGRP水平升高；以及(4)在偏头痛发作期间血浆CGRP水平的变化与头痛强度显著相关。Arulmozhi,D.K.等人,Vas.Pharma.,43:176-187(2005)。一种有效的偏头痛治疗是施用曲坦类(triptans)，它们是基于色胺的药物家族，包括舒马曲坦(sumatriptan)和利扎曲坦(rizatriptan)。这个家族的成员对包括5-HT1B、5-HT1D以及5-HT1F在内的多种5-羟色胺受体具有亲和力。这个家族成员的药物选择性地收缩脑血管，但也对冠状血管造成血管收缩作用。Durham,P.L.,NewEng.J.Med.,350(11):1073-75(2004)。在确定患有心脏病的患者中在施用后存在冠状动脉痉挛的理论风险，并且在服用曲坦类后心脏事件可能很少发生。应注意，冠状动脉血管疾病患者禁用。类似地，通常可能通过施用某些麻醉剂或非甾体抗炎药物(NSAID)来解决疼痛问题。然而，这些治疗的施用可能以某些负面后果为代价。NSAID有可能造成肾衰竭、肠道出血以及肝功能障碍。麻醉剂有可能造成恶心、呕吐、精神功能受损以及成瘾。因此，期望鉴定出替代的疼痛疗法以避免这些负面后果中的某些。认为CGRP在包括但不限于偏头痛、头痛以及疼痛的许多疾病和病症中起作用。例如，据报道CGRP可能与膀胱过度活动症相关或甚至在膀胱过度活动症中起到病因作用。CGRP可能与膀胱过度活动症病状相关的证据包括以下事实：CGRP存在于泌尿道、DRG以及脊髓中（Wharton等人,1986Neurosci(3):727）；以及C纤维传入对于传送排尿中所涉及的脉冲至脊髓是关键的（Yoshida等人,2011JPharmacolSci(112):128）。此外，已经报道Botox的膀胱内施用在醋酸诱发的膀胱疼痛模型中抑制了CGRP并且显著降低了排尿间隔（Chuang等人,2004JUrol(172):1529；Chuang等人,2009JUrol(182):786）。CGRP可能在这种病状中起到病因作用的证据为：近来公开的专利申请包含据称表明其中公开的抗CGRP抗体在松节油诱发的膀胱过度活动症模型中降低了膀胱收缩次数的资料(PfizerWO2011/024113)。由于察觉到这些和其他病症中涉及CGRP，因此本领域中需要可用于预防或治疗与CGRP相关的疾病和病症并且同时避免不良副作用的组合物和方法。本领域中需要降低或抑制与CGRP相关的疾病或病症如偏头痛、头痛、膀胱过度活动症以及疼痛的组合物或方法。专利技术概要本专利技术是针对于对CGRP具有结合特异性的特异性抗体和其片段，特别是具有所需表位特异性、高亲和力或亲合力和/或功能特性的抗体。本专利技术的另一个实施方案涉及本文所述的抗体，其包含本文所述的VH、VL以及CDR多肽的序列，以及编码其的多核苷酸。本专利技术的优选实施方案是针对能够结合至CGRP和/或抑制由CGRP与CGRP受体（“CGRP-R”）结合而介导的生物活性的嵌合或人源化抗体和其片段（包括Fab片段）。在本专利技术的另一个优选实施方案中，涵盖抑制由CGRP-α、CGRP-β以及大鼠CGRP驱动的cAMP产生的全长抗体和其Fab片段。在本专利技术的另一个优选实施方案中，涵盖在施用后降低接受者中的血管舒张的全长和其Fab片段。在本专利技术的另一个实施方案中，能够结合于CGRP的嵌合或人源化抗体和其片段（包括Fab片段）可用于针对降低、治疗或预防以下疾病的方法中：偏头痛（有或无先兆）、癌症或肿瘤、与癌症或肿瘤生长相关的血管生成、与癌症或肿瘤存活相关的血管生成、体重减轻、疼痛、偏瘫性偏头痛、丛集性头痛、偏头痛性神经痛、慢性头痛、紧张性头痛、一般性头痛、潮热、慢性阵发性半侧颅痛、由于头或颈中的潜在结构问题而致的继发性头痛、脑神经痛、窦性头痛（例如与窦炎相关）以及过敏症诱发的头痛或偏头痛。本专利技术的抗体和抗体片段特别可用于治疗、预防、改善、控制或降低一种或多种下列病状或疾病的风险：膀胱过度活动症和包括膀胱感染、疼痛在内的其他泌尿病状；慢性疼痛；神经源性炎症和炎性疼痛；神经性疼痛；眼痛；牙痛；手术后疼痛、创伤有关的疼痛、灼伤有关的疼痛、糖尿病；非胰岛素依赖型糖尿病和其他炎症性自身免疫病症、血管病症；炎症；关节炎；支气管高反应性、哮喘；休克；败血症；阿片剂戒断综合征；吗啡耐受；男性和女性中的潮热；过敏性皮炎；牛皮癣；脑炎；脑创伤；癫痫症；神经退行性疾病；包括瘙痒症、神经源性皮肤发红、玫瑰色皮本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.05.20 US 61/488,6601.一种分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其包含轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)，其中轻链可变区(VL)包括SEQIDNO:55的VLCDR1、SEQIDNO:56的VLCDR2以及SEQIDNO:57的VLCDR3；重链可变区(VH)包括SEQIDNO:58的VHCDR1、SEQIDNO:59的VHCDR2以及SEQIDNO:60的VHCDR3。2.根据权利要求1所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其包含：(i)具有SEQIDNO:53所示的氨基酸序列的VH多肽，或展现与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的其变体；和/或(ii)具有SEQIDNO:51所示的氨基酸序列的VL多肽，或展现与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的其变体。3.根据权利要求1所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中，所述抗人类CGRP抗体或抗体片段包含：(i)具有SEQIDNO:51所示的氨基酸序列的VL多肽，和具有SEQIDNO:53所示的氨基酸序列的VH多肽；或(ii)具有SEQIDNO:52所示的氨基酸序列的轻链多肽和具有SEQIDNO:54所示的氨基酸序列的重链多肽。4.根据权利要求1-3任一项所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其：(i)为未糖基化的；(ii)为糖基化的，但仅包含甘露糖残基；(iii)为糖基化的，但未被N-糖基化；(iv)包含已被修饰以改变效应功能、半衰期、蛋白水解和/或糖基化的Fc区；(v)为人源化抗体、嵌合抗体、单链抗体或单价抗体；(vi)为选自下述的抗体片段：Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段或单价抗体；(vii)直接或间接连接至可检测标记或治疗剂；(viii)以小于或等于10-4S-1、5×10-5S-1、10-5S-1、5×10-6S-1、10-6S-1、5×10-7S-1或10-7S-1的解离速率(Koff)结合于CGRP；(ix)抑制CGRP与CGRP-R和/或其多聚体的缔合，与CGRP-CGRP-R复合物中的一种或多种另外的蛋白质的缔合，和/或拮抗其生物效应；(x)进一步包含效应子部分，所述效应子部分为可检测部分或功能性部分，其中所述可检测部分任选地为荧光染料、酶、底物、生物发光材料、放射性材料或化学发光材料，和所述功能性部分任选地为链霉亲和素、亲和素、生物素、细胞毒性剂或放射性材料；或(xi)包含源自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的人类Fc。5.根据权利要求4所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中所述细胞毒性剂是细胞毒素。6.根据权利要求4所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其特异性结合于表达CGRP的人类细胞和/或结合于体内循环的可溶性CGRP分子和/或在与结合CGRP的细胞相关的疾病患者中于人类细胞上表达或通过人类细胞表达的CGRP，其中所述疾病是具有CGRP相关疼痛的病状。7.根据权利要求6所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中所述疼痛选自癌症疼痛、炎性疼痛、内脏疼痛、手术后切口疼痛、复杂区域性疼痛综合征、骨折疼痛、骨质疏松性骨折疼痛、由灼伤产生的疼痛、痛风性关节疼痛、与镰状细胞危象相关的疼痛、神经源性疼痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、幻肢痛、经痛、骨关节炎疼痛、类风湿性关节炎疼痛和下背痛。8.根据权利要求7所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中所述癌症疼痛选自原发性骨癌疼痛、转移性骨癌疼痛、与肝细胞癌相关的疼痛和与乳腺癌相关的疼痛；所述内脏疼痛为与胃-食管反流相关的内脏疼痛。9.根据权利要求6所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中所述疾病选自内脏疼痛、头痛和膀胱过度活动症。10.根据权利要求6所述的分离的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中所述疾病是选自：有先兆的偏头痛、无先兆的偏头痛、慢性偏头痛、高频发作性偏头痛或月经性偏头痛。11.一种或多种核酸序列，其编码根据权利要求1-10任一项所述的抗人类CGRP抗体或抗体片段，其中所述一种或多种核酸序列任选地包含酵母或人类偏爱的密码子。12.一种载体，其包含根据权利要求11所述的一种或多种核酸序列，其中所述载体任选地为质粒或重组病毒载体。13.一种培养的或重组的细胞，其表达由根据权利要求11所述的一种或多种核酸序列和/或根据权利要求12所述的载体编码的抗体或抗体片段，其中所述细胞任选地选自哺乳动物、细菌、真菌或昆虫细胞。14.根据权利要求13所述的细胞，其中所述细胞为二倍体酵母细胞。15.根据权利要求1-10任一项所述的抗人类CGRP抗体或抗体片段用于制备药物的用途，所述药物用于治疗可通过施用治疗有效量的CGRP拮抗剂治疗的疾病或病状，和/或改善或减少可通过施用CGRP拮抗剂治疗的疾病或病状的症状，其中所述疾病或病状与表达CGRP的细胞相关，并且其中所述疾病或病状的特征在于与血管舒张相关的升高的CGRP。16.根据权利要求1-10任一项所述的抗人类CGRP抗体或抗体片段用于制备药物的用途，所述药物用于治疗可通过施用治疗有效量的CGRP拮抗剂治疗的疾病或病状，和/或改善或减少可通过施用CGRP拮抗剂治疗的疾病或病状的症状，其中所述疾病或病状的特征在于与血管舒张相关的升高的CGRP并且所述疾病或病状是具有CGRP相关疼痛的病状。17.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛选自癌症疼痛、炎性疼痛、内脏疼痛、手术后切口疼痛、复杂区域性疼痛综合征、骨折疼痛、骨质疏松性骨折疼痛、由灼伤产生的疼痛、痛风性关节疼痛、与镰状细胞危象相关的疼痛、神经源性疼痛、神经性疼痛、伤害性疼痛、幻肢痛、经痛、骨关节炎疼痛、类风湿性关节炎疼痛和下背痛。18.根据权利要求16所述的用途，其中所述癌症疼痛选自原发性骨癌疼痛、转移性骨癌疼痛、与肝细胞癌相关的疼痛和与乳腺癌相关的疼痛；所述内脏疼痛为与胃-食管反流相关的内脏疼痛。19.根据权利要求16所述的用途，其中所述疼痛选自慢性疼痛；神经源性炎症和炎性疼痛；神经性疼痛；眼痛；牙痛；手术后疼痛；以及创伤有关的疼痛。20.根据权利要求16所述的用途，其中所述疾病选自膀胱过度活动症和头痛。21.根据权利要求15-20任一项所述的用途，其中所述CGRP抗体或抗体片段与另一种治...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·R·科瓦切维奇，L·F·加西亚马丁内斯，K·奥尔森，B·H·杜察尔，J·J·比尔格伦，J·A·莱瑟姆，D·M·米切尔，P·D·麦克尼尔，N·M·詹森，MC·卢米斯，
申请(专利权)人：奥尔德生物控股有限责任公司，
类型：
国别省市：