抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒制造技术

技术编号:9736487 阅读:208 留言:0更新日期:2014-03-06 04:49
一种抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒,包括用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC?No.0001,还包括用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC?No.0002,用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株与用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有不同的结合表位。其目的是提供一种特异性强,灵敏度高,检测范围广,检测结果准确可靠的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒
本专利技术涉及一种抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒。
技术介绍
甘露(聚)糖结合凝聚素,英文名:mannan-binding lectin,缩写为MBL。甘露(聚)糖结合凝聚素是肝脏产生的一种血清C型凝集素,可以与甘露糖结合的急性期蛋白,可以调理带甘露糖的病原体,激活补体系统,参与固有免疫应答、激活补体、调节炎症、促进调理吞噬和清除凋亡细胞。当适应性免疫系统尚不成熟(幼儿期)或已被抑制(例如器官移植后,或癌症化疗期间)通常MBL的缺乏可能导致感染易感性的增加。MBL不足与自身免疫性疾病有重要的相关,如系统性红斑狼疮,类风湿关节炎,预后较差的囊肿性纤维化等。MBL组成了机体先天免疫的第一道防线,在病原微生物感染早期,特异性抗体形成之前,MBL就已经通过其“糖基识别域”结合病原微生物。因此,检测人血清或血浆中的甘露糖结合凝聚素(MBL)含量,可用于作为与MBL缺失或不足相关疾病的诊断参考指标,并可指导临床个体化治疗。但目前检测人血清或血浆中的甘露糖结合凝聚素(MBL)含量的试剂盒的特异性较差,灵敏度不够高,检测范围较窄,导致检测结果不够可靠。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种特异性强,灵敏度高,检测范围广,检测结果更加准确可靠的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒。本专利技术的杂交瘤细胞株,包括用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC N0.7592,还包括用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC N0.7591,用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株与用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有不同的结合表位。本专利技术的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体,包括权利要求1所述的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,还包括权利要求1所述的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。本专利技术的甘露糖结合凝集素(MBL)定量检测试剂盒,包括权利要求2所述的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,还包括权利要求2所述的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。本专利技术的的甘露糖结合凝集素(MBL)定量检测试剂盒,还包括MBL抗体包被板I块96人份MBL 参考品:0ng / ml、Ing / ml、2ng / ml、5ng / ml、IOng / ml、20ng / ml、50ng / ml 和 IOOng / ml 各 I 瓶,每瓶 lml,样品稀释液I瓶50ml酶结合物I瓶Ilml显色剂AI瓶6ml显色剂BI瓶6ml终止液I瓶6ml洗涤液(30X)I瓶20ml 说明书1份 不干胶片2张 密封袋I套[0011 ] 所述酶结合物为辣根过氧化物酶;所述显色剂A采用如下方法制成:向容器中加入11毫摩尔(mmol)的柠檬酸,其分子量为192.1225晕摩尔(mmol)的朽1樣酸二钠,其分子量为294.100.5毫摩尔(mmol)的过氧化氢脲,其分子量为94.07`再向容器中加去离子水至1000ml,即得显色剂A ;所述显色剂B采用如下方法制成:向容器中加入11毫摩尔(mmol)的柠檬酸,其分子量为192.1211.6毫摩尔(mmol)的盐酸,其分子量为36.50.5毫摩尔(mmol)的乙二胺四乙酸(EDTA),其分子量为292.242.1毫摩尔(mmol)的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),其分子量为240.34再向容器中加去离子水至1000ml,即得显色剂B ;所述终止液为2mol的硫酸。本专利技术的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,于2013年07月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号,保藏号为CGMCC N0.7592,建议的分类命名为:产生抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞;本专利技术的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,于2013年07月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号,保藏号为CGMCC N0.7591,建议的分类命名为:产生抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞。本专利技术的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒,其包括用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,还包括用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,都是通过本领域已知的技术产生的,其中用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株与用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有不同的结合表位。试验表明,本专利技术的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒具有特异性强,灵敏度高,检测范围广,检测结果准确可靠的特点,其灵敏度:^ 0.20ng / mL,精密性:用本方法检测低、中、高三组样品(n=10),分析内变异系数CV%< 10.0%,线性:r ^ 0.9800。因此,本专利技术的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒具有突出的实质性特点和显著的进步。下面对本专利技术的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体及试剂盒作进一步详细说明。【具体实施方式】甘露(聚)糖结合凝集素是由肝脏合成、分泌至血的一种多糖结合蛋白,属C型凝集素超家族成员。MBL组成了机体先天免疫的第一道防线。在病原微生物感染早期、特异性抗体形成之前MBL就已经通过其“糖基识别域”结合病原体表面的甘露糖、N-乙酰葡萄糖、葡萄糖和岩藻糖等碳水化合物继而与丝氨酸蛋白酶结合,形成MBL相关的丝氨酸蛋白酶(MASP)激活补体或直接介导调理吞噬作用杀灭病原。研究表明MBL的缺损与许多自身免疫病的发生以及出现易受感染状态相关。进一步的阐明MBL与疾病的关系,将MBL应用于人类疾病的治疗与预防,是免疫研究的新热点。因此,制备MBL的特异性单克隆抗体并建立检测方法就成为必不可少的基础。本专利技术的杂交瘤细胞株,包括用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC N0.7592,还包括用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC N0.7591,用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株与用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有不同的结合表位。本专利技术的抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体,包括上述的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,还包括上述的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。本专利技术的 甘露糖结合凝集素(MBL)定量检测试剂盒,包括上述的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,以及上述的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,还包括MBL抗体包被板I块96人份MBL 参考品:0ng / ml>Ing / ml、2ng / ml、5ng / ml>IOng / ml、20ng / ml、50ng / ml 和 IOOng / ml 各 I 瓶,本文档来自技高网...

【技术保护点】
杂交瘤细胞株,其特征在于包括用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC?No.7592,还包括用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC?No.7591,用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株与用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有不同的结合表位。

【技术特征摘要】
1.杂交瘤细胞株,其特征在于包括用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC N0.7592,还包括用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其保藏号为CGMCC N0.7591,用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株与用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有不同的结合表位。2.抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体,其特征在于包括权利要求1所述的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,还包括权利要求1所述的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。3.甘露糖结合凝集素定量检测试剂盒,其特征在于包括权利要求2所述的用作包被抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体,还包括权利要求2所述的用作标记抗甘露糖结合凝聚素的单克隆抗体的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。4.根据权利要求3所述的甘露糖结合凝集素定量检测试剂盒,其特征在于还包括 MBL抗体包被板 I块96人份MBL 参考品:Ong / ml、Ing / ml、2ng / ml、5ng / ml、IOng /...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨明非张庶民
申请(专利权)人:佛山市天海医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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