抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用制造技术

技术编号:9691541 阅读:142 留言:0更新日期:2014-02-20 08:53
本发明专利技术属于生物技术领域,涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。本发明专利技术通过化学合成针对上述农药公共结构的人工半抗原,进而制备完全抗原,免疫Balb/C鼠,通过杂交瘤技术制备特异性强的单克隆抗体,并用于农产品和农业生产环境中上述三种农药残留的高灵敏快速检测。本发明专利技术抗体的制备技术可行,抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备,易于规模化生产。

【技术实现步骤摘要】
抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用
本专利技术属于生物
,涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。
技术介绍
近20年来,随着农业生产的急速发展,有机磷农药的产量和使用量不断上升。大量使用,甚至不正当使用有机磷农药,使得有机磷农药残留问题日益突出。这不仅使环境安全,人们身体健康受有机磷农药威胁的概率增大,而且农药最高残留限量也成为世界各国针对中国农产品进出口的重要技术性贸易壁垒。因此,发展有机磷农药残留快速、简便、灵敏的检测方法对环境、食品安全,人们身体健康以及促进社会主义社会经济发展有着举足轻重的作用。目前,有机磷农药的残留检测多采用薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等方法。这些方法结果可靠,灵敏度高,已有相关的技术标准可供参考。但由于需要昂贵的仪器、专门的操作人员,以及样品前处理复杂、成本高、时间长,因此不能更好地满足快速简便的现场检测要求。有机磷农药的免疫检测方法具有快速、廉价、简便、特异的优点,可便携而进行现场监测。克服了传统检测方法的缺点。通过化学合成有机磷农药的半抗原,与载体蛋白偶联获得完全抗原,制备针对环境和农产品中有机磷农药水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷的单克隆抗体,建立上述三种有机磷农药免疫学检测方法。该方法的完成,将解决针对高毒有机磷农药水胺硫磷、甲基异柳磷、乙基异柳磷快速免疫检测方法中半抗原合成、人工抗原合成、单克隆抗体制备等关键技术,并建立上述三种农药的免疫快速检测体系。该专利不仅为食品安全检测,而且为我国农产品等的出入境检测,环境监测部门的水域监测提供了一种新的技术手段和检测方法。对我国农产品的可持续健康发展、解决食品安全问题具有重要的现实意义和重要的社会、经济价值。·
技术实现思路
本专利技术的目的是提供针现有技术的上述不足,提供一种抗三种有机磷农药的单克隆抗体。本专利技术的另一目的是提供该单克隆抗体的应用。本专利技术的目的可通过如下技术方案实现:分泌抗三种有机磷农药的单克隆抗体的杂交瘤细胞FQ-6E,于2013年8月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2013105,所述的三种有机磷农药为水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷。一种抗水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷的单克隆抗体,由保藏编号为CCTCCNO:C2013105的杂交瘤细胞FQ-6E分泌。本专利技术所述的水胺硫磷等三种有机磷农药单克隆抗体的制备方法,包括如下步骤:(I)针对水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷的公共结构化学合成人工半抗原,合成路线如下:本文档来自技高网
...

【技术保护点】
分泌抗三种有机磷农药的单克隆抗体的杂交瘤细胞FQ?6E,于2013年8月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC?NO:C2013105,所述的三种有机磷农药为水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷。

【技术特征摘要】
1.分泌抗三种有机磷农药的单克隆抗体的杂交瘤细胞FQ-6E,于2013年8月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2013105,所述的三种有机磷农药为水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷。2.一种抗水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷的单克隆抗体,其特征在于由权利要求1所述的杂交瘤细胞分泌。3.权利要求2所述的单克隆抗体的制备方法,其特征在于主要包含以下步骤: (1)针对水胺硫磷、甲基异柳磷和乙基异柳磷的公共结构化学合成人工半抗原,合成路线如下: 4.根据权利要求3所述的单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述的人工半抗原通过以下方法制备: ①O-甲基-0-(2-异丙氧基羰基苯基)硫代磷酰氯的合成 O-甲基硫代磷酰二氯、K2CO3和乙腈搅拌均匀,冷却至10°c以下,滴加含水杨酸异丙酯的乙腈溶液,20°C~28°C下继续搅拌30~45min,减压蒸去溶剂,柱层析分离,得无色液体产物O-甲基-0-(2-异丙氧基羰基苯基)硫代磷酰氯;其中O-甲基硫代磷酰二氯=K2CO3:乙腈=(18~20)mol:(35~40)mol:1L ;含水杨酸异丙酯的乙腈溶液中水杨酸异丙酯的浓...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘凤权王利民秦娜方庆奎华修德
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1