本发明专利技术涉及一种可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，其保藏号为CCTCC?No：C2013132。该杂交瘤细胞的分泌产量高，其分泌得到的抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体具有高亲和力、高特异性等优点，可广泛应用在视黄醇结合蛋白检测领域，如检测试剂或检测设备的制备领域等，在特异性、灵敏度和检测率等方面较之传统的检测方法具有显著的优势。此外，本发明专利技术还涉及一种该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体、该杂交瘤细胞及其单克隆抗体的应用。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，其保藏号为CCTCC?No：C2013132。该杂交瘤细胞的分泌产量高，其分泌得到的抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体具有高亲和力、高特异性等优点，可广泛应用在视黄醇结合蛋白检测领域，如检测试剂或检测设备的制备领域等，在特异性、灵敏度和检测率等方面较之传统的检测方法具有显著的优势。此外，本专利技术还涉及一种该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体、该杂交瘤细胞及其单克隆抗体的应用。【专利说明】可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及应用
本专利技术涉及视黄醇结合蛋白免疫检测领域，尤其是涉及一种可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及应用。
技术介绍
目前临床上用于肾功能损伤早期诊断的尿小分子蛋白有β2微球蛋白和RBP (视黄醇结合蛋白)。β2微球蛋白在ρΗ< 5.5时很不稳定，易降解，且β 2微球蛋白在尿液中的半衰期较短，在ΡΗ4.0环境中放置4小时后有70%的降解，而RBP在相同条件下仅有降解5%。因此，RBP相对于β 2微球蛋白在肾功能损伤诊断中更稳定，更可靠。RBP是一种低分子蛋白，分子量约为21KD，主要由肝细胞合成，主要功能是将视黄醇从肝脏转运到上皮细胞并能与视网膜上皮组织特异性结合，为其提供维生素Α。肝脏中分泌的RBP-视黄醇聚合物与转铁蛋白形成稳定的蛋白复合物在血液系统中循环。RBP-视黄醇-转铁蛋白复合体在视黄醇释放后解体，RBP以游离的形式存在于血液系统，由肾小球滤过，再由近曲小管上皮细胞重吸收、降解。血液中游离的RBP可以从肾小球滤过，其中99.9%经近曲小管上皮细胞重吸收、降解。正常情况下，尿液中RBP排泄量甚微(低于300ng/mL)。若肾小管病变，则重吸收功能下降，会导致尿液中的RBP大量上升。在肾小管损伤病人尿液中，RBP含量大于300ng/mL，一般可以达到正常人的5倍以上，严重者其尿液中的RBP含量甚至可以达到10000ng/mL。故尿液中RBP增高具有早期诊断意义，被认为是肾小管损伤的一个良好早期标志物，对RBP的检测已经被广泛应用于临床上对肾脏损伤的诊断中。RBP的临床检测意义还包括急性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎、糖尿病性肾病和慢性肾功能衰竭疾病等，其血`清RBP的浓度水平均升高。同时RBP与肝脏病也有关系，RBP与血清胆红素、谷草转氨酶和碱性磷酸酶活力均显著负相关，坏死性肝硬化、胆汁性肝硬化及急、慢性肝炎患者的血清RBP水平均显著低于正常对照组。传统的RBP的测定方法主要有酶联免疫法、放射免疫法及乳胶免疫比浊法。免疫比浊法因其试剂稳定，容易实现检测的高通量及操作自动化，且检测结果快速、准确、可靠，因此成为临床实验室最具前景的测定方法。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。此外，还有必要提供上述杂交瘤细胞或其分泌的单克隆抗体在医学检测领域的应用。一种可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No:C2013132。上述可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在制备诊断肾脏损伤疾病或肝脏疾病的检测试剂或检测设备领域的应用。上述可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在制备视黄醇结合蛋白检测试剂或检测设备领域的应用。一种由上述可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。上述单克隆抗体在制备诊断肾脏损伤疾病或肝脏疾病的检测试剂或检测设备领域的应用。上述单克隆抗体在制备视黄醇结合蛋白检测试剂或检测设备领域的应用。一种视黄醇结合蛋白检测试剂盒，包括上述单克隆抗体。在其中一个实施例中，所述视黄醇结合蛋白检测试剂盒包括第一试剂和第二试剂，其中，所述第一试剂包括30_60mmol/L Tris缓冲液、60_95mmol/L聚乙二醇、l_5mmol/L叠氮钠、6-13mmol/L乙二胺四乙酸钠以及l_5mmol/L牛血清白蛋白；所述第二试剂包括30-60mmol/L Tris缓冲液、结合有所述单克隆抗体的胶乳颗粒、l_5mmol/L吐温-20、0.5_3mmol/L叠氮钠、6_13mmol/L乙二胺四乙酸钠以及l_5mmol/L牛血清白蛋白。上述杂交瘤细胞，命名为RBP-2B6，于2013年8月28日保藏在湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心(即中国典型培养物保藏中心)，保藏号是CCTCC No:C2013132。上述杂交瘤细胞的分泌产量高，其分泌得到的抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体具有高亲和力、高特异性等优点，可广泛应用在视黄醇结合蛋白检测领域，如检测试剂或检测设备的制备领域等，在特异性、灵敏度和检测率等方面较之传统的检测方法具有显著的优势。【专利附图】【附图说明】图1为当检测原为重组RBP抗原，包被浓度为2 μ g/mL时，RBP单抗效价测定结果图；图2为实施例2中的检测试剂与对照试剂检测结果相关性图。【具体实施方式】下面主要结合附图及具体实施例对可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用作进一步详细的说明。本实施方式的可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞保藏在湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心(CCTCC)，保藏号是CCTCC No:C2013132。该杂交瘤细胞可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体。该杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体可应用在制备视黄醇检测试剂或检测设备领域中，从而可广泛应用在制备诊断肾脏损伤疾病或肝脏疾病的检测试剂或检测设备领域中。本实施方式还提供了一种视黄醇结合蛋白检测试剂盒，其含有上述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体，具体是将该单克隆抗体包裹在乳胶颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，校准品或待测样品中的视黄醇结合蛋白可与单克隆抗体乳胶颗粒发生凝聚反应，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低在一定量抗体存在时与样品中的视黄醇结合蛋白成正比。通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出待测样品中视黄醇结合蛋白的含量。具体在本实施方式中，该视黄醇结合蛋白检测试剂盒包括第一试剂和第二试剂。其中，第一试剂包括30_60mmol/L Tris缓冲液、60_95mmol/L聚乙二醇、l_5mmol/L叠氮钠、6-13mmol/L乙二胺四乙酸钠以及l_5mmol/L牛血清白蛋白；第二试剂包括30_60mmol/L Tris缓冲液、结合有所述单克隆抗体的胶乳颗粒、l-5mmol/L吐温-20、0.5_3mmol/L叠氮钠、6-13mmol/L乙二胺四乙酸钠以及l_5mmol/L牛血清白蛋白。其他所需的检测试剂可以根据需要直接在实验室制备。该单克隆抗体除了应用于上述检测剂盒外，还可以用于其他视黄醇结合蛋白检测试剂盒或设备中。本领域技术人员可以理解，将本实施方式的单克隆抗体直接或间接结合其他信号基团(如磁性微球、辣根过氧化酶等)，或将本实施方式的单克隆抗体作为包被抗体(例如ELISA)可用于其他形式的视黄醇结合蛋白检测试剂或设备中。该杂交瘤细胞的分泌产量高，其分泌得到的抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体具有高亲和力、高特异性等优点，可广泛应用在视黄醇结合蛋白检测领域，如检测试剂或检测设备的制备领域等，在特异性、灵敏度和检测率等方面较之传统的检测方法具有显著的优势。以下为具体实施例部分实施例1杂本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种可分泌抗视黄醇结合蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC?No：C2013132。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：何志强，王刘花，彭亮，刘莉莉，
申请(专利权)人：深圳市菲鹏生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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