一种辣椒及其制品中96种农药残留量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种辣椒及其制品中96种农药残留量的测定方法，样品中残留农药用1%乙酸乙腈均质提取，提取液分别用Florisil固相萃取柱净化和乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）、十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化，气相色谱质谱（GC-MS）检测Florisil柱净化浓缩液中69种农药残留，液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测基质分散净化液中27种农药残留，均采用空白基质溶液稀释标准建立校正的标准曲线，GC/MS检测时采用内标法定量，LC-MS/MS检测时采用外标法定量。本方法平均回收率为70.7%～118.6%，平均相对标准偏差（RSD）为3.2%～11.4%，检出限为0.13?g/kg～28.2?g/kg，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，样品中残留农药用1%乙酸乙腈均质提取，提取液分别用Florisil固相萃取柱净化和乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）、十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化，气相色谱质谱（GC-MS）检测Florisil柱净化浓缩液中69种农药残留，液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测基质分散净化液中27种农药残留，均采用空白基质溶液稀释标准建立校正的标准曲线，GC/MS检测时采用内标法定量，LC-MS/MS检测时采用外标法定量。本方法平均回收率为70.7%～118.6%，平均相对标准偏差（RSD）为3.2%～11.4%，检出限为0.13μg/kg～28.2μg/kg，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点。【专利说明】
本专利技术涉及，属于农药残留量的测定
。
技术介绍
蔬菜和水果是人类平衡膳食的重要组成部分，蔬菜和水果质量安全非常重要。近年来，由于不正确、不合理使用农药，导致污染蔬菜和水果，引起农药中毒的事件不断发生。为了保障国民消费者的安全，保护国际贸易有序进行，许多国家制定农产品的农药最高残留限量(MRL)标准来保证食品安全。同时，在国际贸易中，MRL也被部分国家和地区用于构建技术性贸易壁垒的工具。辣椒及其制品是我国重要的出口创汇农产品，其中，很多辣椒及制品出口到韩国。但韩国食药厅从2012年10月2日起加强对进口辣椒(含干辣椒)中96种农药残留的入境检查，规定辣椒及制品中96种农药最大允许残留限量为0.01mg/kg?5mg/kg (辣椒)和0.07mg/kg?35mg/kg (干辣椒)，并要求所有出口到韩国的辣椒必须随附韩国国外公认检测机构出具的96种农药残留检测报告。建立快速、可靠、灵敏和实用的辣椒中96种农药残留检测方法是有效破除该技术贸易措施、限制和缩短出口辣椒检测周期、促进辣椒及制品出口和控制辣椒中农药残留的基础。但目前国内外未见对输韩辣椒中96种农药残留检测方法的报道。可见，建立辣椒及其制品中96种农药残留量的检测方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。为实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是:，包括如下步骤:( I)提取称取辣椒及制品于具塞离心管中，加入1%乙酸乙腈均质提取lmin，加入无水硫酸镁、乙酸钠和水，振荡离心。(2)净化 I移取一定体积样品提取液，浓缩至干后，经Florisil固相萃取柱净化，丙酮/正己烷(1/1，体积比)洗脱，将净化液浓缩定容过膜后，待气相色谱-质谱(GC-MS)检测。(3)净化 II移取样品提取液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取上清液过0.22 μ m有机相滤膜，待液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测。(4) 69种农药标准工作溶液的配制将空白样品按上述步骤(I)、(2)处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂、内标溶液和混合标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的69种农药系列混合标准工作液。(5) 27种农药标准工作溶液的配制将空白样品按上述步骤(I)、(3)处理，用该空白样品基质溶液配制至少三个浓度的27种农药系列混合标准工作液。(6)气相色谱-质谱(GC-MS)测定将步骤(4)中各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS测定，以标准工作液与内标物的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC-MS测定，测得样品液中69种农药与内标物的色谱峰面积比，代入标准曲线，得到样品液中69种农药含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中69种农药残留量。(7)液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定将步骤(5)中各浓度梯度的标准工作液进行LC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(3)中净化后的样品液注入LC-MS/MS进行测定，测得样品液中27种农药的色谱峰面积，代入标准曲线，得到样品液中27种农药含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中27种农药残留量。步骤(I)中辣椒及制品若为脱水样品，需降低称样量，并加适量水充分浸润。步骤(2)中对提取液和净化液进行浓缩时，需加入一定量的正十烷，并控制温度在40°C下进行。步骤(3)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸镁、C18和PSA组成，每体积提取液中无水硫酸镁、C18和PSA加入量分别为100mg、50mg和25mg。步骤(4)中69种农药分别为唳虫脒(Acetemiprid)、氟丙菊酯(Acrinathrin)、P密菌酯(Azoxystrobin)、联苯菊酯(Bifenthrin)、唳酰菌胺(Boscalid)、硫线憐(Cadusafos)、溴虫臆(Chlorfenapyr)、百菌清(Chlorothalonil)、毒死蝶(Chlorpyrifos)、环氟菌胺(Cyflufenamid)、氟氯氰菊酯(Cyfluthrin)、氯氟氰菊酯(Cyhalothrin)、氯氰菊酯(Cypermethrin)、溴氰菊酯(Deltamethrin)、 二嗪磷(Diazinon)、乙霉威(Diethofencarb)、烯酰吗啉(Dimethomorph)、丙线磷(Ethoprophos)、乙螨唑(Etoxazole)、咪唑菌酮(Fenamidone)、氯苯卩密唳醇(Fenarimol)、杀螟硫磷(Fenitrothion)、氰戍菊酯(Fenvalerate)、卩密螨酯(Fluacrypyrim)、咯菌臆(Fludioxonil)、喹唑菌酮(Fluquinconazole)、氟娃唑(Flusilazole)、氟酰胺(Flutolanil)、却虫威(Indoxacarb)、异丙菌胺(Iprovalicarb)、亚胺菌(Kresoxim-methyl)、马拉硫憐(Malathion)、卩密菌胺(Mepanipyrim)、臆菌唑(Myclobutanil)、恶霜灵(Oxadixyl)、卩密卩定憐(Pirimiphos-ethyl)、甲基卩密 P定憐(Pirimiphos-methyl)、烯丙苯噻唑(Probenazole)、咪鲜胺(Prochloraz)、腐霉利(Procymidone)、丙溴磷(Profenofos)、卩比唑硫磷(Pyraclofos)、卩比唑醚菊酯(Pyraclostrobin)、咕螨灵(Pyridaben)、卩定虫丙醚(Pyridalyl )、卩密霉胺(Pyrimethanil )、批丙醚(Pyriproxyfen)、娃氟唑(Simeconazole)、卩比螨胺(Tebufenpyrad)、丁基卩密唳磷(Tebupirimf os)、七氟菊酯(Tef luthr in)、特丁磷(Terbuf os)、四氯杀螨砜(Tetradif on)、甲苯氟石黄胺(Tolylf luanid)、三唑环(Tricyclazole)、月亏菌酯(Trif loxystrobin)、氟菌唑(TrifIumizole)、苯酰菌胺(Zoxamide)、乙卩密酹磺酸酯(Bupirimate)、三氯杀螨醇(Dicofol)、硫丹(Endosulfan)、乙硫磷(Ethion)、甲氰菊酯(Fenpropath本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种辣椒及其制品中96种农药残留量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取称取辣椒及制品于具塞离心管中，加入1%乙酸乙腈均质提取1?min，加入无水硫酸镁、乙酸钠和水，振荡离心；（2）净化Ⅰ移取一定体积样品提取液，浓缩至干后，经Florisil固相萃取柱净化，丙酮/正己烷（1/1，体积比）洗脱，将净化液浓缩定容过膜后，待气相色谱?质谱（GC?MS）检测；（3）净化Ⅱ移取样品提取液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取上清液过0.22?μm?有机相滤膜，待液相色谱?串联质谱（LC?MS/MS）检测；（4）69种农药标准工作溶液的配制将空白样品按上述步骤（1）、（2）处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂、内标溶液和混合标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的69种农药系列混合标准工作液；（5）27种农药标准工作溶液的配制将空白样品按上述步骤（1）、（3）处理，用该空白样品基质溶液配制至少三个浓度的27种农药系列混合标准工作液；（6）气相色谱?质谱（GC?MS）测定将步骤（4）中各浓度梯度的标准工作液进行GC?MS测定，以标准工作液与内标物的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤（2）中净化后的样品液注入GC?MS测定，测得样品中69种农药与内标物的色谱峰面积比，代入标准曲线，得到样品液中69种农药含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中69种农药残留量；（7）液相色谱?串联质谱法（LC?MS/MS）测定将步骤（5）中的各浓度梯度的标准工作液进行LC?MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤（3）中净化后的样品液注入LC?MS/MS进行测定，测得样品液中27种农药的色谱峰面积，代入标准曲线，得到样品液中27种农药含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中27种农药残留量。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：崔淑华，刘润珠，刘靖靖，汤志旭，王建华，王境堂，
申请(专利权)人：崔淑华，
类型：发明
国别省市：