一种氟唑菌酰胺残留量的GC-NCI-MS测定方法技术

本发明专利技术公开了一种氟唑菌酰胺残留量的GC‑NCI‑MS测定方法，该方法主要用于测定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中残留的氟唑菌酰胺含量的方法。用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的氟唑菌酰胺，C18/PSA固相萃取柱净化浓缩后，气相色谱‑负化学离子源‑质谱（GC‑NCI‑MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为88.9%～104.7%，平均相对标准偏差（RSD）为4.2%～7.5%，检出限低于1.09 μg/kg，具有操作简便、快速、去杂效果好、灵敏度高、特征性强、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种氟唑菌酰胺残留量的GC-NCI-MS测定方法，更具体地说是采用气相色谱-负化学离子源-质谱(GC-NCI-MS)定性定量测定粮谷、猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉等动物肌肉及制品等复杂基质的动植物源性食品中残留的氟唑菌酰胺含量的方法，属于农药残留量的测定

技术介绍
氟唑菌酰胺(fluxapyroxad)是由巴斯夫公司开发的琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂。化学名称：3-二氟甲基-1-甲基-N-(3',4',5'-三氟联苯-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺；分子式：C18H12F5N3O；相对分子质量：381.3；熔点：157℃；相对密度：1.42。溶剂中的溶解度(g/L，20℃)：丙酮＞250、乙腈168、乙酸乙酯123、甲醇53.4、甲苯20.0。氟唑菌酰胺的化学结构式如下：氟唑菌酰胺具有高效、广谱、持效、优异的内吸传导性、同时具有预防和治疗作用等优点。它能抑制孢子发芽、芽孢管伸长、菌丝体生长和孢子形成，可有效防治谷物、大豆、玉米、油菜和特种作物等的主要病害。该产品通过叶面和种子处理来防治一系列真菌病害，如谷物、大豆、果树和蔬菜上由壳针孢菌(Septoria)、灰葡萄孢菌(Botrytis)、白粉菌(Erysiphe)、尾孢菌(Cercospora)、柄锈菌(Puccinia)、丝核菌(Rhizoctonia)、核腔菌(Pyrenophoraspp.)等引起的病害。其特别适用于豆类植物，防治由链格孢菌(Alternariaspp.)引起的灰霉病(Botrytiscinerea)、锈病、白粉病和壳针孢菌引起的病害，大豆锈病(Phakopsora)，棉花上由立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)引起的病害以及向日葵和油籽菜上由链格孢菌引起的病害等。在所有试验剂量下，对所有作物非常安全。氟唑菌酰胺适配性强，可与吡唑醚菌酯、三唑类杀菌剂和巴斯夫其他产品复配使用。研究表明，氟唑菌酰胺比市售的酰胺类杀菌剂具有更好的活性，该产品无论在活性、多功能性，还是在内吸性和耐雨水冲刷性等方面都为现代杀菌剂建立了新标杆。巴斯夫打算将氟唑菌酰胺引入世界上50多个国家，用于100多种作物上。2011年，氟唑菌酰胺首先在英国登记和上市，现登记和上市的国家包括澳大利亚、美国、加拿大、欧盟13国、巴西和中国等。公司预测，该产品的年峰值销售额可达6亿欧元。这是所有SDHI类杀菌剂中，开发公司寄予的期望值最高的产品。随着氟唑菌酰胺的登记、推广和使用，作为我国主要出口市场的美国、加拿大等国家制定了其在蔬菜、水果、粮谷和畜产品等食品农产品中的最大允许残留量(MRL)，如美国规定氟唑菌酰胺在果蔬中的MRL为0.5～30mg/kg，在畜产品及水产品等动物源性食品中MRL为0.01mg/kg，在坚果及粮谷中MRL为0.06～15mg/kg；加拿大规定氟唑菌酰胺在果蔬中的MRL为0.02～2mg/kg，在畜产品及水产品等动物源性食品中MRL为0.01～0.05mg/kg，在坚果及粮谷中MRL为0.01～3mg/kg；欧盟、日本等国家规定若田间使用农药没有在该国家登记，没有制定相应的残留限量标准时，出口至其国家的食品农产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均实行0.01mg/L的“一律标准”。现阶段，对氟唑菌酰胺残留量测定方法的研究较少，报道的检测方法主要为蔬菜和水果中氟唑菌酰胺残留检测方法，这些检测方法均采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定蔬菜和水果中氟唑菌酰胺残留量的检测方法，使用LC-MS/MS测定食品农产品中农药残留具有快速、简便、灵敏度高等优点，但由于其价格较昂贵，很多检测机构、企业或科研院所未配置该仪器或配置台数较少，由于不同的化合物采用LC-MS/MS检测时，需使用不同的流动相或色谱柱，这样需要不断更换色谱柱、流动相并耗费比较长的时间对系统进行平衡，这一定程度上制约了LC-MS/MS的应用。配备负化学电离源的气相色谱质谱(GC-NCI-MS)分析食品农产品中农药残留具有很大优势，负化学离子源(NCI源)被称为质谱“软电离源”，对含电负性集团的分析物具有高选择性和高灵敏度，由于其特征性强，利用其进行残留分析时，基质干扰很少，可很准确地对目标物进行定性和定量分析。现各种检测机构和企业均购置了气相色谱-质谱仪(GC-MS)，一般也都配备了负化学离子源(NCI)，现很多类农药均含有电负性基团，有机氯和拟除虫菊酯类农药分子大都含有－F、－Cl、－Br或－COO－等强电负性基团；有机磷农药分子大都含有＝S、－OR、－P、－O－、－Cl、或－P＝O等电负性基团；而近年来开发的新型农药中大多含有－F基团，因此，使用GC-NCI-MS可方便实现多种农药的多残留分析，与GC-EI-MS相比，能获得更好的抗干扰能力、更低的灵敏度和更好的选择性，但迄今为止未见食品农产品中氟唑菌酰胺残留量的GC-NCI-MS检测方法的报道，氟唑菌酰胺属电负性化合物，由于粮谷、动物源性食品等食品农产品基质比较复杂，须建立净化效果良好的样品前处理方法和仪器分析条件才能满足检测要求，因此，建立气相色谱-负化学离子源-质谱(GC-NCI-MS)定性和定量分析粮谷和动物源性食品中氟唑菌酰胺残留量的检测方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种氟唑菌酰胺残留量的GC-NCI-MS测定方法，主要用于测定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中氟唑菌酰胺残留量。为实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种氟唑菌酰胺残留量的GC-NCI-MS测定方法，包括如下步骤：(1)提取称取混匀样品于具塞离心管中，加入适量水复苏后，定量加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振荡超声提取，然后加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心。(2)净化移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱-负化学离子源-质谱(GC-NCI-MS)检测。(3)标准工作溶液的配制将不含氟唑菌酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理时，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的氟唑菌酰胺系列标准工作液。(4)气相色谱-负化学离子源-质谱法(GC-NCI-MS)测定将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氟唑菌酰胺残留量的GC‑NCI‑MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)提取称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振荡超声提取后，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心；(2)净化移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱‑负化学离子源‑质谱(GC‑NCI‑MS)检测；(3)标准工作溶液的配制将不含氟唑菌酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的氟唑菌酰胺系列标准工作液；(4)测定和结果计算将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC‑NCI‑MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC‑NCI‑MS进行测定，测得样品液中氟唑菌酰胺的色谱峰面积，代入基质标准工作曲线，得到样品液中氟唑菌酰胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中氟唑菌酰胺残留量；若上机溶液中氟唑菌酰胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。...

【技术特征摘要】
1.一种氟唑菌酰胺残留量的GC-NCI-MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)提取
称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振荡超声提取后，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心；
(2)净化
移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱-负化学离子源-质谱(GC-NCI-MS)检测；
(3)标准工作溶液的配制
将不含氟唑菌酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的氟唑菌酰胺系列标准工作液；
(4)测定和结果计算
将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC-NCI-MS进行测定，测得样品液中氟唑菌酰胺的色谱峰面积，代入基质标准工作曲线，得到样品液中氟唑菌酰胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中氟唑菌酰胺残留量；若上机溶液中氟唑菌酰胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔淑华，
申请(专利权)人：崔淑华，
类型：发明
国别省市：山东;37