一种人体自身抗体检测膜条制造技术

本实用新型专利技术公开了一种人体自身抗体检测膜条，其特征是在固相膜上附着有两条或两条以上的不同纯抗原检测线和三条质控线，其中两条抗人IgG质控线和一条碱性磷酸酶质控线，配合酶标记的抗人IgG抗体及显色剂，对自身抗体疾病进行检测和质控。本实用新型专利技术通过三条质控线可以同时质控碱性磷酸酶活性、膜条背景以及初步指示阳性样品含量程度，从而实现对检测结果的准确判断，据此可对结果进行再次检测，排除干扰因素的影响。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种用于检测人体自身抗体的膜条。 
技术介绍
自身抗体指针对自身组织、器官、细胞及细胞成分的抗体。在特定情况下，免疫系统对机体自身物质识别失效，把它们认为是外来入侵物，从而产生针对这些物质的抗体（即自身抗体），引发自身免疫。 作为自身免疫病的重要血清标志物，人体自身抗体的快速检测对于自身免疫性疾病的诊断、预后和转归判断及理解疾病的病理过程有重要的应用价值和理论意义。目前，市面上的自身抗体检测膜条产品只有一条包被抗人IgG抗体的质控线，这种方法只能判断检测时是否添加了检测样本，而不能判别检测过程中加入的AP酶活性是否有效。同时，检测过程中，目标血清样本对检测结果会产生背景干扰，可能导致假阳性结果的出现，在一定程度上影响了检测者对检测结果的正确判读。 
技术实现思路
为了解决以上问题，本技术提供了一种自身抗体检测膜条，该检测膜条设有三条质控线，用于指示检测过程是否正常进行，排除非特异性背景的干扰，为进一步的明确判断提供有价值的参考依据。 同时，可对样本中IgG含量程度做出定性初步指示。 本技术的主要技术方案是：一种人体自身抗体检测膜条，包括检测膜条（1）、检测膜条上的纯抗原线（2）和质控线（3）；所述质控线（3）包括质控线一（31）、质控线二（32）和质控线三（33）。 所述质控线三（33）包被有人IgG蛋白。 所述质控线一（31）和质控线二（32）分别包被有不同浓度的抗人IgG抗体。 所述检测膜条上固定有两条或两条以上的不同纯抗原线。 所述检测膜条可以是硝基膜。 r>本技术的自身抗体检测膜条采用亲和层析纯化的ENA纯抗原、人IgG蛋白和抗人IgG抗体（anti-IgG），用喷膜机将所有蛋白分别固定在检测膜条上的特定位置，与待检血清中的自身抗体反应，加入碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体，再加入显色剂。其中，抗人IgG抗体浓度较低的质控线可以作为背景参考线，用于与测试结果中纯抗原线的显色深度进行比较，如测试结果中，相应纯抗原线及三条质控线同时显色，且纯抗原线的显色深度浅于该质控线，则可初步判断可能存在背景干扰因素，阳性结果可能为假阳，需要进一步进行二次检测；如测试结果中，相应纯抗原线及三条质控线同时显色，且纯抗原线的显色深度深于包被较低浓度抗人IgG抗体的质控线，则测试结果为阳性；如测试结果中，相应纯抗原线位置不显色，三条质控线出现显色条带，则测试结果为阴性；如测试结果中，相应纯抗原线位置不显色，抗人IgG抗体浓度较低的质控线显色，第其他两条质控线位置 不显色，则说明测试中漏加样本或误加入其它非人源血清样本，测试结果无效；如测试结果中，三条质控线均不显色，则说明碱性磷酸酶失活，测试结果无效。 与现有技术相比，本技术具有以下有益效果： 本技术的自身抗体检测膜条中的质控线三（33）包被人IgG，用于指示AP酶的活性，其显色强度与待测样本无关，仅指示AP酶的活性。这条质控线为试剂货架期的稳定性和有效性提供了参考依据。质控线二（32）和质控线三（33）分别包被不同浓度的抗人IgG抗体，利用双抗体夹心法，通过与血清样本中的人免疫球蛋白IgG结合后再与试剂中的碱性磷酸酶（AP酶）标记的抗人IgG进行特异反应而显色的，可定性指示样本中IgG含量。这种质控方式，可以指示实际操作中因漏加样本或误加其他样本而导致的检测无效结果；另一方面，包被抗人IgG浓度较低的质控线的显色深度可以做为背景值，纯抗原检测条带的显色深度超过此质控线的才能判定为有效显带的阳性结果。 附图说明图1是本技术实施例一的检测膜条结构示意图； 图2是本技术实施例一的SSA条带阳性检测结果； 图3是本技术实施例一的阴性检测结果； 图4是本技术实施例一漏加样本的检测结果； 图5是本技术实施例一碱性磷酸酶活性失效的无效检测结 果； 图6是本技术实施例二的检测膜条结构示意图； 图7是本技术实施例三的检测膜条结构示意图； 图8是本技术实施例四的检测膜条结构示意图； 附图标记： 1、检测膜条；2、纯抗原线；21、Scl-70抗原线；22、RNP抗原线；23、Sm抗原线；24、SSA抗原线；25、SSB抗原线；26、Jo-1抗原线；27、ds-DNA抗原线；28、rRNP抗原线；3、质控线；31、质控线一；32、质控线二；33、质控线三。 具体实施方式下面结合附图和具体实施例对本技术进行详细说明。 实施例1 如图1所示，本实施例的检测膜条1上固定有纯抗原线2和质控线3。其中，纯抗原线2包括6条纯抗原线，分别是Scl-70抗原线21、RNP抗原线22、Sm抗原线23、SSA抗原线24、SSB抗原线25、Jo-1抗原线26。质控线3包括三条质控线，分别是：质控线一（31），包被有高浓度抗人IgG抗体；质控线二（32），包被有低浓度抗人IgG抗体；质控线三（33），包被有人IgG蛋白。其中，检测膜条可以是硝基膜；本实施例可以一次操作同时检测出样本中是否存在RNP、 Sm、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1六种抗原的IgG抗体。在本实施例的检测膜条上的质控线可用于检测膜条是否失效、是否漏加和错加样品，并可以相应的扣除检测样本背景影响。 利用本实施例的自身抗体检测膜条，与孵育盘、洗涤液、样本稀释液、碱性磷酸酶标记的抗人IgG抗体、显色剂（BCIP/NBT）、阴性和阳性对照血清及使用说明书组成一个商品化的试剂盒，在室温下用于检测病人的血清中是否存在抗RNP、抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70、抗Jo-1抗体中的一种或几种。 在室温下进行检测，操作步骤为： （1）在反应槽中加入洗涤液1ml，封闭液50ul，孵育5分钟； （2）往反应槽中的相应位置加入待检血清10ul，在37℃的环境下孵育30分钟； （3）弃去槽内液体，在吸水纸上拍干，用洗涤液洗涤检测膜条3次； （4）往槽内加入洗涤液1ml，酶标抗人IgG抗体50ul，在37℃的环境下孵育30分钟； （5）弃去槽内液体，在吸水纸上拍干，用洗涤液洗涤检测膜条3次； （6）加入显色剂1ml，反应5-15分钟； （7）观察结果： A、如果三条质控线及质控线下的一条或者一条以上条带显色，并且检测线条带显色程度深于质控线二（32），则检测结果 为显色条带对应检测项为阳性，如图2所示，为SSA抗原条带显色的阳性结果； B、如果三条质控线及质控线下的一条或者一条以上条带显色，但是某条检测线条带显色程度浅于质控线二（32），则该条检测线可能是假阳性，需要重新测定或者用其他方法验证； C、如果仅有三条质控线显色，如图3所示，检测结果为阴性； D、如果仅有第一条质控线显色，第二条和第三条质控线不显色，如图4所示，则可能漏加样本或者错加入了非人源血清样本，检测结果无效； E、如果三条质控线不显色，检测线均不显色，如图5所示，则说本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人体自身抗体检测膜条，其特征在于：包括检测膜条（1）、检测膜条上的纯抗原线（2）和质控线（3）；所述质控线（3）包括质控线一（31）、质控线二（32）和质控线三（33）。

【技术特征摘要】
1.一种人体自身抗体检测膜条，其特征在于：包括检测膜条（1）、检测膜条上的纯抗原线（2）和质控线（3）；所述质控线（3）包括质控线一（31）、质控线二（32）和质控线三（33）。 
2.根据权利要求1所述的自身抗体检测膜条，其特征在于：所述质控线三（33）包被有人IgG蛋白。 
3.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王继华，唐时幸，王雪霞，
申请(专利权)人：广州万孚生物技术股份有限公司，
类型：实用新型
国别省市：