双启动子双表达特异性shRNA慢病毒载体及其应用制造技术

技术编号:9079069 阅读:211 留言:0更新日期:2013-08-22 19:58
一种双启动子双表达特异性shRNA慢病毒载体,包含核苷酸序列为SEQ?ID?NO:1的U6启动子和核苷酸序列为SEQ?ID?NO:2的H1启动子。经实验证实,该慢病毒载体能够同时表达出两种shRNA,可抑制vpr基因表达和/或下调tat基因的表达水平,可用于研制防治HIV感染药物。

【技术实现步骤摘要】

:本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种使用双启动子同时表达两种shRNA的重组慢病毒载体和穿梭质粒。本专利技术还涉及所述载体和穿梭质粒在制备防治HIV感染药物中的应用。
技术介绍
:RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。RNA干扰可以通用用化学合成的成熟的小的干扰RNA (small interfering RNAs,siRNA)去瞬时转染细胞,或者是通过将能够表达短发卡RNA (shRNA)的载体整合进入细胞,进行稳定表达。表达出来的shRNA包含两个短的反向重复序列(其中一个与目的基因互补),中间由一个loop序列分割,组成发夹结构,在体内shRNA可以在Dicer酶的作用下加工成为成熟siRNA,其干扰效果等同于siRNA。体外合成和质粒介导的RNA干扰持续时间较短,不适用于长期抑制基因表达。使用病毒载体来介导shRNA的表达可以达本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能够同时表达出两种shRNA的慢病毒载体,其特征为包含核苷酸序列为SEQ?ID?NO:1的U6启动子和核苷酸序列为SEQ?ID?NO:2的H1启动子。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:曾毅滕智平郝彦哲杨怡姝
申请(专利权)人:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京工业大学曾毅滕智平郝彦哲
类型:发明
国别省市:

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