一种抑制N-乙酰葡萄糖胺转移酶V的shRNA表达载体的构建方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种抑制Ｎ－乙酰葡萄糖胺转移酶Ｖ的ｓｈＲＮＡ真核表达载体的构建方法及应用，其步骤是根据Ｇｅｎｅｂａｎｋ提供的ＭＧＡＴ５的基因序列，选取编码区第８３６－８５６位核苷酸序列ＴＣＧＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＴＴＧＣＧＧ为靶序列设计并合成引物，通过引物退火，连接至载体ｐｓｉｌｅｎｃｅｒ１．０－Ｕ６，得到真核表达载体ｓｈＲＮＡ１－Ｍｇａｔ５，将ｓｈＲＮＡ１－Ｍｇａｔ５转染至乳腺癌细胞ＭＡ７８２，能明显抑制ＭＡ７８２细胞在小鼠体内生长，该质粒在制备治疗或预防乳腺癌的药物中的应用，前景广泛。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种抑制Ｎ－乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅴ的ｓｈＲＮＡ真核表达载体的构建方法，其特征是包括下列步骤：Ａ．根据Ｇｅｎｅｂａｎｋ提供的ＭＧＡＴ５的基因序列，从编码区中选取第８３６－８５６位核苷酸序列ＴＣＧＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＴＴＧＣＧＧ为靶序列， 设计并合成引物，引物为：ｓｉＲＮＡ１－Ｏｌｉｇｏ１：５’－ＴＣＧＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＴＴＧＣＧＧＴＴＣＡ－３’ｓｉＲＮＡ１－Ｏｌｉｇｏ２：５’－ＡＧＣＴＴＧＡＡＣＣＧＣＡＡＴＣＴＴＧＡＡＧＣＣＣＧＡＧＧＣＣ－３’ｓｉ ＲＮＡ１－Ｏｌｉｇｏ３：５’－ＡＧＣＴＴＣＣＧＣＡＡＴＣＴＴＧＡＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：章晓联，李冬青，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]