黄曲霉毒素阳性抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素重组单链抗体1A7技术

本发明专利技术涉及黄曲霉毒素阳性抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素重组单链抗体1A7。该黄曲霉毒素阳性抗体基因库是将黄曲霉毒素单克隆抗体1C11、2C9、1C8、10G4、3G1的混合轻链可变区基因和混合重链可变区基因采用重叠延伸PCR方法随机拼接得到单链抗体ScFv基因，然后与pCANTAB5E载体连接与转化得到的。该阳性基因库完全由对黄曲霉毒素具有识别能力的抗体的基因片段（阳性片段）构建组成；在相对库容量不大的情况下，可实现黄曲霉素素单链抗体的快速筛选；黄曲霉毒素重组单链抗体1A7为通用单克隆抗体，对黄曲霉毒素B1的50%抑制浓度IC50为20pg/mL，对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的交叉反应率分别为100%、166%、100%、0.1%和11.1%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及黄曲霉毒素阳性抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素重组单链抗体1A7。
技术介绍
黄曲霉毒素主要是由黄曲霉和寄生曲霉分泌产生的次生代谢产物，是能引起人畜各种损害的天然有毒化合物。黄曲霉毒素目前已发现20余种，其中黄曲霉毒素BI的毒性最强，它的毒性是氰化钾的10倍，砒霜的68倍。早在1993年，黄曲霉毒素BI被世界卫生组织的癌症研究机构划定为已知最强致癌化学物质之一，即I类致癌物质。我国属于黄曲霉毒素污染较重的地区，在各种食物及农产品，尤其是玉米、花生及其制品中都很有可能存在黄曲霉毒素的污染。因此加强黄曲霉毒素的检测、特别是速测，及时了解和掌握各种食物及农产品的卫生信息，对保障我国食品消费安全具有重要意义。现有黄曲霉毒素的检测方法包括化学分析法、精密仪器分析法和免疫学分析法。其中化学分析法是早期检测黄曲霉毒素最常用的检测方法，其不需要特殊的仪器设备，一般实验室都可进行，但试剂用量大、操作繁琐、其它组分干扰严重、准确性差，不能准确定量，且对实验人员和周围环境污染危害较大，不适于现场快速检测。精密仪器分析法包括荧光分光光度法和高效液相色谱法，其灵敏度高，准确性好，但仪器昂本文档来自技高网...

【技术保护点】
黄曲霉毒素阳性抗体基因库，其特征在于：它是将黄曲霉毒素单克隆抗体1C11、2C9、1C8、10G4、3G1的混合轻链可变区基因和混合重链可变区基因采用重叠延伸PCR方法随机拼接得到单链抗体ScFv基因，然后与pCANTAB?5E载体连接与转化得到的，所述的黄曲霉毒素单克隆抗体1C11、2C9、1C8、10G4、3G1分别由保藏编号为CCTCC?NO:?C201013，CCTCC?NO:?C201018，CCTCC?NO:?C201017，CCTCC?NO:?C201016，CCTCC?NO:?C201014的杂交瘤细胞株分泌产生。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：李培武，李鑫，张奇，丁小霞，张文，李冉，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：