一种牛源抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体、制备方法及其用途技术

本发明专利技术公开了一种牛源抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体、制备方法及其应用。本发明专利技术的真核表达单链抗体至少具有由如SEQ ID No.1所示氨基酸序列的牛抗体轻链可变区VL和如SEQ ID No.2所示氨基酸序列的牛抗体重链可变区VH以及由中间连接肽Linker按照VL‑Linker‑VH的顺序进行连接构成的牛源单链抗体片段VL‑Linker‑VH。将该片段的编码基因插入真核表达载体，构建成单链抗体真核表达质粒pcDNA3.1‑scFv后，将该pcDNA3.1‑scFv直接注射小鼠乳腺组织,能显著提高细胞因子IFN‑γ和IL‑4的含量(P<0.05),降低炎症因子TNF‑α的含量(P<0.05)，维持乳腺结构的相对完整，减少炎性细胞的浸润，对小鼠提供一定的保护作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种牛源抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体、制备方法及其用途，属于基因工程

技术介绍
单链抗体是一种基因工程抗体，通过DNA重组技术将抗体轻链可变区VL和重链可变区VH通过一段连接短肽linker首尾连接而成，是保留完整抗原结合部位的最小功能片段。单链抗体的表达形式主要有融合表达，胞内表达和分泌表达三种形式。和完整抗体相比，单链抗体具有以下优点：1)分子量小，大小仅为完整抗体的六分之一，免疫原性较低；2)组织穿透力强，容易进入实体瘤周围的微循环；3)血液清除快，肾脏蓄积很少；4)无Fc段，非特异结合低；5)易于通过基因工程大量生产；6)易于基因操作，更易构建重组免疫毒素。奶牛乳腺炎是影响奶牛业发展，给乳品生产造成巨大损失的一种常见多发病。引起奶牛乳腺炎的致病菌很多，其中金黄色葡萄球菌是最重要的致病菌，流行率达到了50％，导致的经济损失最大。主要是因为金黄色葡萄球菌具有传染性且治疗用的抗生素易产生耐药性，所以很难彻底治愈；目前针对金黄色葡萄球菌全菌和各个毒力因子的疫苗也用于奶牛乳腺炎的预防，但是效果均不理想。单链抗体等基因工程抗体，以其独特的抗病毒和抗细菌作用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛源性抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体，其特征在于，其至少具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的牛抗体轻链可变区VL和如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的牛抗体重链可变区VH以及由中间连接肽Linker按照VL‑Linker‑VH的顺序进行连接构成的牛源单链抗体片段VL‑Linker‑VH。

【技术特征摘要】
1.一种牛源性抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体，其特征在于，其至少具有如SEQIDNo.1所示的氨基酸序列的牛抗体轻链可变区VL和如SEQIDNo.2所示的氨基酸序列的牛抗体重链可变区VH以及由中间连接肽Linker按照VL-Linker-VH的顺序进行连接构成的牛源单链抗体片段VL-Linker-VH。2.根据权利要求1所述的牛源性抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体，其特征在于：所述的牛源单链抗体片段VL-Linker-VH具有如SEQIDNo.3所示的氨基酸序列。3.一种权利要求1所述的牛源性抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体的编码基因。4.一种根据权利要求1所述的牛源性抗金黄色葡萄球菌的真核表达单链抗体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)采用RT-P...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱建国，王曼，王婷婷，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31