一种微生物絮凝剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及属海洋资源清洁化生产与高值化利用领域，尤其涉及一种微生物絮凝剂的制备方法，包括絮凝微生物菌株的筛选、菌株诱变、菌株种子液的培养、发酵培养、离心分离、硫酸氨沉淀以及真空干燥等步骤，这种方法制备微生物絮凝剂产量较高、操作简单以及成本较低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及属海洋资源清洁化生产与高值化利用领域，尤其涉及。
技术介绍
目前随着工业的快速发展和人口的急剧增加，城镇饮用地表水需求量和工业废水、城市生活污水、养殖废水排放量与日俱增。由于污水排放类型不断上升，水中污染物成分变得越来越复杂， 因此对污水进行处理的难度也越来越大。如果处理不当，会对工农业生产和人类健康对来严重威胁。而现有技术一些食品加工废水，尤其是鱼糜加工废水的化学需氧量COD含量高且含有大量的蛋白质，通常是采用三氯化铝沉降处理或直接排放，这样不但会造成环境污染其中的蛋白资源也不可利用。絮凝剂被广泛应用于污水处理、食品生产和发酵等工业领域中。通常将絮凝剂分为无机絮凝剂、有机合成高分子絮凝剂和生物高分子絮凝剂三大类。微生物絮凝剂属于生物高分子絮凝剂的范畴。微生物絮凝剂可以使水体中不易降解的悬浮颗粒、菌体细胞和胶体粒子等发生凝聚、沉降的生物高分子聚合物，它易于分离，沉降速率高，容易降解，而且其降解产物无毒无害，对环境不会产生二次污染，具有很好的净化和脱色作用，是一种适应性广、高效安全的絮凝剂。现有技术的微生物絮凝剂的产量较低、操作繁琐且成本较高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是:提供一种产量较高、操作简单以及成本较低的微生物絮凝剂的制备方法，用该方法制备出的微生物絮凝剂能够有效处理鱼糜加工废水同时回收废水中的蛋白质。本专利技术所采用的技术方案是:，它包括以下步骤， (1)、絮凝微生物菌株的筛选:从鱼糜加工废水沉淀池的活性污泥中筛选得到放线菌，所述放线菌为链霉菌属； (2)、菌株诱变:将步骤(I)筛选得到的放线菌菌株接种于培养皿中，置于15 40瓦的紫外线灯下照射广10分钟，所述菌株与紫外线灯的距离为2(Γ25厘米； (3)、菌株种子液的培养:将所述经过步骤(2)诱变的放线菌菌株放到种子培养基中，培养基I升中放入菌株2-5环，在35 37°C、120-150r/min生物摇床转速下发酵24h进行种子液的培养，所述的种子培养基的配比为鹿糖4-6g/L,葡萄糖15-25g/L,蛋白胨3_4g/L,K2HPO40.8-1.5g/L, MgSO40.1-0.3g/L, NaCll_2g/L，ZeSO40.1-0.2g/L, pH7.0 ； (4)、发酵培养:将步骤(3)菌株种子培养后菌株种子液移入发酵罐中，发酵培养基I升与菌株种子液0.5-2ml的比例混合，在搅拌转速为15(Tl80rpm，通气量为0.5^1.5L/min，温度25 27°C中发酵培养2飞天，所述发酵培养基的配比为蔗糖4-6g/L，葡萄糖15_25g/L，蛋白胨 l-2g/L, K2HPO40.8-1.5g/L, MgSO40.1-0.3g/L, NaC15_15g/L，ZeSO40.1-0.2g/L, pH7.0 ；(5)、离心分离:将步骤(4)发酵培养后得到的菌液置于离心机中，在转速为3000 5000rpm下离心10 30min去掉离心出来的固体部分； (6)、硫酸氨沉淀:将步骤(5)经离心分离得到的上清液中，逐步加入硫酸氨，使溶液中硫酸氨的最终浓度达到50 70%，然后在转速为300(T5000rpm下离心l(T30min去掉液体部分； (7)、真空干燥:将步骤(6)沉淀得到的不溶物置于真空度0.09、.1Mpa，温度为35 55°C的环境中干燥，得到微生物絮凝剂。采用以上方法与现有技术相比，本专利技术具有以下优点:通过诱变使得菌株发生变异，进而能得到产量较大的菌株，通过种子培养以及发酵培养两个阶段的培养，使得菌株的生长繁殖的更好，然后通过两次离心分离，使得最后得到的微生物絮凝剂杂质含量较少，即使得这种微生物絮凝剂的性能更好，能更有效的处理鱼糜加工废水以及回收加工废水中的蛋白质，并且与现有的制备方法相比，本专利技术的制备方法耗费相同的原料制备出来的微生物絮凝剂产量提高了很多，即间接减少了生产成本；而且本专利技术的微生物絮凝剂在处理鱼糜加工废水时，添加0.1%本专利技术制备出来的微生物絮凝剂，搅拌均匀，静置I小时后废水的絮凝剂即沉淀，废水上清液的蚀度及COD去除率分别达90%和87%以上，同时可回收废水蛋白质达94%以上，并且回收的富含蛋白质的絮凝产物可以作为饲料添加剂来使用，这样达到了经济与环境效益的双赢。具体实施例方式以下具体实施方式对本专利技术做进一步描述，但是本专利技术不仅限于以下具体实施方式。具体实施例一:，它包括以下步骤， (1)、絮凝微生物菌株的筛选:从鱼糜加工废水沉淀池的活性污泥中筛选得到放线菌，所述放线菌为链霉菌属； (2)、菌株诱变:将步骤(I)筛选得到的放线菌菌株接种于培养皿中，置于40瓦的紫外线灯下照射10分钟，所述菌株与紫外线灯的距离为25厘米；通过诱变可以使一部分菌株变成产量较大的菌株。(3)、菌株种子液的培养:将所述经过步骤(2)诱变的放线菌菌株放到种子培养基中，培养基I升中接入菌株5环，在35 37°C、150r/min生物摇床转速下发酵24h进行种子液培养，所述的种子培养基的配比为蔗糖5g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨3.5g/L，K2HP04lg/L,MgSO40.2g/L, NaCl lg/L, ZeSO40.lg/L，pH7.0 ;菌株种子液的培养是先进行小规模培养，将一些诱变过后得到的产量较大的菌株培养出更多的菌种，所述将放线菌放到种子培养基中是指放线菌接种到种子培养基内。(4)、发酵培养:将步骤(3)菌株种子培养后菌株种子液移入发酵罐中，发酵培养基I升与菌株种子液2ml的比例混合，在搅拌转速为150rpm，通气量为lL/min，温度25 27°C中发酵培养5天，所述发酵培养基的配比为蔗糖5g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨1.5g/L，K2HPO4lg/L, MgSO40.2g/L，NaC110g/L, ZeSO40.lg/L, pH7.0 ;发酵培养主要是将经过种子培养之后的菌种进行大规模的培养，使得它能大量繁殖。(5)、离心分离:将步骤(4)发酵培养后得到的菌 液置于离心机中，在转速为4000rpm下离心30min去掉离心出来的固体部分；第一次离心是将发酵培养后的菌液中的杂质去除。(6)、硫酸氨沉淀:将步骤(5)经离心分离得到的上清液中，逐步加入硫酸氨，使溶液中硫酸氨的最终浓度达到50%，然后在转速为4000rpm下离心30min去掉液体部分；所述硫酸氨主要起到沉淀作用，将微生物絮凝剂沉淀出来，然后通过离心使得微生物絮凝剂与液体分离。(7)、真空干燥:将步骤(6)沉淀得到的不溶物置于真空度0.1Mpa，温度为35 55°C的环境中干燥，得到微生物絮凝剂。具体实施例二:，它包括以下步骤， (1)、絮凝微生物菌株的筛选:从鱼糜加工废水沉淀池的活性污泥中筛选得到放线菌，所述放线菌为链霉菌属； (2)、菌株诱变:将步骤(I)筛选得到的放线菌菌株接种于培养皿中，置于30瓦的紫外线灯下照射5分钟，所述菌株与紫外线灯的距离为20厘米； (3)、菌株种子培养:将所述经过步骤(2)诱变的放线菌菌株接种到种子培养基中，培养基I升中接入菌株4环，在35 37°C、120r/min生物摇床转速下发酵24h进行种子培养，所述的种子培养液的配比为蔗糖5g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨3.5g/L，K本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤，（1）、絮凝微生物菌株的筛选：从鱼糜加工废水沉淀池的活性污泥中筛选得到放线菌，所述放线菌为链霉菌属；（2）、菌株诱变：将步骤（1）筛选得到的放线菌菌株接种于培养皿中，置于15~40瓦的紫外线灯下照射1~10分钟，所述菌株与紫外线灯的距离为20~25厘米；（3）、菌株种子液的培养：将所述经过步骤（2）诱变的放线菌菌株放到种子培养基中，培养基1升中放入菌株2?5环，在35~37℃、120?150r/min生物摇床转速下发酵24h进行种子液的培养，所述的种子培养基的配比为蔗糖4?6g/L，葡萄糖15?25g/L，蛋白胨3?4g/L，K2HPO40.8?1.5g/L，MgSO40.1?0.3g/L，NaCl1?2g/L，ZeSO40.1?0.2g/L，pH7.0；（4）、发酵培养：将步骤（3）菌株种子培养后菌株种子液移入发酵罐中，发酵培养基1升与菌株种子液0.5?2ml的比例混合，在搅拌转速为150~180rpm，通气量为0.5~1.5L/min，温度25~27℃中发酵培养2~5天，所述发酵培养基的配比为蔗糖4?6g/L，葡萄糖15?25g/L，蛋白胨1?2g/L，K2HPO40.8?1.5g/L，MgSO40.1?0.3g/L，NaCl5?15g/L，ZeSO40.1?0.2g/L，pH7.0；（5）、离心分离：将步骤（4）发酵培养后得到的菌液置于离心机中，在转速为3000~5000rpm下离心10~30min去掉离心出来的固体部分；（6）、硫酸氨沉淀：将步骤（5）经离心分离得到的上清液中，逐步加入硫酸氨，使溶液中硫酸氨的最终浓度达到50~70%，然后在转速为3000~5000rpm下离心10~30min去掉液体部分；（7）、真空干燥：将步骤（6）沉淀得到的不溶物置于真空度0.09~0.1Mpa，温度为35~55℃的环境中干燥，得到微生物絮凝剂。...

【技术特征摘要】
1.一种微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于:它包括以下步骤， (1)、絮凝微生物菌株的筛选:从鱼糜加工废水沉淀池的活性污泥中筛选得到放线菌，所述放线菌为链霉菌属； (2)、菌株诱变:将步骤(I)筛选得到的放线菌菌株接种于培养皿中，置于15 40瓦的紫外线灯下照射广10分钟，所述菌株与紫外线灯的距离为2(Γ25厘米； (3)、菌株种子液的培养:将所述经过步骤(2)诱变的放线菌菌株放到种子培养基中，培养基I升中放入菌株2-5环，在35 37°C、120-150r/min生物摇床转速下发酵24h进行种子液的培养，所述的种子培养基的配比为鹿糖4-6g/L,葡萄糖15-25g/L,蛋白胨3_4g/L,K2HPO40.8-1.5g/L, MgSO40.1-0.3g/L, NaCll_2g/L，ZeSO40.1-0.2g/L, pH7.0 ； (4)、发酵培养:将步骤(3)菌株种子培养后菌株种子液移入发酵罐中，发酵培养基I升与菌株种...

【专利技术属性】
技术研发人员：娄永江，李流川，谢光辉，谢峰，唐道军，
申请(专利权)人：宁波飞日水产实业有限公司，
类型：发明
国别省市：