一种基于双酶偶联高通量检测微生物生产乙醇和C3-C6正烷醇的新方法技术

技术编号:8797600 阅读:257 留言:0更新日期:2013-06-13 03:44
本发明专利技术涉及一种基于双酶偶联反应的高通量检测微生物生产乙醇和C3-C6正烷醇的新方法,具体涉及利用醇氧化酶和过氧化氢酶偶联,在相应缓冲溶液中与乙醇或C3-C6正烷醇的反应,产生红色物质醌亚胺。双酶偶联反应在96孔酶标板中进行,利用微孔读板器读取在500nm处的吸光值。乙醇和C3-C6正烷醇与双酶偶联反应生成产物在500nm处的吸光值与其浓度成线性关系,能够根据标准曲线计算浓度,并利用微孔读板器和96孔酶标板进行高通量检测。

【技术实现步骤摘要】
—种基于双酶偶联高通量检测微生物生产乙醇和C3-C6正烷醇的新方法
本专利技术属于工业微生物筛选和开发利用领域,特别涉及一种基于双酶偶联反应的高通量检查微生物生产乙醇和C3-C6正烷醇的检测方法。技术背景过去的200多年,建立在煤炭、石油、天然气等化石燃料基础的能源体系极大地推动了人类社会的发展。然而近年来,由于石油、天然气、煤炭等能源的过量开采与消耗,世界已面临严重的能源危机,而且国际原油价格攀升不下,对石油需求量日益大增,自1993年我国首次成为石油产品净进口国以来,2010年全年原油进口 21,845万吨,所以寻找清洁、廉价、可再生的替代能源成为未来能源战略的关键。燃料乙醇和燃料丁醇被认为是可以代替石油、煤炭等化石燃料作为替代高污染化石燃料的理想选择,生物燃料早已受到世界各国重视。近年来,美国、巴西、韩国、印尼等国家以及欧盟都相继出台了支持生物燃料普及的能源发展战略。欧盟计划到2020年用生物燃料替代20%化石燃料。美国的《国家生物燃料行动计划》也提出,2020年生物燃料将占其能源总消费量的25%,2050年达到50%。燃料乙醇、燃料丁醇是由生物资源经过一系列的物理、生物、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用醇氧化酶和过氧化酶偶联反应的检测微生物生产乙醇和C3?C6正烷醇的高通量检测新方法,步骤如下:(1)将培养基富集菌群经稀释后涂布到固体培养基中,待单菌落长出后接种到96深孔培养板中培养;(2)将96深孔培养板利用冷冻离心机在合适的条件下离心,取其上清液进行测定;(3)利用双酶偶联的方法,在96孔酶标板中结合Buffer?I和Buffer?II测定上述上清液中醇含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王钦宏齐显尼涂然孙琳姜丹
申请(专利权)人:天津工业生物技术研究所
类型:发明
国别省市:

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