用乌头酸酶表达弱化和/或酶活性降低的细菌发酵生产L-赖氨酸的方法技术

技术编号:8797569 阅读:205 留言:0更新日期:2013-06-13 03:43
本发明专利技术提供了发酵生产L-赖氨酸的方法,其包括改造细菌使其乌头酸酶A的表达量和/或酶活性降低但不消失;和,用改造的细菌发酵生产L-赖氨酸。另外,本发明专利技术还提供了由该方法衍生的方法和应用,以及可以用在这些方法和应用中的多核苷酸、载体和细菌。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于氨基酸发酵领域,具体而言,本专利技术涉及发酵生产L-赖氨酸的方法及其衍生的方法和应用,和可以用在这些方法和应用中的多核苷酸、载体和细菌。
技术介绍
通过产L-赖氨酸的细菌(如,埃希氏菌属的大肠杆菌和棒杆菌属的杆状细菌)发酵来生产L-赖氨酸已经得到了产业化应用。这些细菌,可以是从自然界分离的细菌,也可以是通过诱变或基因工程改造获得的细菌,或者两者兼而有之。当前的文献报道中,通过基因工程改造的注意力主要集中在pnt、dap及ppc等基因上,未见为了 L-赖氨酸生产而关注乌头酸酶(如,乌头酸酶A)及其编码基因。乌头酸酶是三羧酸循环中的一个酶,该酶催化两步化学反应,分别为柠檬酸转化为乌头酸以及乌头酸转化为异柠檬酸。目前已知在埃希氏菌中,acnA基因(其核苷酸序列如SEQ ID No:1所示)编码乌头酸酶A,但是可能是由于其代谢距离最终的L-赖氨酸产物太远,中间代谢分支太多且复杂,而在L-赖氨酸发酵中一直未引起人们的重视。本专利技术人经过长期研究和实践,尤其凭借了一些运气,偶然发现acnA基因的改造能够有助于提高L-赖氨酸的产量;然而,现有技术要么通过增加拷贝和/或定点突变导入本文档来自技高网...

【技术保护点】
发酵生产L?赖氨酸的方法,其包括:(1)改造细菌染色体上的野生型的acnA基因,使改造获得的细菌的乌头酸酶A的表达量和/或酶活性降低但不消失;和,(2)用步骤(1)改造而得到的细菌发酵生产L?赖氨酸。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:马吉银温廷益陈金龙梁勇刘树文魏爱英杨立鹏孟刚任瑞
申请(专利权)人:宁夏伊品生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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