MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法技术

MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，涉及链霉菌发酵生产谷氨酰胺转氨酶技术领域。本发明专利技术采用茂原链霉菌为发酵菌株，经斜面培养和种子培养后，接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转氨酶，通过在发酵培养基中添加MgCl2，最终实现了提高谷氨酰胺转氨酶产量的目标，并添加保护剂制成低温喷雾干燥或冷冻干燥干粉。本发明专利技术所用的MgCl2价格低廉，能显著提高了谷氨酰胺转氨酶的产量，在其它培养条件相同的情况下，本发明专利技术比不添加MgCl2的对照例产量提高约100%，并且缩短了发酵周期。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及链霉菌发酵生产谷氨酰胺转氨酶
，具体涉及一种添加MgCl2提高发酵法制备谷氨酰胺转氨酶的方法。
技术介绍
谷氨酸胺转氨酶(Transglutaminase,简称TGase, EC 2.3.2.13, R-glutaminyl-peptide:amnie- Y -glutamyl-transferase)又名转谷氨酰胺酶,它通过催化蛋白质中的谷氨酸残基上的甲酰胺与赖氨酸残基上的ε -氨基进行酰基转移反应，使蛋白质在分子内或分子间形成交联。 在二十世纪八十年代，Ikura等人报道了谷氨酰胺转氨酶对食物蛋白质的交联作用。他们用哺乳动物源谷氨酰胺转氨酶交联几种食物蛋白质，如酪蛋白、大豆蛋白等。这些蛋白的交联，提高了其产品的功能性，如凝胶性、溶解性和乳化性等。然而，由于其高昂的价格和低效的利用率限制了它在食品工业上的应用。从链霉菌中成功分离到微生物源谷氨酰胺转氨酶是促进其在食品工业上应用的一个里程碑。它使得这种酶可以大规模地生产，并且被商业利用。由于链霉菌谷氨酰胺转氨酶底物的催化特性，以及它在食品、纺织和医药行业中的广阔应用前景，受到了国内外学者的广泛关注，在亚洲的日本、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，采用茂原链霉菌为发酵菌株，经斜面培养和种子培养后，接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转氨酶，其特征在于：在发酵培养基中添加MgCl2，发酵96?h提高链霉菌谷氨酰胺转氨酶的产量。

【技术特征摘要】
1.一种MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，采用茂原链霉菌为发酵菌株，经斜面培养和种子培养后，接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转氨酶，其特征在于:在发酵培养基中添加MgCl2，发酵96 h提高链霉菌谷氨酰胺转氨酶的产量。2.根据权利要求1所述的MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，其特征在于所述发酵培养基中添加0.1-0.2 mol/L的MgCl2。3.根据权利要求1所述的MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，其特征在于所述MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的具体步骤如下: 用5mL无菌生理盐水将培养7d的斜面孢子洗下，接种于IOOmL种子培养基中，30°C、200r/min培养48h后，按10%的接种量添加到发酵培养基中，在初始发酵培养基中添加 ·0.l-ο.2 mol/L MgCl2, 30°C、200r/min条件下采取提高谷氨酰胺转氨酶产量的培养方式培养，将培养好的发酵液经板框过滤器过滤或压滤，再经0.22 μ m滤膜的微过滤装置过滤，制成无细胞的酶液，添加经烘干灭菌的载体保护剂充分混溶，制成干粉或医药级酶制剂。4.根据权利要求3所述的MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，其特征在于所述载体保护剂为以无细胞的酶液计蔗糖1_2%，海藻糖3-5%，甘油3-6%。5.根据权利要求3或4所述的MgClJ#迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，其特征在于所述载体保护剂经100°C、1小时烘干灭菌，无菌条件下与无细胞的酶液充分混溶。6.根据权利要求3或4所述的MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张兰威，张莉丽，张英春，杜明，冯镇，单毓娟，韩雪，易华西，焦月华，李洪波，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：