一种荧光标记的氨基糖苷类腺苷修饰酶及其检测抗生素的方法技术

一种荧光标记的氨基糖苷类腺苷修饰酶及其检测抗生素的方法。本发明专利技术公开了一种荧光标记的氨基糖苷类腺苷修饰酶，在氨基糖苷类腺苷修饰酶的自由巯基Cys198上，标记有含有或修饰巯基的荧光基团，标记含有或者修饰巯基的荧光基团为荧光素-5-马来酰亚胺。本发明专利技术还公开了一种用上述荧光标记的氨基糖苷类修饰酶检测抗生素的方法，本发明专利技术制得的荧光标记的修饰酶试剂配制简单，成本低，酶催化反应快速、灵敏，因此可以方便、快捷、高效的检测食品、环境中残留的抗生素药物，不局限于实验室操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，主要用于食品安全、医疗卫生和环境监测等领域的抗生素药物残留的检测和定量分析。
技术介绍
自1940年青霉素发现以来，数以千计的抗生素被开发用以传染性疾病的临床治疗，挽救了无数人的生命。但是随着抗生素广泛而大量地使用，许多细菌已经对它的对手产生了耐药性，很多药物不再像以前那样有效，甚至产生毒副作用。2010年8月11日，世界著名医学期刊《柳叶刀》刊文报道，带有一种特殊基因NDM-1 (新德里一号金属酶)的肠杆菌科细菌，对绝大多数常用抗生素耐药[Kumarasamy K K, et al., The Lancet InfectiousDiseases, 2010， 9， 597—602， French G L， International Journal of AntimicrobialAgents, 2010，36，S3-S7]。该报道立即引起广泛关注，媒体称之为“超级细菌”。随着全球感染人数的不断增加，引起人们对其全球蔓延趋势的担忧甚至恐慌。其实耐药型的细菌并非新事物，它们一直存在并且随着人类滥用抗生素而进化出强大耐药性，在这场特殊博弈中，人类是超级细菌的幕后推手。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荧光标记的氨基糖苷类腺苷修饰酶，其特征在于：在氨基糖苷类腺苷修饰酶的自由巯基Cys198上，标记有含有或修饰巯基的荧光基团。

【技术特征摘要】
1.一种荧光标记的氨基糖苷类腺苷修饰酶，其特征在于:在氨基糖苷类腺苷修饰酶的自由疏基Cysl98上，标记有含有或修饰疏基的突光基团。2.根据权利要求1所述一种荧光标记的氨基糖苷类腺苷修饰酶，其特征在于:所述标记含有或者修饰巯基的荧光基团为荧光素-5-马来酰亚胺。3.一种荧光标记的氨基糖苷类修饰酶检测抗生素的方法，其特征在于该方法包括如下步骤: (I)将含有或者修饰巯基的荧光基团标记在氨基糖苷类腺苷修饰酶的自由巯基Cysl98上； (2 )制备反应体系:将步骤(I)制得的标记有荧光基团的氨基糖苷类腺苷修饰酶与ATP溶液和二价金属离子溶液配置成混合溶液，混合溶液为中性，30°C水浴，备用； (3)将一系列不同浓度的已知氨基糖苷类抗生素样品分别加入步骤(2)制得的反应体系，根据产生的荧光信号强度不同，制定抗生素浓度和荧光强度的标准曲线； (4)将含有氨基糖苷类抗生素的待测样本溶液加入步骤(2)制得的反应体系中，记录荧光信号的变化； (5)将步骤(4)得到的荧光信号和...

【专利技术属性】
技术研发人员：武灵芝，胡栋，
申请(专利权)人：南京邮电大学，
类型：发明
国别省市：