一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法技术

本发明专利技术提出了一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，属于乳酸菌发酵领域。它以养殖动物、养殖水体和底泥为菌源分离出乳酸菌菌株；然后将分离出的乳酸菌菌株进行纯化选育出2-5株溶钙圈大，生长快，活力强的乳酸菌菌株；接着将进行纯化选育后选育出的乳酸菌菌株扩大培养，制备复合种子液；最后将复合种子液接种发酵即得复合型乳酸菌微生态制剂，与现有技术相比，本发明专利技术的有益效果是它是一种培养设备及操作都很简单，而且储存时间和单一菌株发酵水剂相比很稳定的乳酸菌微生态制剂的制备方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及乳酸菌发酵领域，特别涉及。
技术介绍
随着水产养殖业的迅猛发展，乳酸菌制剂以其天然、无毒、无副作用、无污染、无残留、安全可靠的优越性越来越受到重视。作为一种有益的净化水质的“生物修复剂”，乳酸菌制剂在水产养殖业的应用越来越受到重视，其应用于水产养殖业主要集中于拌料投喂、发酵饲料及作为EM菌主导菌在水体泼洒。其中拌料投喂、发酵饲料研究集中于乳酸菌在水产动物肠胃栖息，及调节动物肠道菌群结构和对饲料结构的改变。泼洒调节水质与乳酸菌可以调节养殖水体、改善养殖环境，抑制病原菌，抗病害，提高免疫力、促进动物生长有着密切的关系。这些应用与乳酸菌以下特性关系密切:首先，乳酸菌能很好适应水产养殖环境。水产养殖在养殖期间环境温度变动范围为20-35°C、盐度变动范围为0-38、pH值变动范围为6.9-8.7，在这三者变动范围内乳酸菌均能较好生长。其次，乳酸菌大部分的菌种属耐氧性厌氧菌，在无氧、低氧或高氧条件下均生长，不仅不与养殖动物竞争氧气，而且还能在溶氧量较低的水体中下层大量生长繁殖，抑制病原菌滋生。另外，乳酸菌在使用上不受时间限制，暴雨、阴天、晴天、高温条件下都可以使用。此外，乳酸菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：它以养殖动物、养殖水体和底泥为菌源分离出乳酸菌菌株；然后将分离出的乳酸菌菌株进行纯化选育出2?5株溶钙圈大，生长快，活力强的乳酸菌菌株；接着将进行纯化选育后选育出的乳酸菌菌株扩大培养，制备复合种子液；最后将复合种子液接种发酵即得复合型乳酸菌微生态制剂。

【技术特征摘要】
1.一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于:它以养殖动物、养殖水体和底泥为菌源分离出乳酸菌菌株；然后将分离出的乳酸菌菌株进行纯化选育出2-5株溶钙圈大，生长快，活力强的乳酸菌菌株；接着将进行纯化选育后选育出的乳酸菌菌株扩大培养，制备复合种子液；最后将复合种子液接种发酵即得复合型乳酸菌微生态制剂。2.根据权利要求1所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于:所述纯化选育出的乳酸菌菌株为四株。3.根据权利要求2所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于:所述的乳酸菌菌株进行纯化采用灭菌的MRS液体培养基，进行富集培养，将富集的菌液涂于MRS斜面上，分离出在含碳酸钙的MRS固体培养基上溶钙圈大的菌株若干株，经过两次分离纯化后待用；将分离纯化后的若干株乳酸菌菌株分别接种于灭菌的MRS液体培养基中，在300C _37°C温度下培养46-50小时后吸取菌液在5000rpm下离心10_15min，弃去上清液保留菌体，向菌体中注入95%的生理盐水得到稀释菌液，然后用紫外分光光度计测定稀释菌液OD543nmW吸光度，当所有稀释菌液的吸光度值相同时，把所有的稀释菌液按相同的体积比3-5%分别接种于灭菌的MRS液体培养基中，30°C _37°C下静置培养24_48h，然后用紫外分光光度计测定稀释菌液的OD543nm，选出的OD543nm测定值高的菌株；然后把这些菌株的培养液在室温下继续放置10天，后用MRS固体培养基进行平板计数，培养时间为24-48h，温度为300C _37°C，选出计数结果高的菌株，最终选出4株乳酸菌菌株分别保种。4.根据权利要求3所述的一种复合型乳酸菌微生态制剂的制备方法，其特征在于:所述MRS液体培养基的重量份组成为:大豆蛋白胨0.5-1.5份，牛肉膏0.5-1.5份，酵母浸粉0.2-0.6份，葡萄糖1.5-2.5份，磷酸氢二钾0.1-0.3份，乙酸钠0.3-0.7份，柠檬酸三铵0.1-0.3份，硫酸镁0.05-0.06份，硫酸锰0.02-0.03份，吐温0.05-0.15份，蒸馏水99-101份。5.根据权利要求4所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛爱琴，罗国强，苏艳秋，顾继锐，
申请(专利权)人：通威股份有限公司，
类型：发明
国别省市：