本发明专利技术公开了一种乳酸菌固态混菌发酵方法，本发明专利技术将屎肠球菌、乳酸杆菌、及粪肠球菌先接种至液态发酵培养基进行培养，得到三个菌种的种子液，再将三个菌种的种子液接入同一固态发酵培养基进行发酵培养，将所得的发酵物料烘干，向烘干后的发酵物料中添加酵母多糖，混合均匀后即得到乳酸菌固态混菌发酵菌剂。本发明专利技术还公开了使用乳酸菌固态混菌发酵方法得到的乳酸菌固态混菌发酵菌剂及该菌剂在水产养殖水体水质改良中的用途。本发明专利技术可节约生产成本，降低发酵能耗，所得产品活性稳定，用于养殖水体水质改良有很好的效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种乳酸菌发酵方法，尤其涉及一种乳酸菌固态混菌发酵方法，本专利技术还涉及用该方法制得的乳酸菌固态混菌发酵菌剂，本专利技术还进一步涉及了乳酸菌固态混菌发酵菌剂在养殖水体水质改良中的用途。
技术介绍
近20年来，水产养殖业在我国得到了迅猛的发展，随着集约化程度的提高，养殖密度的增大，代谢产物也大幅增加，养殖水体污染日益严重；同时工业废水、生活污水的排放也使养殖水域环境质量日益下降。这不仅直接危害养殖对象，而且也是疾病频繁发生的主要诱因。因而，如何改善养殖水质成为水产养殖成败的关键问题之一。无度地使用各种药物和无度、无序、无处理地换水、排污成了养殖者的常用手段和措施。最终，前者破坏了养殖动物、微生物和环境所构成的动态平衡，导致疾病的爆发，并且危及养殖产品的食用安全，后者既加大了外来风险又增加了水源的污染，增加病害交叉感染和流行的机率。近年来，微生物制剂在水产养殖中作为饲料添加剂、池塘水质净化剂得到了广泛的应用，应用结果表明，微生态制剂不仅可以改善养殖水域环境，还可以提高养殖对象的机体免疫力，减少病害的发生，使养殖活动向着良性循环方向发展。大量的研究表明，乳酸菌可促进养殖水体饵料生物大量繁殖、生长，并且可分解残饵、粪便及水中有机质，改良水质，抑制水体中有害菌的繁殖生长，调节菌藻平衡。乳酸菌固态产品保质期长短及保质期内乳酸菌活菌数与产品质量息息相关。乳酸菌活菌数低，则不易在水环境中成为优势菌群，无法发挥其功效。现有乳酸菌固态发酵多为熟料发酵，能耗大，生产成本高，且多采用单菌种发酵，菌种单一，代谢产物 种类及数量均有限，所得到的发酵产品的活菌数量低，保质期短，储存过程中活性不断降低，产品质量难以保障。酵母多糖是一种绿色饲料添加剂，具有提高水产动物免疫功能，调节动物肠道微生态平衡(促进有益菌增殖、控制致病菌生长)，从而维持动物的生长和健康。因此，酵母多糖与益生菌的联用，在水产养殖中的应用具有很好的前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种生产成本较低、产品活菌数高的乳酸菌固态混菌发酵方法。本专利技术的另一个目的是公开了使用本专利技术的乳酸菌固态混菌发酵方法所得菌剂和所述菌剂在养殖水体水质改良中的用途。为达到所述目的，本专利技术的技术方案如下:一种乳酸菌固态混菌发酵方法，包括如下步骤:(a)将屎肠球菌(Enterococcus Faecium)、乳酸杆菌(Lacticacid bacteria)、及粪肠球菌(Enterococcus faecalis)分别接种至液态发酵培养基进行培养,得到三个菌种的种子液。(b)将上述三个菌种的种子液接入固态发酵培养基进行发酵培养。(C)将步骤(b)所得的发酵物料烘干。(d)向烘干后的发酵物料中添加酵母多糖，混合均匀后即得到乳酸菌固态混菌发酵菌剂。其中，上述步骤(a)中屎肠球菌(Enterococcus Faecium)、乳酸杆菌(Lacticacidbacteria)、及粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的接种量为1.8 2.2%。,接种至液态发酵培养基后在36 38°C恒温发酵24 30h ;所述液态发酵培养基由以下组分组成:按重量百分比记，蔗糖4 6%。，柠檬酸三铵1.5 2.5%。，酵母膏4 6%0，乙酸钠1.5 2.5%。，磷酸氢二钾1.5 2.5%。，硫酸镁0.16 0.24%。，硫酸锰0.03 0.07%。，生石灰0.8 1.2%。，余量为水；按上述配方配制好液态发酵培养基后，调节其pH值至7.5 8.0 ;所述液态发酵培养基可无需灭菌处理，直接使用。其中，上述步骤(a)中屎肠球菌(Enterococcus Faecium)、乳酸杆菌(Lacticacidbacteria)、及粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的接种量优选为2%。,接种至液态发酵培养基后在37°C恒温发酵24h ;所述液态发酵培养基各组分含量优选为:按重量百分比记，蔗糖5%。，柠檬酸三铵2%。，酵母膏5%。，乙酸钠2%。，磷酸氢二钾2%。，硫酸镁0.2%。，硫酸锰0.05%。，生石灰1%。，余量为水；按上述配方配制好液态发酵培养基后，调节其pH值至8.0 ;所述液态发酵培养基可无需灭菌处理，直接接种发酵。其中，上述步骤(b)中三个 菌种的种子液的接种量相等，均为固态发酵培养基重量的27 33%，培养条件为:36 38°C恒温发酵48 54h ;所述固态发酵培养基由以下组分组成:以麸皮为基质，按重量百分比记，蔗糖4 6%。，柠檬酸三铵1.5 2.5%。，酵母膏4 6%0，乙酸钠1.5 2.5%。，磷酸氢二钾1.5 2.5%。，硫酸镁0.16 0.24%。，硫酸锰0.03 0.07%。，生石灰2.5 3.5%，余量为麸皮；所述固态发酵培养基可无需灭菌处理，直接接种发酵。其中，上述步骤(b)中将三个菌种的种子液接种至固态发酵培养基的接种量优选为30%,培养条件优选为:37°C恒温发酵48h ;所述固态发酵培养基各组分含量优选为:以麸皮为基质，按重量百分比记，蔗糖5%。，柠檬酸三铵2%。，酵母膏5%。，乙酸钠2%。，磷酸氢二钾2%。，硫酸镁0.2%。，硫酸锰0.05%。，生石灰3%，余量为麸皮；所述固态发酵培养基可无需灭菌处理,直接接种发酵。其中，上述步骤(C)中发酵物料的烘干温度为48 52°C，烘干至发酵物料含水量低于10%即可。其中，上述步骤(d)中向发酵物料中添加的酵母多糖重量为发酵物料重量的1.5 2.5%。，优选的，添加的酵母多糖重量为发酵物料重量的2%0。用上述方法获得的乳酸菌固态混菌发酵菌剂和所述乳酸菌固态混菌发酵菌剂在养殖水体水质改良中的用途也属于本专利技术的保护范围。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点:(I)本专利技术所用的采用生料发酵(培养基不需灭菌)，培养基中使用了廉价的农副产品麸皮为基质，发酵能耗大大降低，节约生产成本；(2)本专利技术采用三种乳酸菌混合发酵，无论是活菌或是代谢产物都更加丰富，产品改良水质效果更佳；(3)本专利技术的乳酸菌固态混菌发酵菌剂在储存过程中活性稳定，提高了产品质量。本专利技术的详细内容可通过后述的说明及所附图而得到。附图说明图1为本专利技术乳酸菌固态混菌发酵方法的工艺路线图。具体实施例方式下面结合附图和实施例对本专利技术的具体实施方式作进一步描述，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实验材料本专利技术所涉及到的部分菌种购于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心，尿肠球菌(Enterococcus Faecium)产品编号为:ACCC00658 ;乳酸杆菌(Lacticacidbacteria)产品编号为:ACCCl 1026 ;幾肠球菌(Enterococcus faecalis)产品编号为:ACCC10180 ;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)产品编号为:ACCC02973。本专利技术所涉及到的地衣芽孢杆菌(Baclicus Iincheniformis)和侧孢芽孢杆菌(Brevibacillu本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种乳酸菌固态混菌发酵方法，包括如下步骤：(a)将屎肠球菌（Enterococcus?Faecium）、乳酸杆菌（Lacticacid?bacteria）、及粪肠球菌（Enterococcus?faecalis）的菌液分别接种至液态发酵培养基进行培养，得到三个菌种的种子液；(b)将上述三个菌种的种子液接入同一固态发酵培养基进行发酵培养，得到发酵物料；(c)将步骤(b)所得的发酵物料烘干；(d)向烘干后的发酵物料中添加酵母多糖，混合均匀后即得到乳酸菌固态混菌发酵菌剂。
【技术特征摘要】
1.一种乳酸菌固态混菌发酵方法，包括如下步骤: (a)将屎肠球菌(EnterococcusFaecium)、乳酸杆菌(Lacticacid bacteria)、及幾肠球菌(Enterococcus faecalis)的菌液分别接种至液态发酵培养基进行培养,得到三个菌种的种子液； (b)将上述三个菌种的种子液接入同一固态发酵培养基进行发酵培养，得到发酵物料； (C)将步骤(b)所得的发酵物料烘干； (d)向烘干后的发酵物料中添加酵母多糖，混合均匀后即得到乳酸菌固态混菌发酵菌剂。2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于: 所述步骤(a)中屎肠球菌(Enterococcus Faecium)、乳酸杆菌(Lacticacidbacteria)、及粪肠球菌(Enterococcus faecalis)菌液的接种量为液态发酵培养基重量的1.8 2.2%。，培养条件为:在36 38°C恒温发酵24 30h ； 所述液态发酵培养基由以下组分组成:按重量百分比记，蔗糖4 6%。，柠檬酸三铵1.5 2.5%。，酵母膏4 6%。，乙酸钠1.5 2.5%。，磷酸氢二钾1.5 2.5%。，硫酸镁0.16 0.24%。，硫酸锰0.03 0.07%。，生石灰0.8 1.2%。，余量为水；按上述配方配制好液态发酵培养基后，调节其pH值至7.5 8.0。3.按照权利要求1所 述的方法，其特征在于: 所述步骤(b)中将三个菌种的种子液的接种量相等，以固态发酵培养基重量计，接种量均为27 33%，接种后在36 38°C恒温发酵48 54h ； 所述固态发酵培养基由以下组分组成:按重量百分比记，蔗糖4 6%。，柠檬酸三铵1.5 2.5%。，酵母膏4 6%。，乙酸钠1.5 2.5%。，磷酸氢二钾1.5 2.5%。...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘全礼，蔡君，曹芬，黄剑，汤天静，谷序文，
申请(专利权)人：武汉施瑞福生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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