产生IL-13的Tr1-样细胞及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能够产生IL-13的分离的Tr1-样细胞群体，所述群体具有免疫抑制活性；和用于鉴定/分离/富集所述群体的方法及其用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及分离的产生IL-13的Trl细胞，用于鉴定/分离/富集它们的方法以及使用分离的产生IL-13的Trl细胞用于诊断或者治疗炎症性疾病、自身免疫病、过敏疾病和器官移植病的方法和试剂盒。
技术介绍
免疫系统的稳态依赖于对侵入病原体的免疫反应与对自身抗原的免疫耐受之间的平衡。中心和外周耐受是诱导和维持T细胞耐受的重要机制。在近十年内，许多注意力集中于在维持外周免疫耐受中起重要作用 的调节性T细胞(Treg)。现在已经坚定地确定Treg可以分成两个不同的亚型:天然Treg(nTreg)和可诱导Treg群体,例如TGF-β诱导的Treg细胞、Trl细胞或者Th3细胞。nTreg主要作为FoxP3+T细胞描述而Trl细胞描述为产生IL-10的调节性T细胞(Allan 等，2008, Immunological reviews, 223:391-421)。FoxP3+nTregs 抑制 / 调节广泛多种的不同免疫细胞，包括初始⑶4+和⑶8+T效应细胞和记忆⑶4+和⑶8+T效应细胞、B细胞、单核细胞和树突细胞。Trl细胞通过分泌IL-10和转化生长因子β (TGF-β)调节免疫反应并具有抑制初始T细胞反应和记忆T细胞反应两者的能力。已经证明Trl细胞在细胞治疗中是有用的，因为向具有克隆病的患者注射Trl细胞改善了他们的病症。然而，持续需要改善使用Trl细胞的这种细胞治疗的有效性。令人惊奇地是，专利技术人发现了能够产生IL-13的Trl细胞亚群。专利技术人证明，这些细胞除了具有Trl细胞标志性的IL-10抑制性作用之外，还具有通过IL-13诱导的抑制性效应。专利
技术实现思路
本专利技术的一个目标是能够产生IL-13的分离的Trl-样细胞群体，优选地，分离的人Trl-样细胞群体。在一个实施方案中，本专利技术的分离的Trl-样细胞群体能够在本专利技术所述测试A的条件下产生IL-13。在本专利技术的一个实施方案中，所述分离的Trl-样细胞群体产生低数量的IL-4。在本专利技术的另一个实施方案中,所述分离的Trl-样细胞群体表达:-CD4 和-低水平CD127和-低水平CD62L。在本专利技术的另一个实施方案中，所述分离的Trl-样细胞是静息细胞并表达低水平CD25和低水平FoxP3。在本专利技术的另一个实施方案中，所述分离的Trl-样细胞群体是活化的并表达⑶25和中等水平的FoxP3。在本专利技术的另一个实施方案中，所述分离的Trl-样细胞是抗原特异性的，优选地抗原是II型胶原、卵清蛋白、髓磷脂碱蛋白、髓磷脂少突胶质细胞蛋白或HSP。在本专利技术的一个实施方案中，分离的Trl-样细胞群体是能够产生IL-13的Trl-细胞群体，优选地人Trl细胞群体，优选在测试A条件下能够产生IL-13的Trl-细胞群体，优选地人Trl细胞群体。在本专利技术的一个实施方案中,本专利技术的Trl-样细胞群体，优选本专利技术的Trl细胞群体，产生IL-10，优选在测试A的条件下产生IL-10。本专利技术的另一目标是能够产生IL-13的分离的Trl-样克隆，优选人分离的Trl-样克隆。在一个实施方案中，本专利技术的分离的Trl-样克隆能够在本专利技术所述的测试A的条件下产生IL-13。在本专利技术的一个实施方案中，所述分离的Trl-样克隆产生少量的IL-4。在另一个实施方案中，所述Trl-样克隆表达:-CD4 和-低水平CD127和-低水平CD62L。在本专利技术的另一个实施方案中，所述分离的Trl-样克隆是抗原特异性的，优选地抗原是II型胶原、卵清蛋白、髓磷脂碱蛋白、髓磷脂少突胶质细胞蛋白或HSP。在本专利技术的一个实施方案中，分离的Trl-样克隆是在测试A的条件下能够产生IL-13的Trl克隆，优选人Trl克隆。在本专利技术的一个实施方案中，本专利技术的Trl-样克隆，优选本专利技术的Trl克隆在测试A的条件下产生IL-10。本专利技术的另一个目标是鉴定产生IL-13的Trl-样细胞群体的方法，包括:-检测⑶127和⑶62L标 志物中的至少一个和⑶4在细胞群体上的细胞表面表达，-检测IL-13的产生，其中表达⑶4和低水平⑶127和/或低水平⑶62L并产生IL-13的细胞是产生IL-13的Trl-样细胞群体。在一个实施方案中，本专利技术的方法用于鉴定分离的产生IL-13的人Trl细胞群体，其中方法还包括检测IL-10的产生。本专利技术的另一个目标是用于使细胞群体中富集产生IL-13的Trl-样细胞的方法，包括:-鉴定表达⑶4和低水平⑶127和/或低水平⑶62L并产生IL-13的细胞，-选择所述细胞，由此得到富集产生IL-13的Trl-样细胞的细胞群体，其中产生IL-13的Trl-样细胞百分数是富集前产生IL-13的Trl-样细胞百分数的至少两倍。在一个实施方案中，本专利技术的方法用于使细胞群体富集产生IL-13的人Trl细胞群体，其中方法还包括检测IL-10的产生。本专利技术的另一个目标是根据本文上述方法得到的富集的产生IL-13的Trl-样细胞群体。在本专利技术的一个实施方案中，群体富含产生IL-13的人Trl细胞。本专利技术的另一个目标是用于鉴定或者分离产生IL-13的Trl-样细胞群体，优选产生IL-13的人Trl细胞群体的试剂盒，包括用于检测⑶4、⑶25、⑶127和⑶62L细胞表面表达的工具和用于检测IL-13的产生或IL-10和IL-13的产生的工具。本专利技术的另一个目标是分离的和/或富集的产生IL-13的Trl-样细胞群体，优选分离的和/或富集的产生IL-13的人Trl细胞群体，或者产生IL-13的Trl-样克隆，优选产生IL-13的人Trl克隆，用于预防或者治疗免疫反应、移植物抗宿主疾病和器官排斥、过敏疾病、炎症性疾病或者自身免疫病。本专利技术的另一目标是去除细胞群体中产生IL-13的Trl-样细胞的方法，包括:-如上所述鉴定产生IL-13的Trl-样细胞，-去除所述细胞，由此得到产生IL-13的Trl-样细胞被去除的细胞群体，其中产生IL-13的Trl-样细胞的百分数是去除前产生IL-13的Trl-样细胞百分数的0.5倍。在本专利技术的一个实施方案中，本专利技术的方法用于去除细胞群体中的产生IL-13的人Trl细胞。本专利技术的另一个目标是根据上述方法得到的去除产生IL-13的Trl-样细胞的细胞群体。在本专利技术的一个实施方案中，被去除处理的细胞群体是产生IL-13的人Trl细胞被去除了。本专利技术的另一个目标是去除产生IL-1 3的Trl-样细胞的细胞群体用于增强需要其的受试者中的免疫反应。在本专利技术的一个实施方案中，用于增强需要其的受试者中免疫反应的被去除处理的细胞群体是产生IL-13的人Trl细胞被去除了。具体实施例方式本专利技术提供具有免疫抑制能力的，新的分离的产生IL-13的Trl-样细胞群体，以及用途。专利技术人发现，这些细胞是Trl-样细胞，因为它们表达与Trl细胞相同的表面标志物并且这些细胞能够产生IL-13和低水平的IL-4。专利技术人发现，它们的免疫抑制能力部分地通过IL-13介导。此外，这些Trl-样细胞中的一些细胞还能够产生IL-10。因此，专利技术人认为能够产生IL-10和IL-13的这些细胞是Trl细胞的亚群。专利技术人惊奇地发现，该Trl细胞亚群具有增强的免疫抑制效应，这在细胞治疗中具有极大的兴趣。不希望被理论所束缚，专利技术人提出所述增强的免疫抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.29 EP 10368030.2;2010.06.30 US 61/359,8851.分离的人Trl细胞群体，其能够产生IL-13。2.根据权利要求1的分离的人Trl细胞群体，其中所述细胞产生IL-10。3.权利要求1或2的分离的人Trl细胞群体，其中所述细胞表达:-CD4 和 -低水平CD 127，和 -低水平CD62L。4.根据权利要求1至3任一项的分离的人Trl细胞群体，其中所述细胞是抗原特异性的，优选地，所述抗原是II型胶原、卵清蛋白、髓磷脂碱蛋白、髓磷脂少突胶质细胞蛋白或HSP。5.分离的人Trl克隆，其能够产生IL-13和IL-10。6.根据权利要求5的分离的人Trl克隆，其中所述克隆表达:-CD4 和 -低水平CD 127，和 -低水平CD62L。7.根据权利要求5或6的分离的人Trl克隆，其中所述克隆是抗原特异性的，优选地，所述抗原是II型胶原、卵清蛋 白、髓磷脂碱蛋白、髓鞘少突胶质细胞蛋白或HSP。8.鉴定根据权利要求1至4任一项的人Trl细胞群体的方法，包括: -检测⑶127和⑶62L标志物中的至少一个和⑶4标志物在细胞群体上的细胞表面表达， -检测IL-13和IL-1O的产生， 其中表达⑶4和低水平⑶127和/或低水平⑶62L并产生IL-13和IL-10的细胞是产生IL-13的Trl细胞群体。9.使细胞群体富集根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿尔诺·福萨特，埃尔韦·巴斯蒂安，瓦莱丽·布鲁恩，布里吉特·夸坦尼恩斯，
申请(专利权)人：特克赛尔公司，
类型：
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