针对PCSK9的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及针对9型前蛋白转变酶枯草芽孢杆菌素/kexin(PCSK9)的抗体，或其抗原结合片段，包含此类PCSK9抗体或抗原结合片段的组合物，以及使用其治疗高脂血症或高胆固醇血症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及针对9型前蛋白转变酶枯草芽孢杆菌素/kexin(PCSK9)的抗体，或其抗原结合片段，包含此类PCSK9抗体或抗原结合片段的组合物，以及使用其治疗高脂血症或高胆固醇血症的方法。【专利说明】针对PCSK9的抗体及其用途本专利技术在医药领域中。具体而言，本专利技术涉及针对9型前蛋白转变酶枯草芽孢杆菌素/kexin (PCSK9)的抗体，包含此类PCSK9抗体的组合物，以及使用PCSK9抗体治疗高脂血症或高胆固醇血症的方法。9型前蛋白转变酶枯草芽孢杆菌素/kexin (PCSK9)是分泌的丝氨酸蛋白酶，主要在肝中产生，其调节低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的血浆浓度。分泌的PCSK9结合位于肝细胞表面的LDL受体(LDLR)并与其内化。LDLR功能为通过从血浆中结合并转运LDL颗粒至溶酶体进行降解来清除LDL-C。一旦LDL颗粒被递送进行降解，则LDLR再循环至肝细胞表面以从血浆中结合并清除另外的LDL-C。PCSK9通过引导内化的LDLR进行降解而非循环至细胞表面来调节血浆LDL-C，从而减少LDL-C清除。在PCSK9缺陷的或过表达的啮齿动物中的研究目前已经证实了 PCSK9通过调整LDLR水平来控制循环的LDL水平。循环的PCSK9参与肝LDLR的降解这一观察结果暗示PCSK9的抗体中和是用于降低LDL-C的可行的治疗方法。此外，已经报道作为目前用于降低LDL-C的护理标准的抑制素药物实际上可以提高PCSK9的表达和血清水平。因此，PCSK9抗体还具有以与抑制素治疗协同的方式降低LDL-C的潜力。PCSK9抗体及其在降低血浆LDL-C中的作用在本领域是已知的。例如，US2009/0246192、US2009/0142352、US2010/0166768 和 W02010/029513 公开了此类 PCSK9抗体及其用途。然而，截 至目前，还没有靶向PCSK9的抗体被批准用于治疗用途。因此，存在替代PCSK9抗体的需求。具体而言，存在以高效能降低LDL-C的替代PCSK9抗体的需求。还更具体的是，存在以高效能降低LDL-C并提供持久的起效持续时间(例如，持久的LDL-C水平的抑制)的替代PCSK9抗体的需求。此类抗体将还优选具有利于开发、制造或配制的良好的物理化学特性。本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)，其中HCVR包含互补决定区域(CDRs) HCDRl、HCDR2和HCDR3并且LCVR包含CDRsIXDRl、IXDR2和IXDR3，其中HCDRl的氨基酸序列由SEQ ID NO:1给出，HCDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO: 2给出，HCDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO: 3给出，IXDRl的氨基酸序列由SEQ ID NO: 4给出，LCDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO: 5给出，LCDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO: 6给出，其中所述抗体或其抗原结合片段结合人PCSK9。在一个实施方案中，本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)，其中HCVR的氨基酸序列由SEQ ID NO: 7给出并且LCVR的氨基酸序列由SEQ ID NO: 8给出，其中所述抗体或其抗原结合片段结合人PCSK9。在另一个实施方案中，本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包含两个重链可变区(HCVRs)和两个轻链可变区，其中每一 HCVR的氨基酸序列由SEQ ID NO: 7给出并且每一 LCVR的氨基酸序列由SEQ ID NO: 8给出。在另一个具体实施方案中，本专利技术提供抗体或其抗原结合片段，其包含重链(HC)和轻链(LC)，其中HC的氨基酸序列由SEQ ID NO: 9给出并且LC的氨基酸序列由SEQ IDNO: 10给出。在甚至更具体的实施方案中，本专利技术提供抗体，其包含两条重链(HCs)和两条轻链(LCs)，其中每一 HC的氨基酸序列由SEQ ID NO: 9给出并且每一 LC的氨基酸序列由SEQ ID NO: 10给出。在最具体的实施方案中，本专利技术提供抗体，其由两条HCs和两条LCs组成，其中每一 HC的氨基酸序列由SEQ ID NO: 9给出并且每一 LC的氨基酸序列由SEQ IDNO: 10给出。本专利技术进一步提供药物组合物，其包含本专利技术的抗体或其抗原结合片段以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。更具体而言，本专利技术的药物组合物进一步包含一种或多种另外的治疗剂。此外，本专利技术提供治疗高脂血症或高胆固醇血症的方法，其包括向有其需要的患者施用有效量的本专利技术的抗体或抗原结合片段。本专利技术还提供本专利技术的抗体或其抗原结合片段，其用于治疗。更具体而言，本专利技术提供本专利技术的抗体或其抗原结合片段，其用于治疗高脂血症或高胆固醇血症。此外，本专利技术提供本专利技术的抗体或其抗原结合片段在制造治疗高脂血症或高胆固醇血症的药物中的用途。 本专利技术还涉及编码本专利技术的抗体或抗原结合片段的核酸分子和表达载体。此外，本专利技术提供按照这样的方法制备的抗体，其中所述方法包括(a)培养包含编码由SEQ IDNO: 9给出的多肽序列的第一条多核苷酸序列和编码由SEQ ID NO: 10给出的第二条多肽序列的第二条多核苷酸序列的宿主细胞，并在所述多肽序列被表达的条件下进行；和6)从所述宿主细胞中回收包含重链和轻链的抗体，其中所述重链的多肽序列由SEQ ID N0:9给出，并且所述轻链的多肽序列由SEQ ID NO: 10给出。更具体而言，由上述方法产生的抗体包含两条重链和两条轻链，其中每一重链的多肽序列由SEQ ID N0:9给出，并且每一轻链的多肽序列由SEQ ID NO: 10给出。全长抗体是包含由二硫键互联的2条重(H)链和2条轻(L)链的免疫球蛋白分子。每一条链的氨基末端部分包括经其中包含的互补性决定区域(⑶Rs)主要负责抗原识别的约100-110个氨基酸的可变区。每一条链的羧基末端部分限定主要负责效应子功能的恒定区。将轻链分类为K或λ，其每一条的特征在于本领域中已知的特定的恒定区。将重链分为Y、μ、α、δ或ε ,并限定抗体的同种型分别为IgG、IgM、IgA、IgD或IgE。IgG抗体可以进一步分入亚类例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4中。每一重链类型的特征还在于具有本领域熟知的序列的特定恒定区。如本文所用，“抗原结合片段”指Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段、和结合人PCSK9的单链Fv片段。如本文所用，术语“结合(bind)(或‘结合(binds)’)人PCSK9”指与由SEQ ID NO: 14的氨基酸序列给出的人PCSK9上的表位的相互作用。如本文所用，术语“表位”指抗原上分离的、三维位点，其被本专利技术的抗体或抗原结合片段所识别。⑶Rs散布在更保守的名为框架区(“FR”)的区域中。每一轻链可变区(LCVR)和重链可变区(HCVR)由3个⑶Rs和4个FRs构成，其从氨基末端至羧基末端以以下顺序排列:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。将轻链的 3 个 CDRs 称为“LCDRl、LCDR2 和 LCDR3”并将重链的3个⑶Rs称为“HCDR1、HCDR2和HCDR3”本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区（HCVR）和轻链可变区（LCVR），其中所述HCVR包含互补决定域（CDRs）HCDR1、HCDR2和HCDR3并且所述LCVR包含CDRs LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中HCDR1的氨基酸序列由SEQ ID NO: 1给出，HCDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO: 2给出，HCDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO: 3给出，LCDR1的氨基酸序列由SEQ ID NO: 4给出，LCDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO: 5给出，LCDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO: 6给出，其中所述抗体或其抗原结合片段结合人PCSK9。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J戴维斯，B艾伦，RJ达林，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：美国;US