【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及具有C4-二羧酸转运蛋白活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸。本专利技术亦涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用所述多肽的方法,和产生C4- 二羧酸如苹果酸的方法。
技术介绍
有机酸在多种工业中具有悠久历史的商业使用。举例而言,有机酸用于食品和饲料工业(柠檬酸、抗坏血酸、乳酸、乙酸和葡糖酸),作为用于产生多种聚合物的单体(己二酸、乳酸、丙烯酸和衣康酸),作为金属螯合剂(葡糖酸)和作为“绿色”溶剂(乙酸)(Sauer 等,2008,Trends in Biotechnology26:100-108)。有机酸自身可为商业产品或其可为用于制造其他化学品的化学构件(building block)。除了专门用途之外,长久以来公认C4- 二羧酸亦可充当构件化合物以供产生大体积的工业化学品,如1,4- 丁二醇,四氢呋喃和Y-丁内酯。由于石油衍生构件的高成本,通过传统石油化学途径产生这些大体积工业化学品的成本显著增加。有机酸在商业上是通过从石油衍生原料的化学合成(例如,延胡索酸、苹果酸、丙烯酸和己二酸)或通过微生物发酵(例如柠檬酸、乳酸、葡 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.06.21 US 61/356,8681.一种具有C4-二羧酸转运蛋白活性的分离的多肽,其选自: (a)多肽,其与SEQID NO: 2、4或6,或其成熟多肽序列具有至少65%,例如至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%序列同一性; (b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低严格条件,中等严格条件,中等-高严格条件,高严格条件,或非常高严格条件与以下杂交:SEQ IDNO: 1、3或5,其成熟多肽编码序列,或前述序列的全长互补链; (c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQID NO: 1、3或5,其成熟多肽编码序列具有至少65%,例如至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%序列同一 I生; (d)SEQID NO: 2、4或6,或其成熟多肽序列的包含一个或多个(例如两个、几个)氨基酸的取代、缺失和/或插入的变体;和 (e)(a)、(b)、(C)或(d)的多肽具有C4-二羧酸转运蛋白活性的片段。2.权利要求1的多肽,其与SEQID NO: 2、4或6,或其成熟多肽序列具有至少65%,例如至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或100%序列同一性。3.权利要求1或2的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低严格条件,低-中等严格条件,中等严格条件,中等-高严格条件,高严格条件下,或非常高严格条件与以下杂交:SEQ ID NO: 1、3或5, 其成熟多肽编码序列,或前述序列的全长互补链。4.权利要求1-3任一项的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQIDΝΟ:1、3或5,或其成熟多肽编码序列具有至少65%,例如至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或100%序列同一性。5.权利要求1-4任一项的多肽,其包含或组成为SEQID NO:2、4或6。6.权利要求1-4任一项的多肽,其包含或组成为SEQID NO:2、4或6的成熟多肽。7.权利要求6的多肽,其中所述SEQID NO:2的成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸62至397或69至397 ID NO: 4的成熟多肽是SEQ IDNO: 4的氨基酸18至418 ;和所述SEQ ID N0:6的成熟多肽是SEQ ID NO:6的氨基酸69至397。8.权利要求1-7任一项的多肽,其中所述多肽由大肠杆菌NRRLB-50400中包含的质粒pAaC4T737中包含...
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