具有C4-二羧酸转运蛋白活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸制造技术

技术编号：8658895 阅读：166 留言：0更新日期：2013-05-02 03:56

本发明专利技术涉及具有C4-二羧酸转运蛋白活性的分离的多肽，和编码所述多肽的分离的多核苷酸。本发明专利技术亦涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞，以及产生和使用所述多肽的方法，和产生C4-二羧酸如苹果酸的方法。

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及具有C4-二羧酸转运蛋白活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸。本专利技术亦涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞，以及产生和使用所述多肽的方法，和产生C4- 二羧酸如苹果酸的方法。
技术介绍
有机酸在多种工业中具有悠久历史的商业使用。举例而言，有机酸用于食品和饲料工业(柠檬酸、抗坏血酸、乳酸、乙酸和葡糖酸)，作为用于产生多种聚合物的单体(己二酸、乳酸、丙烯酸和衣康酸)，作为金属螯合剂(葡糖酸)和作为“绿色”溶剂(乙酸)(Sauer 等，2008，Trends in Biotechnology26:100-108)。有机酸自身可为商业产品或其可为用于制造其他化学品的化学构件(building block)。除了专门用途之外，长久以来公认C4- 二羧酸亦可充当构件化合物以供产生大体积的工业化学品，如1，4- 丁二醇，四氢呋喃和Y-丁内酯。由于石油衍生构件的高成本,通过传统石油化学途径产生这些大体积工业化学品的成本显著增加。有机酸在商业上是通过从石油衍生原料的化学合成(例如，延胡索酸、苹果酸、丙烯酸和己二酸)或通过微生物发酵(例如柠檬酸、乳酸、葡糖酸和衣康酸)产生的。一些有机酸如延胡索酸和苹果酸亦可通过微生物发酵来产生，但由于更低的生产成本，目前在商业上仍通过化学合成从石油化学原料产生。然而，石油衍生构件化学品的成本的日益升高，地缘政治的不稳定性对原油价格的影响，以及对实施利用来源于可再生资源的原料的制造工艺的期望，刺激了通过微生物发酵产生有机酸和其他化学品中的重建的兴趣。虽然现在通过化学合成从石油化学原料商业性产生苹果酸，其亦可通过微生...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.06.21 US 61/356,8681.一种具有C4-二羧酸转运蛋白活性的分离的多肽，其选自: (a)多肽，其与SEQID NO: 2、4或6，或其成熟多肽序列具有至少65%，例如至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%序列同一性； (b)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸在低严格条件，中等严格条件，中等-高严格条件，高严格条件，或非常高严格条件与以下杂交:SEQ IDNO: 1、3或5，其成熟多肽编码序列，或前述序列的全长互补链； (c)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQID NO: 1、3或5，其成熟多肽编码序列具有至少65%，例如至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%序列同一 I生; (d)SEQID NO: 2、4或6，或其成熟多肽序列的包含一个或多个(例如两个、几个)氨基酸的取代、缺失和/或插入的变体；和 (e)(a)、(b)、(C)或(d)的多肽具有C4-二羧酸转运蛋白活性的片段。2.权利要求1的多肽，其与SEQID NO: 2、4或6，或其成熟多肽序列具有至少65%，例如至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%或100%序列同一性。3.权利要求1或2的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸在低严格条件，低-中等严格条件，中等严格条件，中等-高严格条件，高严格条件下，或非常高严格条件与以下杂交:SEQ ID NO: 1、3或5，其成熟多肽编码序列，或前述序列的全长互补链。4.权利要求1-3任一项的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQIDΝΟ:1、3或5，或其成熟多肽编码序列具有至少65%，例如至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%,至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%或100%序列同一性。5.权利要求1-4任一项的多肽，其包含或组成为SEQID NO:2、4或6。6.权利要求1-4任一项的多肽，其包含或组成为SEQID NO:2、4或6的成熟多肽。7.权利要求6的多肽，其中所述SEQID NO:2的成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸62至397或69至397 ID NO: 4的成熟多肽是SEQ IDNO: 4的氨基酸18至418 ;和所述SEQ ID N0:6的成熟多肽是SEQ ID NO:6的氨基酸69至397。8.权利要求1-7任一项的多肽，其中所述多肽由大肠杆菌NRRLB-50400中包含的质粒pAaC4T737中包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：A费希尔，D亚弗，
申请(专利权)人：诺维信股份有限公司，
类型：
国别省市：

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