一种促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法技术

技术编号:8592950 阅读:247 留言:0更新日期:2013-04-18 06:00
本发明专利技术涉及一种促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法和检测方法,试剂盒包括含有荧光素标记的促黄体生成激素抗体的溶液、包被有抗荧光素抗体的磁微粒的悬浮液,以及含有碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的溶液,该碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体由碱性磷酸酶与促黄体生成激素抗体通过SMCC和2IT连接构成。本发明专利技术使得能够以更低成本和更高准确度和精密度对促黄体生成激素进行定量检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,具体涉及一种结合了免疫磁微粒分离技术和化学发光免疫分析技术的促黄体生成激素的化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法。本专利技术还特别涉及该试剂盒的制备方法。
技术介绍
促黄体生成激素(Luteinizing Hormone, LH)是由垂体前叶嗜碱细胞分泌产生的一种糖蛋白激素,分子量约为30,000道尔顿,由两个非共价结合的不同亚单位组成。其α亚单位有92个氨基酸残基,与LH、TSH、hCG的相同。β亚单位的氨基酸序列与LH、TSH有很大的不同,但又与hCG的很相似。LH受下丘脑产生的促性腺激素释放激素(Gn-RH)的调控。对正常妇女的研究表明垂体分泌LH分为两个相,即在基础分泌相的同时约每2个小时呈现间歇性脉冲分泌。在女性正常月经周期中,LH与LH协同作用引起卵巢的周期变化。2者在月经周期中期出现的高峰会引起卵泡破裂,释放出成熟的卵子。残余的卵泡成为功能性黄体,分泌孕酮和雌二醇,这些类固醇对下丘脑和垂体施加正、负二种反馈调节从而影响LH的进一步分泌。至绝经期,卵巢功能减退,雌二醇的分泌减少直至最终结束。由于解除了施加在下丘脑上的负反馈使得循环中LH的水平显本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒,所述试剂盒包括用于免疫反应步骤的免疫反应试剂,所述的免疫反应试剂包括含有荧光素标记的促黄体生成激素抗体的溶液和包被有抗荧光素抗体的磁微粒的悬浮液,其特征在于:所述的免疫反应试剂还包括含有碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的溶液,该碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体由碱性磷酸酶与促黄体生成激素抗体通过4?(N?马来酰亚胺基甲基)环己烷?1?羧酸琥珀酰亚胺酯和2?亚氨基硫烷盐酸盐连接构成。

【技术特征摘要】
1.一种促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒,所述试剂盒包括用于免疫反应步骤的免疫反应试剂,所述的免疫反应试剂包括含有荧光素标记的促黄体生成激素抗体的溶液和包被有抗荧光素抗体的磁微粒的悬浮液,其特征在于所述的免疫反应试剂还包括含有碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的溶液,该碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体由碱性磷酸酶与促黄体生成激素抗体通过4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯和2-亚氨基硫烷盐酸盐连接构成。2.根据权利要求1所述的促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒,其特征在于所述的含有荧光素标记的促黄体生成激素抗体的溶液的PH为7 9,其中的荧光素标记的促黄体生成激素抗体的浓度为O. 5! μ g/mL。3.根据权利要求1或2所述的促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒,其特征在于所述包被有抗荧光素抗体的磁微粒中,抗荧光素抗体与磁微粒之间相化学偶联。4.根据权利要求1或2所述的促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒,其特征在于所述的含有碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的溶液的PH为7 9,其中碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的浓度为O. 5^1 μ g/mL。5.—种如权利要求f 4中任一项权利要求所述的促黄体生成激素的纳米磁微粒化学发光测定试剂盒的制备方法,其包括分别制备所述含有荧光素标记的促黄体生成激素抗体的溶液、所述含有碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的溶液以及所述包被有抗荧光素抗体的磁微粒的悬浮液的步骤,其特征在于所述含有碱性磷酸酶标记的促黄体生成激素抗体的溶液的制备过程如下①取促黄体生成激素抗体的磷酸盐缓冲液,加入2-亚氨基硫烷盐酸盐,在室温下静置反应15 25min,加入甘氨酸溶液,室温静置3 10min,通过G-25凝胶柱除盐,收集活化的促黄体生成激素抗体,2l°C下保存备用;②取碱性磷酸酶的磷酸盐缓冲液,加入4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯,室温静置反应25 35min,通过G-25凝胶柱除盐,收集活化的碱...

【专利技术属性】
技术研发人员:于大为程晓蕾李冬冬
申请(专利权)人:苏州浩欧博生物医药有限公司
类型:发明
国别省市:

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