一株地衣芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一株地衣芽孢杆菌，为地衣芽孢杆菌（Bacillus?licheniformis?）HB1，其保藏编号为CCTCC?NO:M?2012480。本发明专利技术筛选的地衣芽孢杆菌用来制备菌粉；制备的菌粉作为饲料添加剂的，按质量百分比为0.01%~0.5%的比例添加至畜禽饲料中。本发明专利技术筛选的地衣芽孢杆菌的菌粉与饲料混合后饲喂养殖动物，有效改善了其日增重、料肉比、免疫方面等生产性能，因此，可将其作为饲料添加剂应用于畜禽饲料中，利于增加经济效益，有着广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一株地衣芽孢杆菌及其应用
本专利技术属微生物筛选应用
，具体涉及一株地衣芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
在畜禽业上，抗生素除了被用来防止和治疗病菌感染，也长期被用于促进动物生长，从而提高畜禽产品产量。抗生素的使用带来了巨大的经济效益，但同时也出现了许多弊端；例如使耐药性病原菌增加，以及畜禽产品药残超标等问题。随着社会对食品安全的重视，人们对抗生素饲料添加剂带来的负面效应意识也在不断提高。为了应对这些问题，采用益生菌微生态制剂的生物促生长、调免疫措施成为当前畜禽养殖热点而受到重视。益生菌制剂可通过补充、调整或维持动物肠道内的微生态平衡，达到防治疾病、促进健康或提高生产性能的目的；而且益生菌制剂无毒副作用、无耐药性、无残留，因此，益生菌微生态制剂深获养殖业的青睐。这也使筛选出性能优良的新型益生菌成为研究热点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株地衣芽孢杆菌及其在畜禽养殖中的应用。所述的地衣芽孢杆菌分离自21日龄健康肉鸡的小肠中。将本专利技术的地衣芽孢杆菌发酵制备成菌粉，作为饲料添加剂应用于畜禽饲料中，能显著提高养殖动物的生产性能。本专利技术一方面提供了一株地衣芽孢杆菌，该菌株命名为地衣芽孢杆菌HBl (Bacillus licheniformis HB1)，已于2012年11月26日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，其保藏编号为CCTCC Ν0:Μ 2012480。·本专利技术筛选的地衣芽孢杆菌用来制备菌粉；制备过程为将地衣芽孢杆菌HBl活化、扩大培养，经35 37°C液态发酵，500(T8000rpm离心收集菌泥，加入轻质碳酸钙载体，烘干制成菌量为200 1000亿/g的菌粉。上述的菌粉作为饲料添加剂的应用，是按质量百分比为O. OΡΓ0. 5%的比例添加至畜禽饲料中。本专利技术筛选的地衣芽孢杆菌的菌粉与饲料混合后饲喂养殖动物，有效改善了其日增重、料肉比、免疫方面等生产性能，因此，可将其作为饲料添加剂应用于畜禽饲料中，利于增加经济效益，有着广阔的应用前景。具体实施方式实施例1地衣芽孢杆菌HBl的分离、纯化1、分离及纯化I)取21日龄的健康肉鸡，宰杀后，迅速取出小肠段，剪碎成Icm长的小段，置于加玻璃珠的无菌水中，震荡混匀15min，并用80°C水浴处理杀死非芽孢形态的菌体；2)将处理液以10倍梯度稀释，取合适梯度的稀释液涂布于营养琼脂平板上，37°C 过夜培养；3)挑起菌落大、生长快的菌株，进一步划线纯化。2、菌株的属种鉴定将分离到的I株芽孢杆菌，命名为HB1，进行生化鉴定。该菌株经革兰氏染色呈阳性，杆状，芽孢为椭圆状，位于中部或偏端；生理生化特征V-P试验(+)，淀粉水解(+)， 酪素水解(+ )，明胶水解(+ )，硝酸盐还原(+ )，吲哚试验(-)，生长温度范围15 55 °C，pH范围5 9，高于7%NaCl不生长。生化鉴定结果显示，该芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis);同时采用PCR扩增该菌16S rRNA序列，比对分析与NCBI数据库中地衣芽孢杆菌同源性达99%，将该菌HBl鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，与生理生化结果一致。将该地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)HBl于2012年11月26日送交“中国典型培养物保藏中心”保藏，保藏编号为=CCTCC NO: M 2012480。实施例2地衣芽孢杆菌HBl菌粉的制备1、种子液制备挑取地衣芽孢杆菌HBl单菌落，接种于50mL营养肉汤培养基中，pH 为7· 0±0· 5，37°C，200rpm振荡培养24h，即为种子液；2、发酵培养以5%的接种量接种至新的营养肉汤中，37°C，200rpm振荡培养，芽孢形成达90%时，结束培养；3、收集菌体以5000rpm，IOmin条件，去除发酵上清液，收集菌泥备用；4、烘干将轻质碳酸钙与菌泥搅拌混匀，在干燥箱中50°C烘干，即得地衣芽孢杆菌 HBl菌粉。实施例3地衣芽孢杆菌HBl对肉鸡生长性能影响采购I日龄罗氏308白羽肉公鸡，分为对照组和实验组，每个处理组16个重复，每个重复8羽鸡，生产试验期为35天，其中对照组为饲喂普通商品日粮，实验组为饲喂添加O.01%地衣芽孢杆菌HBl菌粉的普通商品日粮，测量试验过程中日增重、日采食量、料肉比、 成活率、育肥指数变化情况，实验结果如表I所示表I地衣芽孢杆菌HBl对肉鸡生产性能的影响组别日增重(g)曰釆食量料肉比成活率育肥指数对照组60.51+4.76100.95±8.261.67±0.0888.54±11.25330.52±40.69实验组62.47 士 6.17103.01±9.291.65±0.0891.35±7.88346.47±50.25由表I的肉鸡饲喂试验结果可知，全期来看，实验组肉鸡日增重比对照组提高了 3. 24%，料肉比在对照组基础上降低O. 02，与对照差异显著(P < O. 05)。测试指标中，实验组日增重、日采食量、料肉比、成活率、育肥指数方面均优于对照组。上述结果表明，饲料中添加本专利技术的地衣芽孢杆菌HB1，能显著改善肉鸡的生产性能，不仅降低了肉鸡的生产成本，还提高了肉鸡的生产效率，增加了饲养者的经济效益。实施例4地衣芽孢杆菌HBl对肉鸡免疫水平及其免疫器官的影响将实施例3中的罗氏308白羽肉公鸡饲喂至35日龄时，进行以下操作1)实验组和对照组分别随机取12只鸡采血，分离血清，检测血清球蛋白(IGg)含量及新城疫(ND)抗体水平；2)实验组和对照组分别随机取12只鸡宰杀，取完整的胸腺、法氏囊、脾脏，称重，计算免疫器官指数；然后取免疫器官病料，10%福尔马林固定，石蜡切片，HE染色，镜检观察各免疫器官的发育状况，实验结果如表2所示。表2地衣芽孢杆菌HBl对肉鸡免疫水平及其免疫器官的影响权利要求1.一株地衣芽孢杆菌，为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)HBl,其保藏编号为CCTCC NO:M 2012480。2.权利要求1所述的地衣芽孢杆菌在制备益生菌制剂中的应用。3.一种菌粉，所述的菌粉是用权利要求1所述的地衣芽孢杆菌制备的。4.权利要求3所述的菌粉的制备方法，其步骤如下将权利要求1所述的地衣芽孢杆菌活化、扩大培养，经35 37°C液态发酵，500(T8000rpm离心收集菌泥，加入轻质碳酸钙载体，烘干制成菌量为200 1000亿/g的菌粉。5.权利要求3所述的菌粉作为饲料添加剂的应用。6.如权利要求5所述的应用，是将菌粉按质量百分比为0.019T0. 5%的比例添加至畜禽饲料中。全文摘要本专利技术提供了一株地衣芽孢杆菌，为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis )HB1，其保藏编号为CCTCC NO:M 2012480。本专利技术筛选的地衣芽孢杆菌用来制备菌粉；制备的菌粉作为饲料添加剂的，按质量百分比为0.01%~0.5%的比例添加至畜禽饲料中。本专利技术筛选的地衣芽孢杆菌的菌粉与饲料混合后饲喂养殖动物，有效改善了其日增重、料肉比、免疫方面等生产性能，因此，可将其作为饲料添加剂应用于畜禽饲料中，利于增加经济效益，有着广阔的应用前景。文档编号C12N1/20GK102994426SQ20121048868公开日2013本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株地衣芽孢杆菌，为地衣芽孢杆菌（Bacillus?licheniformis）HB1，其保藏编号为CCTCC?NO:M?2012480。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：彭虹旎，梁莉，马俊孝，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：