新型调节剂制造技术

本发明专利技术提供了调节胰岛素受体信号转导的抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】调节剂相关引用的交叉申请本申请要求2009年9月25日提交的美国临时专利申请No.61/246,067、2010年2月19日提交的美国临时申请61/306,321和2010年6月25日提交的美国临时申请No.61/358,749的优先权利益，每个临时申请以引用方式整体并入。
本专利技术涉及胰岛素-胰岛素受体信号转导复合体的新型调节剂和/或激动剂和筛选这种调节剂和/或激动剂的方法。这种调节剂和/或激动剂可(例如)用于治疗患有2型糖尿病、肥胖、高血糖症、高胰岛素血症、胰岛素过量、慢性肾病、1型糖尿病、胰岛素抵抗和特征在于胰岛素抵抗的疾病状态和病状的哺乳动物受试者或预防其在危险受试者中出现。
技术介绍
本专利技术涉及胰岛素-胰岛素受体信号转导复合体的新型调节剂和/或激动剂，筛选这种调节剂和/或激动剂的方法和这种调节剂和/或激动剂在治疗或预防特征在于胰岛素的异常生成和/或利用的疾病状态和病状中的用途。肽类激素胰岛素是葡萄糖稳态和细胞生长的主要调控剂。胰岛素作用中的第一步是激素与胰岛素受体(INSR)的结合，胰岛素受体是一种完整的膜糖蛋白，也称为CD220或HHF5。INSR属于酪氨酸激酶生长因子受体超家族并且由2个结合胰岛素的细胞外α亚基和2个具有内在酪氨酸激酶活性的跨膜β亚基。US4,761,371中描述了INSR的氨基酸序列并且如NCBI参考序列NP_000199.2所述。INSR表达为2种同种型INSR-A和INSR-B。已使用X射线结晶学阐明了人INSR的完整同型二聚体胞外域片段的三维结构(WO07/147213)。INSR同种型还形成异型二聚体INSR-A/INSR-B和杂交INSR/IGF-1R受体，其在生理学上的作用和疾病仍未完全了解(Belfiore等，EndocrineRev.,30(6):586-623,2009)。当胰岛素结合INSR时，通过酪氨酸自体磷酸化激活受体并且INSR酪氨酸激酶磷酸化包括胰岛素受体底物-1(IRS-1)在内的各种效应分子，从而导致激素作用(Ullrich等，Nature313:756-761,1985；Goldfine等，EndocrineReviews8:235-255,1987；White和Kahn，JournalBiol.Chem.269:1-4,1994)。IRS-1结合和磷酸化最终导致胰岛素-反应组织(包括肌细胞)和脂肪组织外膜上的高亲和力葡萄糖转运子(Glut4)分子增多，并且因此导致葡萄糖从血液至这些组织中的摄取增多。Glut4从细胞囊泡转运至细胞表面，然后Glut4可在此介导葡萄糖向细胞内的转运。INSR信号转导减少导致细胞对葡萄糖的摄取减少、高血糖症(循环葡萄糖增多)和由此引起的所有后遗症。葡萄糖摄取减少可引起胰岛素抵抗，这描述了胰岛素的生理量不足以由细胞或组织产生正常胰岛素反应的病状。严重的胰岛素抵抗与糖尿病相关，而较低严重性的胰岛素抵抗也与约30-40％非糖尿病个体的许多疾病状态和病状相关(Woods等，End,Metab&ImmuneDisorders–DrugTargets9:187-198,2009中有评论)。目前对糖尿病和胰岛素抵抗的治疗旨在增加胰岛素分泌，减少葡萄糖生成和增强胰岛素作用。当前，有治疗2型糖尿病的各种药理学方法(Scheen等，DiabetesCare,22(9):1568-1577,1999；Zangeneh等，MayoClin.Proc.78:471-479,2003；Mohler等，MedResRev29(1):125-195,2009)。它们通过不同作用方式起作用：1)磺酰脲(例如，格列美脲、格列生脲、磺酰脲、AY31637)主要刺激胰岛素分泌；2)双胍(例如，二甲双胍)通过促进葡萄糖利用，减少肝葡萄糖生成并减少肠葡萄糖排出作用；3)α葡糖苷酶抑制剂(例如，阿卡波糖、米格列醇)减缓碳水化合物消化并因此减缓从肠道的吸收和减轻餐后高血糖症；4)噻唑烷二酮(例如，曲格列酮、吡格列酮、罗格列酮、格列吡嗪、巴格列酮、利格列酮、萘格列酮、曲格列酮、恩格列酮、AD5075、T174、YM268、R102380、NC2100、NIP223、NIP221、MK0767、环格列酮、adaglitazone、CLX0921、达格列酮、CP92768、BM152054)增强胰岛素作用，从而促进外周组织中葡萄糖利用；5)胰高糖素样肽和激动剂(例如毒蜥外泌肽)或其稳定剂(例如DPP4抑制剂(例如西他列汀))加强葡萄糖刺激的胰岛素分泌和6)胰岛素或其类似物(例如刺激组织葡萄糖利用并抑制肝葡萄糖排出。以上提及的药理学方法可单独利用或在组合疗法中利用。然而，每种方法均有其局限性和不良作用。随时间推移，很大比例的2型糖尿病受试者失去他们对这些试剂的反应。63％的2型糖尿病患者不能达到如美国糖尿病协会建议的<7％的整体HbA1c水平，并因此处于发展并发症的高危险中。而且，患者几乎总是进展通过降低胰腺功能的阶段。通常将胰岛素治疗制定在饮食、运动之后，并且口服药物未能充分控制血糖。胰岛素治疗的缺点是需要药物注射、低血糖症的可能和增重。因此仍急切需要新型抗糖尿病试剂。Soos等，Biochem.J.235:199-208,1986；Taylor等，Biochem.J.242:123-129,1987；Prigent等，J.Biol.Chem.265(17):9970-9977,1990；Brindle等，Biochem.J.268:615-620,1990；Steele-Perkins和Roth,J.Biol.Chem.265(16):9458-9463,1990；McKern等，Nature443(14):218-221；Boado等，BiotechandBioEng.96(2):381-391；WO04/050016；Roth等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA79:7312-7316,1982；Morgan等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA83:328-332,1986；Lebrun等，J.Bl.Chem.268(15):11272-11277,1993；Forsayeth等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:3448-3451,1987；Forsayeth等，J.Biol.Chem.262(9):4134-4140,Goodman等，J.ReceptorRes.14(6-8),381-398,1994；Ganderton等，BiochemJ.288:195-205,1992；Spasov等，Bull.ofExp.Biol.andMed.144(1):46-48,2007；EP2036574A1中已经报道了结合人INSR的抗体。
技术实现思路
本专利技术涉及多肽结合剂，例如通过结合与胰岛素未复合的INSR的胞外区、与胰岛素复合的INSR或两者来调节和/或激动化胰岛素-INSR信号转导复合体的抗体或其片段。INSR是膜结合的细胞表面受体。一方面，本专利技术提供了一种抗体，所述抗体以10-5M或更低的平衡解离常数KD结合胰岛素受体和/或包含胰岛素和胰岛素受体的复合体，所述抗体能够增强胰岛素和胰岛素受体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.09.25 US 61/246,067;2010.02.19 US 61/306,321;1.一种单克隆抗体，所述抗体以10-5M或更低的平衡解离常数KD结合(i)胰岛素受体或(ii)包含胰岛素和胰岛素受体的复合体或(i)和(ii)两者，所述抗体能够削弱胰岛素和胰岛素受体之间的结合亲和力至少3倍，多达1000倍，其中所述抗体以变构的方式结合(i)或(ii)，其中所述抗体包含：(a)任何SEQIDNO:279、SEQIDNO:241、SEQIDNO:258、SEQIDNO:155、SEQIDNO:228、SEQIDNO:169、SEQIDNO:160、SEQIDNO:153、SEQIDNO:154、SEQIDNO:226、SEQIDNO:231、SEQIDNO:233、SEQIDNO:244、SEQIDNO:246、SEQIDNO:260、SEQIDNO:262的重链可变区和任何SEQIDNO:139、SEQIDNO:103、SEQIDNO:119、SEQIDNO:8、SEQIDNO:89、SEQIDNO:18、SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:4、SEQIDNO:87、SEQIDNO:92、SEQIDNO:94、SEQIDNO:105、SEQIDNO:107、SEQIDNO:121和SEQIDNO:123的轻链可变区，或(b)任何SEQIDNO:279、SEQIDNO:241、SEQIDNO:258、SEQIDNO:155、SEQIDNO:228、SEQIDNO:169、SEQIDNO:160、SEQIDNO:153、SEQIDNO:154、SEQIDNO:226、SEQIDNO:231、SEQIDNO:233、SEQIDNO:244、SEQIDNO:246、SEQIDNO:260、SEQIDNO:262的3个重链CDR和任何SEQIDNO:139、SEQIDNO:103、SEQIDNO:119、SEQIDNO:8、SEQIDNO:89、SEQIDNO:18、SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:4、SEQIDNO:87、SEQIDNO:92、SEQIDNO:94、SEQIDNO:105、SEQIDNO:107、SEQIDNO:121和SEQIDNO:123的3个轻链CDR；或(c)任何SEQIDNO:279和139、SEQIDNO:241和103、SEQIDNO:258和119、SEQIDNO:155和8、SEQIDNO:228和89、SEQIDNO:169和18、SEQIDNO:160和1、SEQIDNO:153和2、SEQIDNO:154和4、SEQIDNO:226和87、SEQIDNO:231和92、SEQIDNO:233和94、SEQIDNO:244和105、SEQIDNO:246和107、SEQIDNO:260和121以及SEQIDNO:262和123的所有6个CDR。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体能够削弱所述胰岛素和胰岛素受体之间的结合亲和力3倍至500倍。3.根据权利要求1所述的抗体，其中所述结合亲和力为结合率与解离率之比或解离率与结合率之比KA、KD的任一个。4.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体将胰岛素信号转导活性的EC50提高2倍至1000倍。5.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含的重链可...

【专利技术属性】
技术研发人员：约翰·科尔宾，马克·莱斯利·怀特，苏珊·R·沃森，维纳伊·巴斯卡尔，
申请(专利权)人：佐马技术有限公司，
类型：
国别省市：