【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，涉及正丁醇耐受微生物，尤其是。
技术介绍
正丁醇是重要的精细化工原料，主要用于邻苯二甲酸二丁酯DBP和丙烯酸丁酯BA等脂肪族二元酸脂类及磷酸酯类的生产。更重要的是，由于正丁醇能值高、可混合性高、辛烷值高和挥发性低等优势，所以正丁醇更是良好的生物燃料。研究表明正丁醇燃烧所释放的能量是同等体积的乙醇的两倍。随着石油资源的日益匮乏和温室效应的日益恶化，生物法生产正丁醇越来越受到人们的关注。 正丁醇可通过微生物发酵法生产，一般采用丙酮丁醇梭菌(Clostridiumacetobutylicum)及相关变种，在厌氧条件下利用淀粉或糖份发酵生成丙酮、丁醇和少量酒精等有机溶剂，故称ABE发酵。目前生产菌株主要是专性厌氧的梭状芽孢杆菌，包括 Clostridium acetobutylicum、C. beijerinckii、C. saccharoprbutylacetonicum 和C. saccharobutylicum0ABE发酵法生产正丁醇有很长的历史，但存在溶剂浓度低、溶剂产量低、丁醇毒性大以及产品比例不合理等因素，导致生物法生产正丁醇难以...
【技术保护点】
一种正丁醇耐受菌株，其特征在于：名称为YY?23，分类名称为PSeudomonas?stutxeri,保藏编号为：CGMCCNo.6771，保藏日期：2012年11月2日，保藏地址为：北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
【技术特征摘要】
1.一种正丁醇耐受菌株，其特征在于名称为YY-23，分类名称为PSeudomonasstutxeri,保藏编号为CGMCCNo. 6771，保藏日期:2012年11月2日，保藏地址为北京市朝阳区大屯路中国科学院微生物研究所，保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。2.如权利要求I所述的正丁醇耐受菌株在构建正丁醇高产菌株中的应用。3.—种如权利要求I所述的正丁醇耐受菌株筛选方法，其特征在于在筛选过程中采用将不同环境样品培养在富集培养基中进行分离，获得分离菌株，再将分离菌株培养在添加不同浓度正丁醇的耐受培养基中，用分光光度计测定菌体密度的方法测定菌体的相对生长率，获得正丁醇耐受菌株。4.根据权利要求3所述的正丁醇耐受菌株筛选方法，其特征在于具体步骤如下 ⑴正丁醇耐受菌株的富集与分离 取不同环境样品，分别与生理盐水混合后稀释，于220rpm震荡30min,静止15min,取上清液，按上清液与富集培养基的体积比为1:15，将上清液分别加入添加到含有正丁醇的富集培养基中，混合液放于35° C恒温培养22-26h ;取混合液上清按体积比为1:15分别添加到含有不同质量浓度正丁醇的富集培养基中，混合液放于35° C恒温培养22-26h，重复上述富集步骤3次以上，将富集培养液梯度稀释、涂布于添加10g/L正丁醇的固体富集培养基，35° C下培养72h后，在固体富集培养基中生长的菌株为分离菌株； ⑵耐受分析 将分离菌株接种于种子液体培养基，于35° C活化为一级和二级种子；吸取二级种子液按5%的接种量接种于耐受培养基中，35° C220rpm培养24h，在600nm波长下，用分光光度计测定菌体密度，计算菌株的相对生长率，经筛选，即可获得正丁醇耐受菌株。5.根据权利要求3或4所述的正丁醇耐受菌株的筛选方法，其特征在于所述不同环境样品为杨树林土壤、松树林土壤、甜瓜地土壤、花生地土壤、污水与污泥、沼气...
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