【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种三角帆蛘的脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LipopoIysaccharide-induced TNF-alpha factor, LITAF)蛋白的全序列、引物序列、及其蛋白的制备方法，属于生物
技术介绍
脂多糖诱导的肿瘤坏死因子a 因子(Lipopolysaccharide-induced TNF-alphafactor, LITAF) 一种能调控肿瘤坏死因子TNF_a转录表达的转录因子,可引起多种肿瘤细胞发生凋亡(Yang等,2012)。我国是水产大国，三角帆蛘等贝类养殖是我国水产养殖的支柱产业之一。三角帆蛘不仅肉质细嫩、营养价值高，还具有抗癌降血脂等功效。目前国内外通过提取三角帆蛘等贝类体内的多糖等生物活性物质，并开发出了保健食品。但以上多为多糖等物质的混合物，是免疫调节产品，并且基础研究资料少，对肿瘤细胞的毒性作用较低，对其功效及副作用等所知不多。而利用基因工程技术开发的三角帆蛘中LITAF蛋白产品，对人类肿瘤细胞NCI-H446等肿瘤细胞具有杀伤性强、特异性高、安全性好、能够大量生产、易于贮存等优点，并具有广阔的市场前景。专利技...
【技术保护点】
一种三角帆蚌的脂多糖诱导的肿瘤坏死因子蛋白的全序列，其特征在于：具有序列表中SEQ?ID?NO.1所示的来自于三角帆蚌体内的LITAF蛋白的核酸全序列和具有序列表中SEQ?ID?NO.2所示的来自于三角帆蚌体内的LITAF蛋白的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.ー种三角帆蛘的脂多糖诱导的肿瘤坏死因子蛋白的全序列，其特征在于具有序列表中SEQ ID NO. I所示的来自于三角帆蛘体内的LITAF蛋白的核酸全序列和具有序列表中SEQ ID NO. 2所示的来自于三角帆蛘体内的LITAF蛋白的氨基酸序列。2.ー种三角帆蛘的脂多糖诱导的肿瘤坏死因子蛋白的引物序列，其特征在于具有序列表中SEQ ID NO. 3所示的用于扩增LITAF蛋白基因的寡聚核苷酸引物序列。3.—种如权利要求I所述的脂多糖诱导的肿瘤坏死因子蛋白的制备方法，其特征在于包括如下步骤 以三角帆蛘的cDNA为模板，将设计好扩增LITAF蛋白基因的寡聚核苷酸引物序列作为目的片段，进行嵌套聚合酶链式PCR反应，得到编码LITAF蛋白的基因全序列；再通过构建重组表达载体pET-28a(+) -LITAF,体外诱导LITAF蛋白表达；最后分离纯化目的蛋白，获得重组的LITAF蛋白，所制备得到的蛋白具有序列表中SEQ ID NO. I所示的来自于三角帆蛘体内特有的LITAF蛋白的核酸全...
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