农作物转基因成份检测法及所用芯片制造技术

本发明专利技术公开了一种农作物转基因成份检测法，包括以下步骤：一、制备转基因成份检测芯片；针对转基因农作物的内源、外源、品系这三类基因，选择特异性探针，每条特异性探针的5'进行氨基修饰；然后将氨基修饰后的探针固定醛基玻片上，预杂交后，得转基因成份检测芯片；?二、检测：1）、利用已知标准，获取转基因片段的引物；2）、农作物待测样品中DNA的提取，得提取液；3）、靶基因的多重PCR扩增；4）、芯片杂交检测：将扩增产物与转基因成份检测芯片杂交；然后进行荧光探针杂交，再利用T4DNA连接酶进行酶连接，接着用NaOH变性，最后用洗液洗涤；?5）、杂交结果的检测与分析：扫描所得的芯片，对结果进行分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学检测技术，尤其是涉及大豆、玉米等相关产品的转基因成份检测。 
技术介绍
转基因，是指运用科学手段从某种生物中提取所需的基因，将其转入另一种生物中，使之与另一种生物的基因进行重组，从而产生特定的具有优良遗传性状的物质。利用转基因技术，可以改变动植物性状、培育新品种；也可以利用其他生物体培育出人类所需要的生物制品，用于医药、食品等方面。转基因是基因工程的重要组成部分。 全球转基因作物发展势头强劲。据专家提供的权威资料，2010  年全球转基因作物种植面积达到 1.48 亿公顷，是 1996 年的 87 倍，15 年间年均增长近 5 倍。1996 年全球种植转基因作物的国家仅 6 个，2010 年已达 29 个。4 大主要转基因作物种植面积也创新高。全球大豆面积的五分之四（81%）、棉花面积的三分之二（64%）、玉米面积的三分之一（29%）、油菜面积的四分之一（23%）种植的都是转基因品种。  全球有近 40 个国家和地区虽未正式批准转基因作物商业化种植，但允许进行试验研究或进口转基因作物原料用于饲料和食品加工。2010 年本文档来自技高网...

【技术保护点】
农作物转基因成份检测法，其特征是包括以下步骤：一、制备转基因成份检测芯片；针对转基因农作物的内源、外源、品系这三类基因，选择特异性探针，每条特异性探针的5“进行氨基修饰；然后将氨基修饰后的探针固定醛基玻片上，预杂交后，得转基因成份检测芯片；二、检测：依次进行以下步骤：？？？1）、利用已知标准，获取转基因片段的引物；？？？2）、农作物待测样品中DNA的提取，得提取液；3）、靶基因的多重PCR扩增：以步骤2）的提取液作为PCR模板，利用步骤1）所得的引物进行多重PCR扩增；得扩增产物；4）、芯片杂交检测：将扩增产物与转基因成份检测芯片杂交；然后进行荧光探针杂交，再利用T4DNA连接酶进行酶连接，接...

【技术特征摘要】
1.农作物转基因成份检测法，其特征是包括以下步骤：
一、制备转基因成份检测芯片；
针对转基因农作物的内源、外源、品系这三类基因，选择特异性探针，每条特异性探针的5'进行氨基修饰；然后将氨基修饰后的探针固定醛基玻片上，预杂交后，得转基因成份检测芯片；
二、检测：
依次进行以下步骤：
   1）、利用已知标准，获取转基因片段的引物；
   2）、农作物待测样品中DNA的提取，得提取液；
3）、靶基因的多重PCR扩增：
以步骤2）的提取液作为PCR模板，利用步骤1）所得的引物进行多重PCR扩增；得扩增产物；
4）、芯片杂交检测：
将扩增产物与转基因成份检测芯片杂交；然后进行荧光探针杂交，再利用T4DNA连接酶进行酶连接，接着用NaOH变性，最后用洗液洗涤； 
所述荧光探针为与特异性探针相对应的荧光探针；
5）、杂交结果的检测与分析：
用扫描仪扫描上述步骤4）所得的芯片，利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明哲，张晓峰，陈笑梅，吴姗，陈曦，
申请(专利权)人：浙江省检验检疫科学技术研究院，
类型：发明
国别省市：