特异分子标记法鉴定烟草 “中烟90” 品种纯度的方法技术

技术编号:8410152 阅读:285 留言:0更新日期:2013-03-14 00:44
本发明专利技术涉及一种特异分子标记法鉴定烟草“中烟90”品种纯度的方法,是利用SSR分子标记鉴定烤烟“中烟90”品种的纯度;本发明专利技术通过大量实验验证得到了扩增出中烟90特征条带的特异性引物,利用“中烟90”的特征引物进行纯度检验,检测结果可靠且直观,相比传统的常规检测方法操作简单,检测效率高,成本更低。利用本发明专利技术检验周期短,即在苗期阶段就可通过本方法检测种子纯度,且标准统一,不受人为以及环境的影响,结果准确可靠。

【技术实现步骤摘要】
(一)
本专利技术涉及一种特异分子标记法鉴定烟草“中烟90”品种纯度的方法,属于烟草育种与生物
(二)
技术介绍
种子是农业最基本的生产资料,种子质量的优劣直接影响农作物的产量和质量。目前主栽烟草品种混杂和种子退化比较严重,给农民带来了巨大的经济损失。开展种子纯度检验对保证种子质量和提高烟草生产效益具有重要意义。种子纯度是评价烟草种子质量的重要指标之一,目前我国采用的烟草种子纯度鉴定方法主要为:常规鉴定法。其中常规鉴定法主要包括种子形态鉴定法、幼苗形态鉴定法、物理化学鉴定法、大田期形态鉴定法。这些方法在烟草种子纯度和品种一致性的检测中起着重要的作用,但是这些方法都有一定的缺陷或局限性,主要为所需费用高、周期长的问题。特别是小区种植鉴定,需5-7个月才能完成,且许多性状受栽培技术及环境因素的影响,其结果会产生偏差,同时鉴定者的观测经验也制约着鉴定结果的准确性。另外,20世纪80年代开始,生化鉴定开始应用到烟草种子纯度,主要包括同工酶电泳、蛋白质电泳、高效液相色谱等方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异分子标记法鉴定烟草“中烟90”品种纯度的方法,其特征在于包括如下步骤:1)设计特异性引物,以烟草品种“中烟90”的基因组DNA为模板,采用CTAB/NaCl法扩增得到“中烟90”特征条带,“中烟90”特征条带大小分别为159bp和98bp;所述特异性引物为:正向引物:F:5′—GAACAGATTGCTGAAACTGAGAGA—3′其序列如Seq?ID?No:1所示;反向引物:R:5′—GATGAGGTGGAGGCACAAG—3′其序列如Seq?ID?No:2所示;2)进行品种鉴定:以待测品种的基因组DNA为模板进行PCR扩增:PCR扩增总体积为15μl,具体为1.5μl的10×PCRb...

【技术特征摘要】
1.一种特异分子标记法鉴定烟草“中烟90”品种纯度的方法,其特征在于包括如下
步骤:
1)设计特异性引物,以烟草品种“中烟90”的基因组DNA为模板,采用CTAB/NaCl法扩增
得到“中烟90”特征条带,“中烟90”特征条带大小分别为159bp和98bp;
所述特异性引物为:
正向引物:
F:5′—GAACAGATTGCTGAAACTGAGAGA—3′其序列如Seq ID No:1所示;
反向引物:
R:5′—GATGAGGTGGAGGCACAAG—3′其序列如Seq ID No:2所示;
2)进行品种鉴定:
以待测品种的基因组DNA为模板进行PCR扩增:PCR扩增总体积为15μl,具体为1.5μl
的10×PCRbuffer,2.5mmol/L的MgCl2,0.25mmol/L的dNTPs...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨龙黄莉莎王玉军曹恒春王毅
申请(专利权)人:山东农业大学
类型:发明
国别省市:

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