一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法技术

本发明专利技术涉及一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法，包括甘蔗模板DNA提取、恒温扩增体系的建立和恒温扩增产物的鉴定。转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增检测方法针对抗螟虫转基因甘蔗的外源目的基因cry1Ac的碱基序列，设计了4条特异性引物，在Bst聚合酶作用下进行链置换扩增反应，特异性高。同时，扩增反应仅需水浴锅与可完成瞬时离心的常温低速离心机就能完成，因此，所需仪器设备简单，比常规PCR技术需要昂贵的凝胶扫描系统和PCR仪（或real-timePCR）等，扩增成本相对较低且扩增时间短、效率高，目视法颜色反应看结果直观方便。体系建立后，直接以提取的甘蔗基因组DNA作为模板，是一种适用于实验室和田间筛选转cry1Ac基因甘蔗以及进行cry1Ac基因成分检测、跟踪的低成本、快速、灵敏、简单、准确的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物转基因的检测方法，具体涉及一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法，属生物

技术介绍
甘蔗螟虫，属昆虫纲鳞翅目，是危害甘蔗普遍而严重的一类钻蛀性害虫。螟虫种类多，世界甘蔗螟虫有65种，我国常见的有五种，即螟蛾科的条螟(Chilo venosatus)、二点螟(C.infuscatellus) 和白螟(Scirpophaga excerpalis)；卷叶蛾科的黄螟(Aryroploce schistaceana)；夜蛾科的大螟(S. inferens)。甘蔗原产于热带，经驯化后我国主要在广西、云南、福建等地种植，其加工产品蔗糖约占我国食糖总产的92%，甘蔗生产又被誉为蔗糖生产的第一车间，因此，甘蔗生产关系我国食糖安全。长期以来，螟虫是我国甘蔗生产上最重要和发生最普遍、危害最严重的虫害，各种螟虫每年可发生3-7代，世代重叠和多种螟虫混合发生并存，还具有全生长季为害的特点。其中①萌芽期为害造成不出苗，缺株；②苗期或分蘖初期为害，幼虫入侵为害生长点后，心叶枯死，形成枯心苗；③生长中期生长点受害，形成梢端枯萎，抽出侧芽，使主茎受抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术的一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法，包括甘蔗模板DNA提取、恒温扩增体系的建立和恒温扩增产物的鉴定，其特征在于：恒温扩增检测引物：所使用的检测引物是抗螟虫转基因甘蔗的目的基因cry1Ac的特异检测引物F3、B3、FIP和BIP：？引物F3为5“？AGAGAGTGGGAAGCCGAT？？3“；引物B3为5“？CGAATCCCCACCTTTGCC？3“；引物FIP为5“？AGGCGCTGTTCATGTCGTTGACCTACTAACCCAGCTCTCCG？3“；引物BIP为5“？TGTCCGTGTACGTTCAAGCAGCCAAACACGCTAACGTCTCGA？3“；（2）恒...

【技术特征摘要】
1.本发明的一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法，包括甘蔗模板DNA提取、恒温扩增体系的建立和恒温扩增产物的鉴定，其特征在于：
恒温扩增检测引物：所使用的检测引物是抗螟虫转基因甘蔗的目的基因cry1Ac的特异检测引物F3、B3、FIP和BIP： 
引物F3为5'-AGAGAGTGGGAAGCCGAT -3'；
引物B3为5'-CGAATCCCCACCTTTGCC-3'；
引物FIP为5'-AGGCGCTGTTCATGTCGTTGACCTACTAACCCAGCTCTCCG-3'；
引物BIP为5'-TGTCCGTGTACGTTCAAGCAGCCAAACACGCTAACGTCTCGA-3'；
（2）恒温扩增扩增体系的建立：在200 μL离心管中，先加入恒温扩增反应液；所述恒温扩增反应液的组成如下：浓度为...

【专利技术属性】
技术研发人员：许莉萍，郭晋隆，周定港，阙友雄，林庆良，陈如凯，高世武，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：