【技术实现步骤摘要】
专利技术涉及ー种β -甘露聚糖酶耐酸性定点改造的方法，属于分子生物学和基因エ程领域。
技术介绍
β -甘露聚糖酶(β -mannanase EC 3. 2. 1. 78)是一种半纤维素水解酶，以内切方式降解β_1，4糖苷键，降解产物的非还原末端为甘露糖，其作用底物包括葡萄甘露聚糖，半乳甘露聚糖及β_甘露聚糖等，β_甘露聚糖酶的来源非常广泛，包括植物、细菌、真菌、放线菌甚至软体动物。 β -甘露聚糖酶可消除食料中甘露聚糖的抗营养作用，改善饲料的营养价值，以及配合其他的酶(木聚糖酶、蛋白酶)进ー步提高家畜的生产性能；作为ー种典型的饲料用酶，其需要满足饲料生产以及动物消化系统对酶的性质的特殊要求，但由于动物肠道对pH的要求在PH2. 0左右，而本项目前期对纯化到的β -甘露聚糖酶酶学性质分析表明，其最适pH为pH6. 5，在pH4. 0以下迅速失活，故为了使其pH特性适合饲料用酶对pH的特殊要求，在理性分析其三维结构的的基础上，对β_甘露聚糖酶进行耐酸性的定点改造，以图得到符合エ业化需要的产β_甘露聚糖酶重组菌株。
技术实现思路
本专利技术主要研究内容针对来源于枯草芽孢杆...
【技术保护点】
一种β?甘露聚糖酶耐酸性定点改造，其特征是根据β?甘露聚糖酶三级结构分析，通过重叠PCR技术进行定点突变，经过定点改造将第54位的组氨酸突变为天冬氨酸后的β?甘露聚糖酶基因连接至表达载体pMA5上，将连接后的重组质粒转化枯草芽孢杆菌168菌株，成功得到一株重组菌株pMA5?gmuGb54/Bacillus?subtilis?168。
【技术特征摘要】
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