一种大菱鲆C型溶菌酶及其构建和应用制造技术

技术编号:8384144 阅读:232 留言:0更新日期:2013-03-07 01:42
本发明专利技术涉及分子微生物学领域,具体的说是一种大菱鲆C型溶菌酶及其构建和应用。溶菌酶为序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示。具体为:以大菱鲆cDNA为模板PCR扩增溶菌酶基因,将PCR产物与载体pEASY-E2连接,将连接液转化大肠杆菌BL21(DE3),得转化子BL21/pSmLysC,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导后,利用亲和层析柱纯化重组蛋白,即得C型溶菌酶。本发明专利技术的溶菌酶可以有效裂解多种革兰氏阳性菌,因而可以用于防控革兰氏阳性菌相关疾病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子微生物学领域,具体的说是一种大菱鲆C型溶菌酶及其构建和应用
技术介绍
溶菌酶(lysozyme),又称为胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶,它能降解细菌细胞壁中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的P -I, 4糖苷键,从而破坏细胞壁,使得胞内容物释放,由此导致细菌死亡。根据其序列结构特点,溶菌酶可分为六大类,其中C型溶菌酶(C-type lysozyme)在动物中是一种主要类群,广泛存在哺乳动物、鸟类、鱼类等。溶菌酶是一种重要的天然免疫因子,在抗病原感染过程中发挥重要作用,因此在临床上,溶菌 酶用于抗细菌和病毒感染以及消肿止痛等。另外,溶菌酶在食品工业中被用作防腐剂。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种大菱鲆C型溶菌酶及其构建和应用。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案为一种大菱鲆C型溶菌酶,溶菌酶为序列表SEQ ID No. I中的氨基酸序列所示。大菱鲆C型溶菌酶的制备方法,I)菌株 BL21/pSmLysC 的构建以大菱鲆cDNA为模板,用引物Fl和Rl进行PCR扩增,PCR产物纯化后与载体PEASY-E2于室温连接2 — 8小时,连接混合液转化大肠本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大菱鲆C型溶菌酶,其特征在于:溶菌酶为序列表SEQ?I?D?No.1中的氨基酸序列所示。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:孙黎于兰萍
申请(专利权)人:中国科学院海洋研究所
类型:发明
国别省市:

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