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微生物发酵生产低温溶菌酶的方法技术

技术编号:7735023 阅读:274 留言:0更新日期:2012-09-09 14:04
本发明专利技术所述的一种微生物发酵生产低温溶菌酶的方法是将产生溶菌酶的微生物逐级低温驯化,使其在低温环境中生长良好;将低温驯化后的溶菌酶产生菌在10~16℃逐级扩大培养,按发酵液体积的3~9%接种量接入液体发酵培养基中,在10~16℃培养72~144h时,即微生物发酵生产低温溶菌酶结束;发酵液在4,000~8,000rpm离心收集液体,收集的液体即为粗酶液;根据不同需要和使用对象不同,可以将粗酶液进一步浓缩、分离纯化,制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物学、酶工程、发酵工程、生物化学等领域,具体涉及一种低温溶菌酶微生物发酵生产方法。该专利技术生产的低温溶菌酶因具有抗菌,抗病毒,增强免疫力的生物价值而广泛应用于饲料防腐、低温肉制品保鲜、医药领域(特别是治疗五官科的炎症,防止人体因外伤引起的感染)、以及其它溶菌酶应用行业。该专利技术生产的低温溶菌酶,在低温下仍有较高酶活,其应用前景广阔。
技术介绍
溶菌酶(lysozyme,EC 3. 2. I. 17)又称细胞壁溶解酶,是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶。具有对人体无毒、无副作用等特点。溶菌酶作为生物酶制剂,已经广泛应用于饲料防腐、低温肉制品保鲜和医药领域等行业中,商品溶菌酶多由卵清中提取,但从卵清中提取的溶菌酶只对革兰氏阳性菌有抑制效果,对革兰氏阴性菌的抑制效果一般,限制了其使用(丁亦男,长春师范学院学报,2009)。故通过微生物生产对革兰氏阳性和革兰氏阴性都有抑制作用的溶菌酶,会产生良好的应用前景。虽然国内外对微生物发酵生产的溶菌酶的研究很多,但主要是研究中温溶菌酶,有关微生物发酵生产的低温溶菌酶的研究处于初级阶段,主要是菌种选育和产酶条件优化、生长特性、酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微生物发酵生产低温溶菌酶的方法,其包括以下步骤 (1)将产生溶菌酶的微生物逐级低温驯化,驯化温度由高到低,25°C— 22°C— 20°C— 18°C— 16°C— 14°C— 12°C— 10°C,使其在低温环境中生长良好; (2)按常规方法将低温驯化后的溶菌酶产生菌在10 16°C逐级扩大培养,制备成液体一级种子和二级种子; (3)将液体一级种子或二级种子,按发酵液体积的3 9%接种量接入液体发酵培养基中,在10 16°C培养72 144h时,即微生物发酵生产低温溶菌酶结束; (4)将(3)的发酵液在4,000 8,OOOrpm离心收集液体,收集到的液体即为粗酶液; (5)根据不同需要和使用对象不同,还可以将(4)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化,制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。2.根据权利要求I所述的方法,在步骤(5)之后进一步包...

【专利技术属性】
技术研发人员:迟乃玉张庆芳王晓辉窦少华于爽王贵鹏
申请(专利权)人:大连大学
类型:发明
国别省市:

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