一种三聚氰胺衍生物及三聚氰胺单克隆抗体的制备方法和应用技术

技术编号:8364070 阅读:277 留言:0更新日期:2013-02-27 21:56
本发明专利技术公开了一种三聚氰胺衍(Melamine)生物及三聚氰胺单克隆抗体的制备方法和应用,所述三聚氰胺衍生物的制备方法包括以下步骤:a)将三聚氰胺溶解于预热至预定温度的二甲基酰胺中,加入戊二酸酐反应第一预定时间;b)将反应后溶液冷却后加入乙醚,产生沉淀;c)过滤所述沉淀,并将过滤后固体进行重结晶,得到三聚氰胺衍生物。根据本发明专利技术实施例的三聚氰胺衍生物,相对于三聚氰胺多出了一个臂状结构,通过该臂状结构可以与载体蛋白相连接,连接所得抗原免疫原性好,特异性强,可刺激动物产生特异性的抗体,并且效价高,解决了很难单独用三聚氰胺化合物制备出有效抗体的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学合成
,更具体地,本专利技术涉及一种三聚氰胺衍生物及三聚氰胺单克隆抗体的制备方法和应用
技术介绍
三聚氰胺化合物因分子小,结构简单,直接偶联载体蛋白后,不能充分的暴露出小分子的空间结构,不利于淋巴细胞识别该小分子化合物,所以用未经改造的三聚氰胺分子直接偶联载体蛋白的这种抗原制备的抗体效价低,特异性差,无法满足检测试剂盒的研发的需求。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决上述技术问题之一。为此,本专利技术的一个目的在于提出一种与载体蛋白连接后抗体效价高、特异性强的三聚氰胺衍生物。根据本专利技术实施例的三聚氰胺衍生物具有如下分子结构式权利要求1.一种三聚氰胺衍生物,其分子结构式为2.—种三聚氰胺衍生物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤 a)将三聚氰胺溶解于预热至预定温度的二甲基酰胺中,加入戊二酸酐反应第一预定时间; b)将反应后溶液冷却后加入乙醚,产生沉淀; c )过滤所述沉淀,并将过滤后固体进行重结晶,得到三聚氰胺衍生物。3.根据权利要求2所述的三聚氰胺衍生物的制备方法,其特征在于,所述预定温度为40°C 50°C。4.根据权利要求I所述的三聚氰胺衍生物的制备方法,其特征在于,所述第一预定时间为2h。5.根据权利要求I所述的三聚氰胺衍生物在制备三聚氰胺单克隆抗体中的应用。6.一种根据权利要求5所述的三聚氰胺单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤 A)将三聚氰胺衍生物与血蓝蛋白(KLH)通过偶联剂偶联,得到完全抗原; B)将三聚氰胺衍生物与牛血清白蛋白(BSA)通过偶联剂偶联,得到三聚氰胺-蛋白偶联物(二聚氰胺-BSA); C)将所述完全抗原与弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂乳化后免疫试验动物,并在弟四次免疫后的第十天取静脉血测定抗体效价; D)将试验动物的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,分离筛选单克隆抗体细胞株; E)将筛选的稳定的阳性克隆株扩大培养,接种试验动物,制备单克隆抗体腹水; F)将所述抗体腹水分离上清,用ProteinA亲和层析柱分离纯化,得到三聚氰胺单克隆抗体。7.根据权利要求6所述的三聚氰胺单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述偶联剂为碳二亚胺。8.根据权利要求I所述的三聚氰胺衍生物在制备用于检测三聚氰胺的试剂盒中的应用。9.一种检测三聚氰胺的酶联检测试剂盒。全文摘要本专利技术公开了一种三聚氰胺衍(Melamine)生物及三聚氰胺单克隆抗体的制备方法和应用,所述三聚氰胺衍生物的制备方法包括以下步骤a)将三聚氰胺溶解于预热至预定温度的二甲基酰胺中,加入戊二酸酐反应第一预定时间;b)将反应后溶液冷却后加入乙醚,产生沉淀;c)过滤所述沉淀,并将过滤后固体进行重结晶,得到三聚氰胺衍生物。根据本专利技术实施例的三聚氰胺衍生物,相对于三聚氰胺多出了一个臂状结构,通过该臂状结构可以与载体蛋白相连接,连接所得抗原免疫原性好,特异性强,可刺激动物产生特异性的抗体,并且效价高,解决了很难单独用三聚氰胺化合物制备出有效抗体的问题。文档编号C07K16/44GK102942531SQ20121043882公开日2013年2月27日 申请日期2012年11月6日 优先权日2012年11月6日专利技术者邬晓乐, 姬志娟, 邬江, 史国营, 张俊龙, 张春玲, 薛金莲 申请人:北京博奥森生物技术有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种三聚氰胺衍生物,其分子结构式为:FDA00002361492400011.jpg

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:邬晓乐姬志娟邬江史国营张俊龙张春玲薛金莲
申请(专利权)人:北京博奥森生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1