一种苯环己哌啶单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种苯环己哌啶(Phencyclidine，简称PCP)单克隆抗体的制备方法，该抗体是采用PCP与牛甲状腺球蛋白(BTG)共价连接的偶联蛋白PCP-BTG为免疫原，免疫Balb/c小鼠，取其脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合，筛选得到1株稳定分泌PCP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本发明专利技术所得单克隆抗体能特异性识别PCP分子，可用于PCP的特异性检测，特异性高，反应灵敏，实验成本低，适合高通量快速检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属免疫学
，特别是一种苯环己哌啶单克隆抗体的制备方法，所得单克隆抗体可应用于免疫胶体金法检测苯环已哌啶。
技术介绍
苯环己哌啶(Phencyclidine,PCP)，是毒品中的一种,俗称天使毒品、霸王毒品。PCP原是一种兽用镇静剂，但它被人体吸收时，会产生严重和长期的行为问题，如智力迟钝、知觉错误、偏执狂、精神病、敌对心理和暴力行为等。苯环己哌啶首次合成于1957年，由于他所具有的精神和迷幻效应，1965美国法律禁止苯环己哌啶用于人类，只限于兽医领域，用于麻醉动物。之后，由于它具有明显的副作用，苯环己哌啶甚至也不再用于兽医领域。现在多出现在娱乐场所，服用方式为口服。毒品问题一直是危及全球的严重社会问题。在强力打击贩卖毒品者的同时，现场快速检测毒品也是迫切需要解决的问题。利用毒品和毒品代谢物的抗体来检测吸毒者尿液中的抗原物质(毒品和毒品代谢物)是毒品检测中较为常用的免疫检测方法，其中免疫层析胶体金技术是目前新兴的，可方便快速准确地检测毒品的方法。而应本文档来自技高网...

【技术保护点】
PCP单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)用外购抗原(PCP‑BTG)免疫Balb/c小鼠，多次免疫小鼠眼球采血测定血清效价后，取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合，并用HAT筛选得到稳定的杂交瘤细胞株；(2)用ELISA法筛选阳性细胞株，克隆得到稳定的杂交瘤细胞株；(3)将杂交瘤细胞株注射到液体石蜡预处理的F1小鼠腹腔，隔周取腹水，3.3％辛酸沉淀和50％饱和硫酸铵沉淀法纯化单抗，得到单克隆抗体。

【技术特征摘要】
1.PCP单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用外购抗原(PCP-BTG)免疫Balb/c小鼠，多次免疫小鼠眼球采血测定血
清效价后，取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合，并用HAT筛选得到稳定
的杂交瘤细胞株；
(2)用ELISA法筛选阳性细胞株，克隆得到稳定的杂交瘤细胞株；
(3)将杂交瘤细胞株注射到液体石蜡预处理的F1小鼠腹腔，隔周取腹水，3.3％
辛酸沉淀和50％饱和硫酸铵沉淀法纯化单抗，得到单克隆抗体。
2.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：戈东平，郭强强，陆启明，
申请(专利权)人：艾博生物医药杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33