Epstein-Barr病毒的多重荧光定量PCR检测试剂盒及在鼻咽癌筛查中的应用制造技术

本发明专利技术涉及EBV病毒的多重荧光定量PCR检测试剂盒，所述的试剂盒含有以下试剂：a、扩增Epstein-Barr病毒关键靶基因突变的特异性引物对；和b、Epstein-Barr病毒关键靶基因突变的特异性探针，所述的基因突变为EBNA-1基因编码区的P-thr、V-val和V-leu，EBNA-1基因启动子Cp、Fp和Zp，和LMP1基因XhoI-loss、30bpDeletion和Ser366Thr。本发明专利技术优点在于：能够达到准确预测高危人群鼻咽癌发病风险的目的；掌握高危人群体内的主要致癌突变，将鼻咽癌的人群筛查和人群干预结合起来；具有高灵敏度，操作快速，成本较低的优点，具有广阔的市场。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测试剂盒及其应用，具体地说,是ー种Epstein-Barr病毒的多重荧光定量PCR检测试剂盒及在鼻咽癌筛查中的应用。
技术介绍
鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma, NPC)是一种在我国南方和东南亚地区常见的恶性肿瘤，其进展性发展，稍晚常发生转移和扩散。目前鼻咽癌主要依靠放射性治疗，中晚期肿瘤病人的预后仍然很差，I期患者放疗后5年生存率可达90%，IV期患者5年生存率 仅30%，因此早期发现是提高治愈率的关键。对鼻咽癌高危人群进行血清学筛查是发现早期鼻咽癌的重要途径。Epstein-Barr病毒(EBV)是鼻咽癌(NPC)发病最重要的环境危险因素。虽然EBV流行遍布全世界，但是NPC只在华南及东南亚高发。这主要是因为EBV —些重要癌基因(如EBNAU LMPl等)发生了突变，且突变的病毒株获得了优势扩増。作为NPC筛查的标本常为血液和鼻分泌物，现有最常用技术方法为采用ELISA法检测EBV的VCA、EBNA及EA等抗原。这些现有技术的缺陷主要有两点I) ELISA法只能检测病毒含量，但不知EBV在体内的变异情况，因为不是所有EBV病毒株在本文档来自技高网...

【技术保护点】
Epstein？Barr病毒的多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有以下试剂：a、扩增Epstein？Barr病毒关键靶基因突变的特异性引物对；和b、Epstein？Barr病毒关键靶基因突变的特异性探针，所述的基因突变为EBNA？1基因编码区的P？thr、V？val和V？leu，EBNA？1基因启动子Cp、Fp和Zp，和LMP1基因XhoI？loss、30bp？Deletion和Ser366Thr；c、不同浓度的Epstein？Barr病毒基因突变标准品系列；d、用于荧光定量PCR反应的PCR反应液（包含ROX荧光、dNTP、DNA聚合酶及其缓冲液）。

【技术特征摘要】
1.Epstein-Barr病毒的多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有以下试剂 a、扩增Epstein-Barr病毒关键靶基因突变的特异性引物对；和 b、Epstein-Barr病毒关键靶基因突变的特异性探针，所述的基因突变为EBNA-I基因编码区的 P-thr、V-val 和 V_leu，EBNA-I 基因启动子 Cp、Fp 和 ZpJP LMPl 基因 Xhol-loss、30bp Deletion 和 Ser366Thr ； C、不同浓度的Epstein-Barr病毒基因突变标准品系列； d、用于荧光定量PCR反应的PCR反应液(包含ROX荧光、dNTP、DNA聚合酶及其缓冲液)。2.根据权利要求I所述的试剂盒，其特征在于，所述的扩增Epstein-Barr病毒关键革巴基因突变的特异性引物对为 a、EBNA-I基因编码区SEQ ID NO. 10 和 SEQ ID NO. 11 ； b、EBNA-I基因启动子SEQ ID NO. 15 和 SEQ ID NO. 16 ；c、LMPl基因 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘斌，
申请(专利权)人：广州市第十二人民医院，
类型：发明
国别省市：