一种基于单一标准品的四色荧光定量PCR方法和试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种基于单一标准品的四重四色的荧光定量PCR技术，通过一步法四重光PCR扩增检测各类处理后标本中的A组轮状病毒（HRVA）、诺如病毒Ⅰ群（NVGⅠ）、诺如病毒Ⅱ群（NVGⅡ）和人星状病毒（HAstV）RNA，并对病毒负荷进行定量。本发明专利技术的创新之处在于针对四种病毒的四重四色荧光定量PCR检测采用单一标准品作为阳性对照和定量标准，突破了传统多重荧光定量PCR需要制备多个标准品的不足，提高了实验检测的效率，降低了污染的机会，同时提高了试剂盒制备和生产的效率。可用于引起腹泻症候群的A组轮状病毒、诺如病毒和星状病毒的实验室快速高通量检测和疫情监控。本发明专利技术属于生物技术领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒核酸检测，属于生物
本专利技术采用基于单一标准品的四重四色的荧光定量PCR技术，通过一步法PCR扩增检测各类处理后标本中A组轮状病毒(HRVA)、诺如病毒I群(NVG I )、诺如病毒II群(NVG II)和人星状病毒(HAstV) RNA，用于引起腹泻症候群的轮状病毒、诺如病毒I群、诺如病毒II群和人星状病毒的实验室快速检测和疫情监控。本专利技术对引物和探针的设计以及实验的实施也提出了更高的要求。
技术介绍
WHO估计全世界每年腹泻病例高达30-50亿例次，有50-100万病例因严重腹泻死亡，平均每天死亡2.5万人，特别在儿童更为突出。临床上小儿各种急性胃肠炎比较常见，可以引起患者呕吐、腹痛、腹泻等症状，是一种急性传染病，一般起病较急，可有发热及全身不适症状。引起急性腹泻的病原很多，可以包括细菌病毒或者其他微生物。自1972年发现诺瓦克病毒后，已相继发现和确立了多种引起腹泻的病毒并能在腹泻患者大便中直接检出病毒。目前研究较多的是各种致病性病毒包括轮状病毒(Rotavirus，RV)、诺如病毒(Norovirus, NV)、人星状病毒(Human Astr本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术的基于单一标准品的四重四色的荧光定量PCR技术，其特征在于采用单一的标准品作为实验的阳性对照和定量标准通过一步法PCR扩增检测各类处理后标本中A组轮状病毒（HRVA）、诺如病毒Ⅰ群（NVGⅠ）、诺如病毒Ⅱ群（NVGⅡ）和人星状病毒（HAstV）RNA，用于引起腹泻症候群的常见的A轮状病毒、诺如病毒Ⅰ群、诺如病毒Ⅱ群和人星状病毒的实验室快速高通量检测和疫情监控。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘健翊，周孟，陈瑶，王宝玉，廖杰，叶奕东，黄佳柳，莫海月，徐德峰，黄常艳，徐贵云，
申请(专利权)人：广州维伯鑫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：