一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒及检测方法，其中该方法包括：植物病毒总RNA的提取，RT-LAMP反应和电泳检测或荧光染料检测，确定植物是否带病。本发明专利技术根据CGMMV的外壳蛋白基因保守区域设计了RT-LAMP引物，采用RT-LAMP技术建立了一种快速、灵敏、高度特异性的检测黄瓜、西瓜和葫芦等葫芦科植物植株上CGMMV的检测技术及其在病害诊断上的应用方法。本发明专利技术可以利用快速抽提RNA和常规RNA抽提作为RNA模板用于RT-LAMP实验。利用这一方法可以快速鉴定出黄瓜绿斑驳花叶病毒植株样本，进而采取针对性的检疫性保护措施，减少病害带来的损失。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农业科学
，涉及西瓜、黄瓜和葫芦等葫芦科植物上黄瓜绿斑驳花叶病毒的快速检测技术及其在病害诊断上的应用，具体涉及一种黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumbergreen mottle mosaic virus, CGMMV)属番爺丛矮病毒科(Tombusviridae)、烟草花叶病毒属(Tobamovirus)成员。该病严重为害葫芦科作物，为我国的检疫性有害生物。黄瓜绿斑驳花叶病毒苗期染病幼苗顶尖部的2 3片叶子现亮绿或暗绿色斑驳，叶片较平，产生暗绿色斑驳的病部隆起，新叶浓绿，后期叶脉透化，叶片变小，引起植株矮化，叶片斑驳扭曲，呈系统性传染。瓜条染病现浓绿色花斑，有的也产生瘤状物，致果实成为畸形瓜，影响商品价值，严重的减产25%左右。自然界主要侵染甜瓜、西瓜、黄瓜、南瓜及瓠瓜等多种葫芦科作物，通过种子和土壤传播，此外也可通过汁液，农事操作及叶片接触等方式进行传播。带毒种子传播是该病毒远距离传播的主要途径。该病自1935年被发现以来，曾先后在英国、德国、丹麦、荷兰、俄罗斯、印度、日本、韩国以及我国台湾本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测的RT?LAMP引物组，其特征在于所述的RT?LAMP引物组包含一对外引物和一对内引物，所述外引物对F3、B3的序列分别为SEQ?ID?No.1和SEQ?ID?No.2所示，所述内引物对FIP、BIP的序列分别为SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陶小荣，李靖玉，卫其巍，张雯娜，吴鉴艳，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：