GeXP多重基因表达遗传分析系统在16种常见呼吸道病毒分型检测中的应用技术方案

本发明专利技术属于生物技术应用领域，涉及各级疾病预防控制机构、哨点医院等用于呼吸道相关疾病患者鼻咽抽提物标本的16种呼吸道病毒(包括FluA、FluB、sH1N1、PIV1、PIV2、PIV3、RSVA、RSVB、HRV、HMPV、HBoV、CoV?NL63、CoV?OC43、CoV?229E、CoV?HKU1和Adv)感染的同时检测和分型。具体在NCBI下载16种呼吸道病毒代表株的核苷酸序列，通过查阅文献和多序列比对，确定病原体相对保守区，设计多重特异性引物。进行单管多重(18重)PCR检测16种呼吸道病毒保守区，整个反应不到2个小时。本专利既克服了常规单管多重荧光定性PCR检测不能分型的缺点，也克服了常规芯片检测方法的操作繁琐，时间较长，成本较高等缺点，为呼吸道病毒分型技术提供了新的思路，其高特异性、高灵敏度、快速的特点为呼吸道疾病相关病毒的快速准确筛查和分型提供了有力的技术支撑，对研究我国呼吸道病患者感染病原谱和分子流行病学调查有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术应用领域，涉及各级疾病预防控制机构，哨点医院等用于呼吸道相关疾病患者鼻咽抽提物标本的16种呼吸道病毒(包括FluA、FluB、sHlNl、PIVUPIV2、PIV3、RSVA、RSVB、HRV、HMPV、HBoV、CoV NL63、Co V 0C43、CoV 229E、CoV HKUl和 Adv)感染的同时检测和分型。具体在NCBI下载16种呼吸道病毒代表株的核苷酸序列，通过查阅文献和多序列比对，确定病原体相对保守区，设计多重特异性引物。进行单管多重(18重)PCR检测16种呼吸道病毒保守区，整个反应不到2个小时。本专利克服了病毒培养法、直接荧光抗体法、芯片检测方法的操作繁琐，时间较长，成本较高等缺点，为呼吸道病毒分型技术提供了新的思路，其高特异性、高灵敏度、快速的特点为呼吸道疾病相关病毒的快速准确筛查和分型提供了有力的技术支撑，对研究我国呼吸道病患者感染病原谱和分子流行病学调查有重要意义。
技术介绍
急性呼吸道感染是广泛分布于成年人和儿童的感染性疾病之一，具有相当高的发病率和死亡率。大部分急性上呼吸道疾病和下呼吸道疾病主要是由呼吸道病毒引起的。传统认为，引起本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种单管18重PCR同时检测16种呼吸道病毒，包括：用于检测呼吸道病毒FluA、FluB、PIV1、PIV2、PIV3、RSVA、RSVB、HRV、HMPV、HBoV、CoV？NL63、CoV？OC43、CoV？229E、CoV？HKU1、Adv的型特异性引物和检测sH1N1的亚型特异性引物，另外包括一对扩增人类RNase？P基因的引物检验人源样品质量。

【技术特征摘要】
1.一种单管18重PCR同时检测16种呼吸道病毒，包括用于检测呼吸道病毒FluA、FluB、PIVl、PIV2、PIV3、RSVA、RSVB、HRV、HMPV、HBoV、CoV NL63、CoV 0C43、CoV 229E、CoVHKUU Adv的型特异性引物和检测sHlNl的亚型特异性引物，另外包括一对扩增人类RNaseP基因的引物检验人源样品质量。2.双管多重(10重和9重)PCR同时检测16种呼吸道病毒，体系A包括FluA、FluB、sHlNl、PIVl、HRV、CoV 0C43、CoV 229E、CoV HKUl、Adv 和 RNase P 引物，体系 B 包含 PIV2、PIV3、RSVA, RSVB, CoVNL63、HMPV, HBoV 和 RNase P 引物，用 QIAxcel 全自动电泳仪检测。3.权利要求I所述的18重PCR技术的引物和通用引物包括核酸序列表所列的基因序列及其每种序列的互补序列或变体。4.权利要求I所述的18重PCR检测技术包括呼吸道疾病相关病毒FluA、FluB、PIVl、PIV2、PIV3、RSVA、RSVB、HR...

【专利技术属性】
技术研发人员：马学军，李瑾，毛乃颖，许文波，谭文杰，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：