刺激干细胞的药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及刺激干细胞的人用或兽用药物组合物(B)，包含至少两种干细胞刺激剂和至少一种药学上可接受的赋形剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术大体涉及靶向组织和/或器官的药物组合物。特别地，其涉及通过对需要心脏组织再生的个体的心脏施用干细胞刺激剂的心脏疾病治疗。特别地，其公开了使用这种干细胞刺激剂，改善来自活体内心脏干细胞的心脏组织的再生。
技术介绍
心肌梗死(Ml)导致心肌细胞受损，瘢痕形成，心室重构，最终心力衰竭。药物的、导管的和外科的专利技术已经改善了冠状动脉疾病(CAD)患者的生存，但是他们不能使死亡的心肌再生。因此，由于缺血性心力衰竭，增加的发病率伴随着降低的死亡率。在近几年里，干细胞治疗在心脏治疗修复方面作为具有潜力的策略出现(Dimmeler S.等，J Clin Invest2005，11,572-583)。修复损伤心肌的最佳细胞来源是项深入研究的课题。用于心脏再生的干细胞的重要特征包括自我更新，集落生成，以及分化成心肌细胞、内皮细胞和促血管平滑肌细胞的能力。过去10年以来，在动物研究中，研究者曾经将多种骨髓(BM)-衍生的干/祖细胞应用于心脏修复治疗，例如谱系标记物阴性(lineage negative, Iin neg)c_kit阳性(c_kit pos)BM 干细胞(Orlic 等，Nature 2001 ；410 :701-705 ；Kajstura 等，Circ.Res. 2005 ;96 :127-137 ;Rota 等，Proc Natl Acad Sci USA 2007;104:17783-17788)，BM-衍生的骨髓间充质干细胞(MSCs) (Min 等，Ann Thor Surg 2002 ；74 :1568-1575 ；Amado等，Proc Natl Acad Sci USA 2005 ；102 :11474-11479)和内皮祖细胞(EPCs) (Cho 等，JExp Med 2007 ；204 :3257-3269 ;Schuh 等，Basic Res Cardiol 2008 ；103 :60-77)。尽管这些研究显示BM-衍生的干/祖细胞分化成具有心肌细胞和血管细胞主要特征的细胞，其它研究表明移植BM干细胞在受损心脏中不容易获得心肌表型(Balsam等，Nature 2004 ；428 668-673 ；Murry 等，Nature 2004 ；428 :664-668 ；Nygren 等，Nat Med 2004 ；10 :494-501)。因此，移植BM-衍生干/祖细胞之后，增强他们的分化存在巨大挑战，以使研究者在心脏再生治疗中有效利用这些细胞。其它干细胞来源可以用于心脏再生治疗，除了BM-衍生干/祖细胞之外。特别地，在心脏本身中找到了原位心脏干细胞(CSCs) (Beltrami等，Cell 2003 ;114 :763-776 ;Uranek 等，Proc Natl Sci USA2006 ; 103 :9226-923 1)。因为CSCs已经存在于心脏内部并且被计划形成心脏组织，当大规模心脏组织受损发生时，它们代表了在心脏再生治疗中利用的逻辑来源。假设CSCs具有独一无二的特征，那么识别原位CSCs产生极大的兴奋，引发了强烈的愿望使用来自心脏本身的细胞进行心肌再生，从而固有的计划形成以重构心脏组织。心脏修复要求形成新的肌肉细胞和冠状血管，它不能通过已经致力于肌肉细胞谱系的细胞完成。在梗死的情况下，单一肌肉细胞的形成不能在运动不能区中恢复收缩性能；肌肉细胞在血管没有形成的情况下不能生长或者生存。小动脉对于血液供应是重要的，氧的运输被毛细血管网控制。相似地，单独的血管新生在心室壁的梗死部分不能恢复死亡心肌细胞，也不能重新建立收缩活性。观察结果局部注入到动物梗死心肌的CSCs修复了坏死组织并改善心室功能(Beltrami 等，Cell 2003 ；114 :763-776 ；Bearzi 等，Proc NatlSci USA 2007 ；104 =14068-14073);这一结果构成了新的范例基础，其中CSCs与肌肉细胞、内皮细胞、平滑肌细胞和纤维组织母细胞的正常更新有关。为了开发病人未来的治疗相关策略，提出了新的假说，以引领技术发展方向，其详细说明了 CSCs在个体基础上的临床治疗。已经做出了许多努力，为了处理已经发现的CSCs使之应用于临床。第一种方法是分离、培养、克隆和扩大CSCs。这种细胞被注入回到梗死心脏，以再生功能心肌。尽管如此，所述CSC细胞种群的缺乏，以及严格的细胞培养条件和贫乏的产量，是使用这种方法的限制性因素。在现有技术中描述的另一种可选的方法是使用外源试剂使内生CSCs补充和分化。尽管如此，据描述，没有明显的证据表明这种方法的有效性，这使得在活体内有效补充和使CSCs分化具有不确定性。专利技术概述 本专利技术提供了完全新颖的方法，刺激活体内原位CSCs，以及在另一方面中，使他们致力于分化成心脏谱系，特别地是从他们中获得显著数量的充足的功能细胞(其具有心肌细胞的主要特征)。本专利技术涉及刺激干细胞的人用或兽用药物组合物(B)，其包含至少两种干细胞刺激剂和至少一种药学上可接受的赋形剂。所述至少两种干细胞刺激剂可以选自TGFP -I、BMP-4、FGF-2、IGF-1、活化素A、α -凝血酶、心肌营养蛋白UCardiogenol C及其混合物。特别地,所述至少两种干细胞刺激剂选自=TGF^-U BMP-4、FGF-2、IGF-1、活化素Α、心肌营养蛋白I、Cardiogenol C及其混合物.本专利技术涉及药物混合物，其包含根据本专利技术的药物组合物(B)、和包含至少一种药学活性物质组合物(A)。本专利技术的组合物或混合物允许提供刺激剂指导的干细胞(其意味着在被放入后所述原位心脏干细胞与所述组合物或者混合物接触)，被刺激进入分化阶段。因此，所述刺激的干细胞可以专注分化成心脏谱系并成为心肌细胞。在本文件框架内，除非有另外的指明，引用之间的下文的术语具有下述的定义。如本文使用的，所述术语“刺激”(stimulation或者stimulating)是指干细胞的补充、增殖、生存和/或分化。如本文使用的，所述术语“心脏组织”和“心肌”是指肌肉细胞、血管和成纤维细胞。“心脏干细胞(CSCs) ”、“心脏祖细胞”、“原位心脏干细胞”或者“原位心脏祖细胞”指出了这些干细胞存在于心肌中。它们是自我更新的、克隆源性的、多潜能的，并且可以形成心肌。“干细胞刺激剂”是改进干细胞能力的试剂，使其招募补充道所述位点进行再生、增殖和分化成心脏组织。“干细胞刺激剂组合物“是包含至少两种干细胞刺激剂的组合物。“刺激剂指导的干细胞”是干细胞，其与上文定义的干细胞刺激剂组合物接触，并进一步进入分化阶段(即专注于成为心脏谱系)。所述“分化”是过程，通过其较少的特异性细胞成为更多的特异性细胞。除非另有说明，本文使用的所有的技术和科学术语具有与本专利技术从属的本领域技术人员的普通理解相同的意思。尽管与本文描述相似或者相等的方法和材料可以使用以实施本专利技术，合适的方法和材料在下文中描述。所有的出版物、专利申请、专利和其它本文提及的参考资料以参考的方式并入本文。假设有冲突，本专利技术说明书，包括定义，将控制本专利技术术语的意思。另外，所述材料、方法和实施例只是解释性的，不作为限制。专利技术详述在优选的实施方案中，所述药物组合物⑶可以包本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.12.02 EP PCT/EP2009/0662511.刺激干细胞的人用或兽用药物组合物(B)，包含至少两种干细胞刺激剂和至少一种药学上可接受的赋形剂。2.根据权利要求I所述的药物组合物，其中所述至少两种干细胞刺激剂选自TGFP -I、BMP-4、FGF-2、IGF-1、活化素A、心肌营养蛋白I、Cardiogenol C及其混合物。3.根据权利要求2所述的药物组合物，其中所述干细胞刺激剂是TGFP-I、BMP-4、FGF-2、IGF-1、活化素A、心肌营养蛋白I和Cardiogenol C。4.根据任意一项前述的权利要求所述的药物组合物，其中所述组合物进一步包含凝血酶抑制体，其选自水蛭素、比伐卢定、来匹卢定、地西卢定、阿加曲班、美拉加群、希美加群、达比加群和肝素。5.根据任意一项前述的权利要求所述的药物组合物，其进一步包含至少一种物质选自生长因子、细胞因子、激素及其组合。6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中所述至少一种物质选自 -骨形成蛋白(BMP)，例如 BMP-I、BMP-2、BMP-5、BMP-6 ； -表皮生长因子(EGF)； -促红细胞生成素(EPO)； -成纤维细胞生长因子(FGF)，例如 FGF-1、FGF-4、FGF-5、FGF-12, FGF-13, FGF-15,FGF-20 ； -粒细胞集落刺激因子(G-CSF)； -粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)； -生长分化因子-9 (⑶F-9)； -肝细胞生长因子(HGF)； -胰岛素样生长因子(IGF)，例如IGF-2 ； -肌肉生长抑制素(⑶F-8)； -神经营养蛋白，例如NT-3、NT-4、NT-1和神经生长因子(NGF)； -血小板衍生生长因子(PDGF)，例如PDGF- ^、PDGF-AA, PDGF-BB ； -促血小板生成素(TPO)； -TGF-(转化生长因子a) -转化生长因子 P (TGF- P )，例如 TGF- P I、TGF- ^ 2、TGF- ^ 3 ； -VEGF (血管内皮生长因子)，例如VEGF-A、VEGF-C ； -TNF-a、白血病抑制因子(LIF)、白细胞介素6 (IL-6)、维生素A酸、C SDF-I (基质细胞衍生因子-I)、BDNF(脑衍生神经营养因子)、骨母细胞特异性因子_2、血管紧张素II、Flt3配体、胶质细胞衍生的神经营养因子、胰岛素样生长因子结合蛋白-3、胰岛素样生长因子结合蛋白-5、白细胞介素_3、白细胞介素_8、中期因子、黄体酮、腐胺、干细胞因子、TGF- a、Wntl> Wnt3a、Wnt5a、胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶_4、趋化因子配体I、趋化因子配体2、趋化因子配体5、趋化因子配体7、趋化因子配体11、趋化因子配体20、结合珠蛋白、植物凝血素、胆固醇25-羟化酶、突触融合蛋白-8、突触融合蛋白-11、血浆铜蓝蛋白、补体成分I、补体成分3、整联蛋白a 6、溶酶体酸脂酶I、0-2微球蛋白、泛素、巨噬细胞移动抑制因子、丝切蛋白、亲环素A、FKBP12、NDPK、肌动蛋白抑制蛋白I、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、钙周边蛋白、斯钙素-I、PGE-2、mpCCL2、IDO、iNOS、HLA-G5、M-CSF、血管生成素、PIGF,MCP-I、细胞外基质分子、CCL2 (MCP-I)、CCL3 (MIP-1 a )、CCL4 (MIP-1 P )、CCL5 (RANTES)、CCL7(MCP-3)、CCL20 (MIP-3 a )、CCL26 (嗜酸细胞活化趋化因子-3)、CX3CL1 (不规则趋化因子)、CXCL5 (ENA-78)、CXCLl I (i-TAC)、CXCLl (GRO a )、CXCL2 (GRO ^ )、CXCL8...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·戈登贝瑞斯福特，V·高森，J·P·莱特尔德瓦尼萨，C·霍姆西，
申请(专利权)人：卡迪欧参生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：