北虫草菌种的培育方法技术

本发明专利技术涉及一种北虫草菌种的培育方法，该方法包括用酒精浸泡鲜北虫草子实体，然后用无菌水清洗干净后切除子实体外层，再将去除外层的子实体中白色组织放入培养基中培养11－15天，白色组织中长出白色绒毛状菌丝作为菌种。该培育方法采用合适的酒精含量对子实体杀菌，且选择子实体中白色组织作为培养菌种基料，所培养出的菌种不易产生变异，且因没有杂菌污染，致使培养出的菌种成活率非常高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
北虫草又名蛹虫草、北冬虫夏草。由于北虫草内含有较高的虫草素和虫草多糖， 以及虫草酸等活性成份，是ー种具有神奇药用与滋补功效为一体的珍贵药材，所以，北虫草现已在世界上得到逐步普及，其市场潜カ不可估量。但，由于北虫草是人工培育的植物，其内活性成份含量的高低主要取决于菌种的优劣，而菌种的优劣来源于培养基的配比是否合理，选择菌种的方式和培养菌种的时间等因素。在现有技术中，培育北虫草菌种有多种方式，如中国专利1309823C号授权公告的名称为“提高蛹虫草优良菌种筛选效率和繁殖稳定性的生产方法”给出ー种培育北虫草菌种的方式。该专利对子实体不先采用消毒，只是先选择子实体上部体积较大的部位，然后切除该子实体上部的外层，再取子实体内部组织放入培养基中，选择菌株作为菌种。虽然该种方式可以培养出北虫草菌种，但由于北虫草子实体并不是怕感染細菌的物料，通常不将其放置在无菌的环境中，如果子实体表面有可感染菌种的細菌，在切除其外层时很容易使子实体的内部组织受到細菌感染，不仅会大大降低生产菌种的效率，而且还会使培养出的菌种因受到細菌感染而退化；同吋，从选择子实体内部组织的部位来看，经实践证明，子实体中白色的内部组织能够培养出更加优良的菌种，如果采用子实体上部膨大部位，因膨大部位是子嚢果，用此部位培养菌种易变异。现有技术中也有对子实体先消毒，再取子实体内部组织的技木，对子实体消毒主要采用汞进行消毒，虽然采用汞可以杀菌，其杀菌效果也相对较好，但由于汞对人体有害， 同时对生态环境也会带来多方面危害，所以，该种消毒方式不适合于被广泛地应。
技术实现思路
本专利技术的任务是提供ー种利用酒精杀菌和取合适子实体内部组织的方式解决北虫草质量问题的。本专利技术所提出的，包括以下步骤取鲜北虫草子实体放入含量为72 — 78%的酒精中浸泡3 5分钟进行杀菌，然后用无菌水清洗干净后切除子实体外层，再将去除外层的子实体中白色组织放入培养基中培养11 一 15天，白色组织中长出白色绒毛状菌丝作为菌种。酒精含量如果小于72%，其杀菌效果不理想，酒精含量如果大于 78%,易使子实体的内部组织受到损害。所述培养基是由以下质量百分比的物料构成马铃薯70 — 85%，葡萄糖5 — 12%， 磷酸ニ氢钾1 一洲，硫酸镁0.5 — 1%，琼脂5 — 12%，蛋白胨3 — 6%。由于培养基中的马铃薯和葡萄糖是为菌丝生长提供能量的物料，且主要是为其提供碳原，所以，马铃薯的含量不低于70%，葡萄糖不能低于5%，最佳选择是马铃薯的质量含量为78 一 79%，葡萄糖为8 一 9. 5% ； 磷酸ニ氢钾是用于调节PH值的物料，可以将培养基往中性调整，最佳选择是1. 1 一 2% ；硫酸镁是ー种无机盐，可以平衡細胞膜内外压力，如果细胞外离子浓度大，細胞易失水导致细胞死亡，培养失败，如果细胞外离子浓度小，細胞吸水膨胀，会导致因細胞膜破裂而死亡，所以，硫酸镁最佳质量含量不应该超过1%，但也不应小于0. 5%，最佳含量为0. 6 — 0. 8% ；琼脂可以起到让培养基定型的作用，其最佳质量含量应该在7 — 8% ；蛋白胨可为培养基提供氮原，为菌种提供生长所必须的成份，其最佳质量含量应该在4 一 5% ；由上述物料构成的培养基，在培养菌种吋，向构成培养基物料中加入是质量培养基5 — 7倍的水作为液体培养基。本专利技术所提出的采用合适的酒精含量对子实体杀菌，而酒精是无毒液体，且杀菌的效果也非常理想，操作也非常简单，再加上选择子实体中白色组织作为培养菌种基料(该白色组织是长在子实体的中部区域)，取该部位的白色组织培养出的菌种不易产生变异，且因没有杂菌污染，致使培养出的菌种成活率非常高，经实践证明，菌种成活率在97 — 98%，比现有技术培养菌种的成活率高出30 — 40%。具体实施例方式实施例1取鲜北虫草子实体放入酒精中浸泡5分钟进行杀菌，该酒精的含量为72%，将酒精浸泡后的子实体取出用无菌水清洗干净后切除子实体外层，然后将外层内的子实体中白色组织成块取出，将每ー块白色组织放入培养基中培养11天，当白色组织中长出白色绒毛状菌丝作为菌种，白色组织长出白色绒毛状菌丝见光后有浅黄色色素产生为最佳菌种。制取培养基取马铃薯70Kg，葡萄糖Hg，磷酸ニ氢钾Ig，硫酸镁lKg，琼脂 Hg，蛋白胨Ig，将所有物料放入容器中后，再向容器内加入500Kg水，将其搅拌均勻后即为北虫草培养基。实施例2按照实施例1的方法制作菌种和培养基，与实施例1所不同的是将子实体放入酒精中浸泡3分钟，该酒精的含量为78%，白色组织放入培养基中培养15天。培养基中马铃薯 85Kg，葡萄糖^(g，磷酸ニ氢钾lKg，硫酸镁0. ^(g，琼脂^(g，蛋白胨3. 5Kg,再向容器内加入 700Kg 水。实施例3按照实施例1的方法培养菌种和制作培养基，与实施例1所不同的是将子实体放入酒精中浸泡3. 5分钟，该酒精的含量为75%，白色组织放入培养基中培养14天。培养基中马铃薯78. Ig，葡萄糖8Kg，磷酸ニ氢钾1. lKg，硫酸镁0.6Kg，琼脂8Kg，蛋白胨4Kg，再向容器内加入600Kg水。实施例4按照实施例1的方法培养菌种和制作培养基，与实施例1所不同的是将子实体放入酒精中浸泡4分钟，该酒精的含量为75%，白色组织放入培养基中培养13天。培养基中马铃薯 78Kg,葡萄糖8. 5Kg,磷酸ニ氢钾1. 7Kg，硫酸镁0. 8Kg，琼脂7Kg，蛋白胨4Kg，再向容器内加入650Kg水。权利要求1.，其特征在于包括以下步骤取鲜北虫草子实体放入含量为72 — 78%的酒精中浸泡3 5分钟进行杀菌，然后用无菌水清洗干净后切除子实体外层，再将去除外层的子实体中白色组织放入培养基中培养 11 一 15天，白色组织中长出白色绒毛状菌丝作为菌种。2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于所述培养基是由以下质量百分比的物料构成马铃薯70 — 85%，葡萄糖5 — 12%，磷酸ニ氢钾1 一 2%，硫酸镁0. 5 一 1%，琼脂 5 一 12%，蛋白胨 3 一 6%ο3.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于所述浸泡北虫草子实体的酒精含量为 75%。4.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于所述白色组织长出白色绒毛状菌丝并有浅黄色色素产生后将其作为菌种。全文摘要本专利技术涉及一种，该方法包括用酒精浸泡鲜北虫草子实体，然后用无菌水清洗干净后切除子实体外层，再将去除外层的子实体中白色组织放入培养基中培养11－15天，白色组织中长出白色绒毛状菌丝作为菌种。该培育方法采用合适的酒精含量对子实体杀菌，且选择子实体中白色组织作为培养菌种基料，所培养出的菌种不易产生变异，且因没有杂菌污染，致使培养出的菌种成活率非常高。文档编号A01G1/04GK102550290SQ20121001366公开日2012年7月11日 申请日期2012年1月17日 优先权日2012年1月17日专利技术者刘明辉, 孙红霞, 李洪波, 李福全 申请人:辽宁仙榆湾北冬虫夏草(集团)有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李福全，刘明辉，李洪波，孙红霞，
申请(专利权)人：辽宁仙榆湾北冬虫夏草集团有限公司，
类型：发明
国别省市：