一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种抗肿瘤药物及其佐剂的制备方法，其特征是：采用健康的鸡胚接种新城疫病毒，经过培养，收获NDV尿囊液，通过超滤浓缩、纯化之后加入佐剂，成为一种抗肿瘤药物，其抗肿瘤效果有显著提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药
，尤其是。
技术介绍
聚肌胞为一种干扰素诱导剂。在体内细胞诱导下产生干扰素，有类似干扰素的作用，故有广谱抗病毒和免疫调节功能。用于病毒感染性疾病和肿瘤的辅助治疗。但是对于新城疫病毒和聚肌胞的结合还没有相关的报道，因此本专利技术就是针对目前的情况，利用聚肌胞的广谱抗病毒的原理，将聚肌胞设计为一种可有效提高新城疫病毒抗肿瘤效果的佐剂。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。，其特征在于选择健康的鸡胚，接种新城疫病毒；收获病毒NDV尿囊液；将 NDV尿囊液进行超滤浓缩；再经过柱层析纯化，然后加入聚肌胞，得到一种新的抗癌药物。 本专利技术的优点在于，加入聚肌胞佐剂可明显提高抗肿瘤药物的抗癌效果。如下1.佐剂聚肌胞的制备取注射用水约900ml，搅拌溶解磷酸氢二钠1. 55g、磷酸二氢钠0. ^g、氯化钠 8. 77g ；将此缓冲液平分成2份，并加热至50°C。一份溶解聚肌苷酸0. 49g，另一份溶解聚胞苷酸0. 51g ；充分溶解后将聚胞苷酸溶液混入聚肌苷酸溶液中，在缓慢搅拌下维持30分钟； 冷却至室温，定容至IOOOml ；0. 45 μ m滤芯过滤，灌封。2.抗肿瘤药物的制备(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋放38°C孵化9天左右，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；于 37 °C培养96小时；(3)收获NDV尿囊液在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价；(4)超滤浓缩在无菌环境下通过超滤系统对尿囊液超滤浓缩至原来的10倍，其中超滤膜包截留分子量为300KD，膜包0. Im2 ；(5)纯化在无菌条件下将尿囊液打入层析柱中，通过凝胶过滤层析对尿囊液进行纯化；(6)加入佐剂在无菌条件境下按1 10的比例加入聚肌胞溶液，混勻。 具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术所述技术方案作进一步的说明实施例1，具体步骤如下1、鸡胚选择选择受精鸡蛋放38°C孵化9天左右，检出死胚和寡蛋；2、病毒接种新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；于 37°C培养96小时。3、收获NDV尿囊液在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价。4、超滤浓缩在无菌环境下通过超滤系统对NDV尿囊液超滤浓缩至原来的10倍，其中超滤膜包截留分子量为300KD，膜包0. Im2 ；5、纯化在无菌条件下将尿囊液打入层析柱中，通过凝胶过滤层析对尿囊液进行纯化。6、加入聚肌胞在无菌条件下按1 10的比例加入聚肌胞溶液，混勻。最后所得的制剂即为一种加入佐剂的新型抗癌药物。实施例2，具体步骤如下1、鸡胚选择选择受精鸡蛋放38°C孵化10天左右，检出死胚和寡蛋；2、病毒接种新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；于 37°C培养96小时。3、收获NDV尿囊液在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价。4、超滤浓缩在无菌环境下通过超滤系统对NDV尿囊液超滤浓缩至原来的20倍，其中超滤膜包截留分子量为300KD，膜包0. Im2 ；5、纯化在无菌条件下将尿囊液打入层析柱中，通过凝胶过滤层析对尿囊液进行纯化。6、加入聚肌胞在无菌环境下按1 20的比例加入聚肌胞溶液，混勻。最后所得制剂即为一种加入佐剂的新型抗癌药物。实施例3，具体步骤如下1、鸡胚选择选择受精鸡蛋放39°C孵化12天左右，检出死胚和寡蛋；2、病毒接种新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；次日在无菌条件下将鸡胚在接种部位打个小孔；用2ml注射器吸取新城疫病毒的病毒液0. 5ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；于 37°C培养96小时。3、收获NDV尿囊液在无菌条件下对培养四天的鸡胚进行消毒；用大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取NDV尿囊液；收获完的NDV尿囊液收集到一个瓶子里，测效价。4、超滤浓缩在无菌环境下通过超滤系统对NDV尿囊液超滤浓缩至原来的40倍，其中超滤膜包截留分子量为300KD，膜包0. lm2。5、纯化将浓缩后的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液打入层析柱中，通过凝胶过滤层析对尿囊液进行纯化。6、加入聚肌胞在无菌环境下按1 40的比例加入聚肌胞溶液，混勻。最后所得制剂即为一种加入佐剂的新型抗肿瘤药物。实施例41.加入聚肌胞的病毒液和未加入聚肌胞的病毒液的血凝效价的比较，结果见下表权利要求1.，其特征在于选择健康的鸡胚，接种新城疫病毒；收获病毒NDV尿囊液；将NDV尿囊液进行超滤浓缩；再经过柱层析纯化，然后加入聚肌胞，得到一种新的抗癌药物。2.，根据权利要求1所述，其特征在于(1)聚肌胞佐剂的制备；(2)选择健康的鸡胚，接种病毒；(3)收获病毒液；(4)超滤浓缩；(5)纯化；(6)加入佐剂。3.，根据权利要求2所述，其特征在于所述步骤(1)先进行聚肌胞的制备。4.，根据权利要求2所述，其特征在于所述步骤(2)选择9-10日龄健康SPF鸡胚，接种新城疫病毒。5.，根据权利要求2所述，其特征在于所述步骤(3)收获病毒液，培养96小时的NDV尿囊液即为病毒液。6.，根据权利要求2所述，其特征在于所述步骤(4)超滤浓缩所用的膜包分子量为300KD。7.，根据权利要求2所述，其特征在于所述步骤(5)纯化采用柱层析凝胶过滤方法。全文摘要本专利技术提供了，其特征是采用健康的鸡胚接种新城疫病毒，经过培养，收获NDV尿囊液，通过超滤浓缩、纯化之后加入佐剂，成为一种抗肿瘤药物，其抗肿瘤效果有显著提高。文档编号A61K39/17GK102488896SQ20111042012公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月15日 优先权日2011年12月15日专利技术者侯本晶, 沈丽丽, 王国新, 王智佳, 赵钢 申请人:天津济命生生物科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵钢，侯本晶，王国新，王智佳，沈丽丽，
申请(专利权)人：天津济命生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：