多肽和含有革兰氏阳性多肽的免疫组合物及使用方法技术

本发明专利技术提供可自葡萄球菌属分离的分离多肽。本发明专利技术亦提供包含一种或多种所述多肽的组合物、用于制备所述多肽的方法及用于使用所述多肽的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多肽和含有革兰氏阳性多肽的免疫组合物及使用方法相关申请的交叉参考本申请要求于2009年3月23日提交的美国专利临时申请序列号61/210,772的优先权。背景革兰氏阳性菌是引起多种人和动物疾病的种类繁多的生物群。公认在人和/或动物健康中重要的一些病原体包括属于以下科的细菌：棒杆菌科(Corynebacteriaceae)、肠球菌科(Enterococcacae)、微球菌科(Micrococcaceae)、分枝杆菌科(Mycobacteriaceae)、诺卡氏菌科(Nocardiaceae)和消化球菌科(Peptococcaceae)，它们包括诸如以下属等的细菌种类：放线菌属(Actinomycesspp.)、双歧杆菌属(Bifidobacteriumspp.)、棒杆菌属(Corynebacteriumspp.)、肠球菌属(Enterococcusspp.)、丹毒丝菌属(Erysipelothrixspp.)、真杆菌属(Eubacteriumspp.)、盖球菌属(Kytococcusspp.)、乳杆菌属(Lactobacillusspp.)、微球菌属(Micrococcusspp.)、动弯杆菌(Mobiluncusspp.)、分枝杆菌属(Mycobacteriaspp.)、消化链球菌属(Peptostreptococcusspp.)、丙酸杆菌属(Propionibacteriumspp.)和葡萄球菌属(Staphylococcusspp.)。这些病原体在很多不同动物物种中引起多种临床表现。历史上对所述感染的治疗一直是攻击革兰氏阳性生物体的共有结构和功能的抗生素。然而，很多更普遍存在的革兰氏阳性生物体发展了对若干种类抗生素的抗性，使得感染的治疗变得困难。在人和产生食品的动物两者中广泛使用抗生素治疗细菌疾病，很可能是造成革兰氏阳性生物体很多种类耐受抗生素菌株的增殖的主要因素。因此，很有必要发现预防或消除革兰氏阳性生物体在动物以及人中的感染的不同治疗。在农业动物中的葡萄球菌感染在农业生产中，革兰氏阳性生物体引起多种重要疾病。由革兰氏阳性菌感染引起的临床病况实例包括：乳腺炎、败血症、肺炎、骨髓炎、脑膜脑炎、淋巴管炎、皮炎、生殖道感染、子宫炎、围生期疾病、垂体脓肿、关节炎、滑囊炎、睾丸炎、膀胱炎和肾盂肾炎、干酪性淋巴结炎、结核病、溃疡性淋巴管炎、丹毒、蹄叶炎、tyzzer氏病、破伤风、肉毒中毒、肠炎、恶性水肿、羊炭疽、细菌性血红蛋白尿、肠原性毒血症。葡萄球菌属细菌尤其能感染很多农业动物的不同物种，并可引起巨大的经济损失。例如，估计因为常常由金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)引起的疾病乳腺炎，美国乳品业每头牛每年损失大约$185。因为美国有9.5百万头母牛，乳腺炎的年花费大约$18亿。这大约是农场牛奶销售总值的10％，该损失的约三分之二是由于亚临床感染的母牛降低产奶。其它损失是由于弃掉异常奶和因用抗生素治疗母牛而扣留的奶、早期更换受影响的母牛的花费、淘汰母牛的降低的销售值、药物花费和兽医服务及增加的人工成本。由革兰氏阳性球菌引起的乳腺炎除了在牛乳品业内流行外，亦在山羊和绵羊中常见。由金黄色葡萄球菌引起的另外的动物疾病包括：马的葡萄状菌病、家禽的脓性滑膜炎和骨髓炎、兔的鼻塞症、猪流产和羔羊的蜱脓毒症。葡萄球菌的其它种类是犬(中间葡萄球菌(S.intermedius))和猪(猪葡萄球菌(S.hycius))的主要皮肤病原体。在家禽类中，葡萄球菌病原体引起心内膜炎和败血症。人中的葡萄球菌感染葡萄球菌属亦为引起多种感染的人病原体。金黄色葡萄球菌这种常见的人粘膜和皮肤定植者(colonizer)种类，是可引起多种人感染的机会病原体。例如，金黄色葡萄球菌是几种皮肤感染的致病因子，所述皮肤感染包括脓疱病、疖病、蜂窝织炎和皮肤烫伤综合征以及潜在致命性的手术后伤口感染。另外，无免疫应答的个体在医院环境中暴露于金黄色葡萄球菌，导致器官感染，例如肺炎、尿路感染、骨髓炎、关节炎、菌血症和心内膜炎。金黄色葡萄球菌亦为中毒症(最著名的中毒性休克综合征和食物中毒)的致病因子。由葡萄球菌肠毒素B引起的食物中毒是食物传染疾病的最常见原因，甚至超过沙门氏菌病、弯曲菌病和利斯特菌病。葡萄球菌的其它种类亦引起人疾病；表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、溶血葡萄球菌(S.haemolyticus)和人葡萄球菌(S.hominis)通常感染植入的医疗设备，而腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)与妇女的尿路感染有关。葡萄球菌的毒力机理葡萄球菌感染多种宿主组织，并通过以下几方面来避开免疫系统：产生数种类型的分泌性蛋白、表面表达的毒力因子及针对在有限资源中存活而设计的代谢系统和与宿主环境有关的主动防卫。定植是建立感染的必不可少的第一步；包括荚膜、脂磷壁酸和磷壁酸在内的多种因子是造成定植的常见结构组分。另外，表面蛋白例如葡萄球菌纤连蛋白-结合蛋白和骨唾液蛋白结合蛋白特异性结合宿主组织组分。毒素常常常在葡萄球菌病原体中产生并且高度有害；包括食物中毒、中毒性休克综合征和剥脱性皮肤病况在内的几种人疾病，是细胞外分泌的毒素蛋白的直接结果。单个分离株可编码20-30种不同分泌性毒素的基因。某些分泌性蛋白产物是超抗原，其可与抗原呈递细胞的MHCII类分子非特异性结合，并同时与T细胞的T细胞受体结合。该结合诱导T细胞信号转导，导致释放高水平的促炎因子，最终由于压倒性免疫应答诱导宿主损伤。在表面表达的另一类毒力因子伪装细菌使其逃过宿主免疫系统。例如，金黄色葡萄球菌表面表达的A蛋白通过结合宿主抗体的Fc组分抑制调理作用和吞噬作用。多种蛋白酶、溶血素(α、β、γ和δ)、核酸酶、脂肪酶、透明质酸酶和胶原酶亦有助于细菌从周围细胞提取营养，并保卫细菌抵抗宿主防御。葡萄球菌中的抗生素耐受性CDC估计美国每年将近2百万人获得医院内感染，导致每年90,000起死亡。在这些致命感染中，70％是由抗生素耐受细菌引起的。微生物物种中抗生素耐受增加在皮肤及粘膜定植者例如金黄色葡萄球菌中尤其显著。例如，分离自医院环境中的绝大多数金黄色葡萄球菌耐受青霉素，50％亦耐受半合成青霉素，例如甲氧西林、萘夫西林和苯唑西林。这些被称为MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)的分离群首先在19世纪70年代出现，现在坚固地存在于医院环境中。最近有社区MRSA感染的数个病例，其中感染的个体先前未与医院或卫生保健人员接触。通过分离对用于治疗MRSA的糖肽万古霉素较不敏感的MRSA分离群，加剧了这种令人担忧的趋势。按照CDC对万古霉素耐受性的定义，极少菌株显示真正耐受万古霉素，但业已表征了几种MRSA菌株为由对万古霉素的易感性降低的亚群或VISA(万古霉素中度耐药性金黄色葡萄球菌)构成。因为分离万古霉素耐药性和万古霉素中度耐药性菌株是相对新发展，关于其在医院和/或社区流行的资料很少。偶尔地，亦从人中找到完全耐受万古霉素并携带很可能从肠球菌属获得的抗性质粒的VRSA(耐万古霉素的金黄色葡萄球菌)。用于预防和治疗葡萄球菌感染的策略耐受多种抗生素的众多革兰氏阳性病原体的出现，推动了旨在开发预防性疫苗以抵抗疾病的研究努力。将疫苗设计成给予患者以从免疫系统引发长期记忆应答，使得若在将来本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.03.23 US 61/2107721.一种组合物，其包含：SEQIDNO:397的分离多肽，条件是若所述分离多肽在氨基末端包括一个或多个另外的氨基酸，则与SEQIDNO:399的1-26位氨基酸相比，所述一个或多个另外的氨基酸包括至少两种氨基酸修饰，其中每种氨基酸修饰包含一种氨基酸缺失或一种氨基酸取代。2.权利要求1的组合物，其中所述组合物保护动物免受选自ATCC19636或ATCC25904的金黄色葡萄球菌的攻击。3.权利要求1的组合物，其还包含药学上可接受的载体。4.权利要求1的组合物，其还包含至少一种第二多肽，其中所述第二多肽可分离自当在包含铁螯合剂的培养基中培养时的金黄色葡萄球菌，并且当在没有铁螯合剂的培养基中生长时不可分离。5.权利要求4的组合物，其中所述第二多肽选自：SEQIDNO:353、SEQIDNO:354、SEQIDNO:355、SEQIDNO:356、SEQIDNO:357、SEQIDNO:358、SEQIDNO:359、SEQIDNO:360、SEQIDNO:361、SEQIDNO:362、SEQIDNO:363、SEQIDNO:364、SEQIDNO:365、SEQIDNO:366、SEQIDNO:367、SEQIDNO:368、SEQIDNO:369、SEQIDNO:370、SEQIDNO:371、SEQIDNO:372、SEQIDNO:373、SEQIDNO:374、SEQIDNO:375、SEQIDNO:376、SEQIDNO:377、SEQIDNO:378、SEQIDNO:379、SEQIDNO:380、SEQIDNO:381、SEQIDNO:382、SEQIDNO:383、SEQIDNO:384、SEQIDNO:385、SEQIDNO:386、SEQIDNO:387、SEQIDNO:388、SEQIDNO:389、SEQIDNO:390、SEQIDNO:391、SEQIDNO:392、SEQIDNO:393、SEQIDNO:394、SEQIDNO:395、SEQIDNO:396、SEQIDNO:419、SEQIDNO:420、SEQIDNO:421、SEQIDNO:422、SEQIDNO:423、SEQIDNO:424、SEQIDNO:425、SEQIDNO:426、SEQIDNO:427、SEQIDNO:428或SEQIDNO:429。6.权利要求1的组合物，其还包含至少一种第二多肽，其中所述第二多肽可分离自当在包含铁螯合剂的培养基中培养时的金黄色葡萄球菌，当在没有铁螯合剂的培养基中生长时不可分离，并且选自：SEQIDNO:408、SEQIDNO:409、SEQIDNO:410、SEQIDNO:411、SEQIDNO:412、SEQIDNO:413、SEQIDNO:414、SEQIDNO:415、SEQIDNO:416、SEQIDNO:417或SEQIDNO:418。7.权利要求1的组合物，所述组合物还包含：以下分离多肽，其可分离自当在没有铁螯合剂的培养基中生长时的金黄色葡萄球菌，并且具有150kDa、132kDa、120kDa、75kDa、58kDa、50kDa、44kDa、43kDa、41kDa、40kDa的分子量、或这样的分离多肽的组合。8.一种组合物在制备用于治疗患者感染的方法中所用的药物中的用途，所述方法包括：将有效量的所述组合物给予具有由葡萄球菌属引起的感染或处于具有所述感染的风险中的患者，其中所述组合物包含：SEQIDNO:397的分离多肽，条件是若所述分离多肽在氨基末端包括一个或多个另外的氨基酸，则与SEQIDNO:399的1-26位氨基酸相比，所述一个或多个另外的氨基酸包括至少两种氨基酸修饰，其中每种氨基酸修饰包含一种氨基酸缺失或一种氨基酸取代。9.一种组合物在制备用于治疗患者症状的方法中所用的药物中的用途，所述方法包括：将有效量的所述组合物给予具有由葡萄球菌属引起的感染的患者，其中所述组合物包含：SEQIDNO:397的分离多肽，条件是若所述分离多肽在氨基末端包括一个或多个另外的氨基酸，则与SEQIDNO:399的1-26位氨基酸相比，所述一个或多个另外的氨基酸包括至少两种氨基酸修饰，其中每种氨基酸修饰包含一种氨基酸缺失或一种氨基酸取代。10.一种组合物在制备用于降低患者定植的方法中所用的药物中的用途，所述方法包括：将有效量的所述组合物给予葡萄球菌属定植的患者，其中所述组合物包含：SEQIDNO:397的分离多肽，条件是若所述分离多肽在氨基末端包括一个或多个另外的氨基酸，则与SEQIDNO:399的1-26位氨基酸相比，所述一个或多个另外的氨基酸包括至少两种氨基酸修饰，其中每种氨基酸修饰包含一种氨基酸缺失或一种氨基酸取代。11.权利要求8-10中任一项的用途，其中所述组合物还包含至少一种第二多肽，其中所述第二多肽可分离自当在包含铁螯合剂的培养基中培养时的金黄色葡萄球菌，并且当在没有铁螯合剂的培养基中生长时不可分离。12.权利要求11的用途，其中所述第二多肽具有通过在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶上电泳测定的以下分子量：88kDa、55kDa、38kDa、37kDa、36kDa、35kDa或33kDa。13.权利要求8-10中任一项的用途，其中所述组合物还包含至少一种第二多肽，所述第二多肽选自：SEQIDNO:353、SEQIDNO:354、SEQIDNO:355、SEQIDNO:356、SEQIDNO:357、SEQIDNO:358、SEQIDNO:359、SEQIDNO:360、SEQIDNO:361、SEQIDNO:362、SEQIDNO:363、SEQIDNO:364、SEQIDNO:365、SEQIDNO:366、SEQIDNO:367、SEQIDNO:368、SEQIDNO:369、SEQIDNO:370、SEQIDNO:371、SEQIDNO:372、SEQIDNO:373、SEQIDNO:374、SEQIDNO:375、SEQIDNO:376、SEQIDNO:377、SEQIDNO:378、SEQIDNO:379、SEQIDNO:380、SEQIDNO:381、SEQIDNO:382、SEQIDNO:383、SEQIDNO:384、SEQIDNO:385、SEQIDNO:386、SEQIDNO:387、SEQIDNO:388、SEQIDNO:389、SEQIDNO:390、SEQIDNO:391、SEQIDNO:392、SEQIDNO:393、SEQIDNO:394、SEQIDNO:395、SEQIDNO:396、SEQIDNO:419、SEQIDNO:420、SEQIDNO:421、SEQIDNO:422、SEQIDNO:423、SEQIDNO:424、SEQIDNO:425、SEQIDNO:426、SEQIDNO:427、SEQIDNO:428或SEQIDNO:429。14.权利要求8-10中任一项的...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·L·赫伦奥尔森，D·M·凯特伦，
申请(专利权)人：埃皮托皮克斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：