来自金黄色葡萄球菌的多肽和使用方法技术

本发明专利技术提供可从葡萄球菌属物种分离出来的分离的多肽。本发明专利技术还提供包括一种或多种该多肽的组合物，以及所述多肽的制备方法和使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】继续申请数据本申请要求享受于2005年2月14日提交的美国临时申请序列号60/652,843的权益，其内容全部引入本文作为参考。背景 革兰氏阳性细菌是显著多样化的一类生物，可导致人类和动物多种疾病。一些病原体被公认对人类和/或动物健康是重要的，包括属于棒状杆菌科、肠球菌科、微球菌科、分支杆菌科、诺卡菌科和消化球菌科家族的细菌，包括这样的细菌种类放线菌属物种、双岐杆菌属物种、棒状杆菌属物种、肠球菌属物种、丹毒丝菌属物种、真细菌属物种、皮球菌属属物种、乳酸杆菌属物种、微球菌属物种、动弯杆菌属物种、分枝细菌属物种、消化链球菌属物种、丙酸杆菌属物种和葡萄球菌属物种。这些病原体在许多不同的动某种类中导致多种临床症状。这样感染的治疗在历史上是攻击革兰氏阳性生物体共同结构和功能的抗生素。但是，许多更加普遍存在的革兰氏阳性生物体发展了对几类抗生素的抗性，使感染的治疗困难。对人类和食物生产动物广泛使用抗生素治疗细菌疾病，可能是许多对抗生素有抗性的革兰氏阳性生物体菌株种类增生的主要原因。因此，对发现不同的预防或消除动物和人类革兰氏阳性生物体感染的治疗方法有巨大的需求。 在农业动物中的葡萄球菌感染 在农业产业中许多重要的疾病是革兰氏阳性生物体导致的。革兰氏阳性细菌感染导致的临床病症实例包括乳房炎、败血病、肺炎、骨髓炎、脑膜脑炎、淋巴管炎、皮炎、生殖道感染、子宫炎、围产期疾病、垂体脓肿、关节炎、粘液囊炎、睾丸炎、膀胱炎和肾盂肾炎、干酪性坏死淋巴腺炎、肺结核，溃疡性淋巴管炎、丹毒、蹄叶炎、tyzzer疾病、破伤风、波特淋菌中毒、肠炎、恶性肿胀、羊炭疽、杆菌性血红蛋白尿、肠原性毒血症。葡萄球菌属物种特别能够感染许多不同种类的农业动物，并能导致大量经济损失。例如，美国牛奶产业估计每头奶牛每年由于乳房炎损失约185美元，乳房炎经常是金黄色葡萄球菌导致的疾病。因为在美国有9百50万头产奶奶牛，乳房炎每年的代价大约为约18亿美元。这大约是农场牛奶销售额总价值的10％，这个损失的三分之二是由于减少了亚临床感染奶牛的牛奶产量而引起的。其它损失是由于弃去异常牛奶和用抗生素治疗的奶牛产奶受到抑制所致，感染奶牛被提早更换的费用，精选奶牛减少销售价值，药物和兽医服务费用，和增加的劳动力费用。除了在牛奶产业盛行以外，革兰氏阳性球菌导致的乳房炎在山羊和绵羊中也常见。金黄色葡萄球菌导致的另外的动物疾病包括马的葡萄状菌病，家禽的化脓性滑膜炎和骨髓炎，兔子的鼻塞，猪的流产，和羊羔的扁虱脓毒症。葡萄球菌的其它种类是犬(S.intermedius)和猪(S.hycius)的主要皮肤病原体。在家禽种类中，葡萄球菌病原体导致心内膜炎和败血病。 人类葡萄球菌感染 葡萄球菌属也是人类的病原体，导致各种各样的感染。种类金黄色葡萄球菌是人类粘膜和皮肤的常见建群者，是能够导致多种人类感染的条件性病原体。例如，金黄色葡萄球菌是几种皮肤感染的病因性媒介，包括脓疱病、疖病、蜂窝织炎(cellulitis)、和烫伤皮肤综合征以及潜在致命的手术后伤口感染。此外，免疫减弱的个体在医院环境下暴露于金黄色葡萄球菌可导致器官感染例如肺炎、尿路感染、骨髓炎、关节炎、菌血症和心内膜炎。金黄色葡萄球菌还是中毒症、最著名的中毒休克综合征和食物中毒的病因性媒介。葡萄球菌肠毒素B导致的食物中毒是食物致疾病的最常见原因，甚至超过沙门氏菌病、弯曲菌病和利斯特菌病。其它种类的葡萄球菌也导致人类疾病；表皮葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和人肉孢子虫通常感染建群医疗器械，腐生葡萄球菌与妇女尿路感染有关。 葡萄球菌的毒性机制 葡萄球菌感染多种宿主组织，通过以下方式躲避免疫系统产生几种类型分泌蛋白、表面表达毒性因子，和代谢系统被设计为在有限资源中生存，和宿主环境相关的活性防御。建群是建立感染的必需的第一个步骤；许多因子包括被膜、脂磷壁质酸和磷壁酸是帮助建群的常见结构的成分。此外，表面蛋白例如葡萄球菌纤维连接蛋白结合蛋白和骨唾液酸糖蛋白结合蛋白特异性与宿主组织成分结合。葡萄球菌病原体通常产生毒素，并是高度破坏性的；几种人类疾病包括食物中毒、中毒休克综合征和表皮脱落皮肤病症是细胞外分泌毒素蛋白的直接结果。单个分离菌可以编码20-30个不同的分泌毒素的基因。一些分泌的蛋白产物是超级抗原，能非特异性地与抗原-产生细胞的MHC类II分子结合，同时与T细胞的T-细胞受体结合。结合诱导T细胞信号，导致高水平前炎症因子的释放，最终诱导宿主由于不可抵抗的免疫响应的损伤。另一类在表面表达的毒性因子伪装来自宿主免疫系统的细菌。例如，金黄色葡萄球菌表面-表达的蛋白A通过与宿主抗体Fc成分结合抑制调理素作用和噬菌作用。许多蛋白酶、溶血素(α、β、γ和δ)、核酸酶、脂肪酶、透明质酸酶和胶原质还帮助细菌从环境细胞提取营养素，保护它们对抗宿主的防御。 在葡萄球菌中抗生素抗性 CDC估计在美国每年有接近二百万人受到医院源性感染，每年导致90,000例死亡。在这些致命感染中70％是由抗生素-抗性细菌导致的。在微生某种类中抗生素-抗性的增加在皮肤和粘膜建群者例如金黄色葡萄球菌中特别明显。例如，绝大部分从医院环境分离的金黄色葡萄球菌是对青霉素抗性的，50％还对半合成青霉素类例如二甲氧基苯青霉素、萘夫西林和苯唑西林有抗性。这些分离菌，被称作MRSA(二甲氧基苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌)在1970年代第一次被发现，现在在医院环境中已经明确地确立。最近出现几例在社区的MRSA感染，其中被感染的个体以前没有暴露于医院或健康护理工作者。这个令人担忧的趋势通过MRSA分离菌的分离被强化，该分离菌对用于治疗MRSA的糖肽万古霉素敏感性差。按照CDC对万古霉素抗性的定义非常少的菌株曾表现出对万古霉素真正的抗性，但是几种MRSA菌株曾被鉴定为包含对万古霉素敏感性降低的亚群落，或VISA(万古霉素中间体金黄色葡萄球菌)。因为将万古霉素抗性菌株和万古霉素中间体菌株分离是相对新的进展，只有很少关于它们在医院和/或社区流行性的数据。偶尔地，对万古霉素具有完全抗性的和带有可能从肠球菌某种获得的抗性质粒的VRSA(万古霉素抗性金黄色葡萄球菌)也曾从人体中找到。 预防和治疗葡萄球菌属感染的策略 许多对多种抗生素抗性的革兰氏阳性病原体的出现激发了旨在发展预防性疫苗以对抗疾病研究的努力。设计施用给患者的疫苗是为了引起免疫系统长期记忆效应，以致在未来时间遭遇到该病原体时，免疫系统能更快速和更有效地清除该病原体。目前，对抗革兰氏阳性病原体的具有广泛保护作用的疫苗还没有得到，所述革兰氏阳性病原体是与许多严重的人类疾病相关的，特别是与葡萄球菌感染的那些疾病相关的。发展预防葡萄球菌感染疫苗的方法包括报导使用微生物表面成分识别粘连基质分子的那些，表面多糖类(McKenney等2000；McKenney等1999.Science 2841523-7；Maira-Litran等2002.InfectImmun 704433-40；Maira-Litran等2004.Vaccine 22872-9；Maira-Litran等2005.Infect Immun 736752-62)和突变的外蛋白(Lowerell等1996.Infect Immun 644686-93；Stil本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，其包含：　　　　具有分子量８８ｋＤａ、５５ｋＤａ、３８ｋＤａ、３７ｋＤａ、３６ｋＤａ、３５ｋＤａ、３３ｋＤａ或其组合的两种分离的多肽，其中分子量通过在十二烷基硫酸钠－聚丙烯基酰胺凝胶上的电泳测定，其中多肽可从当在包含铁螯合剂的介质中培养时的金黄色葡萄球菌中分离出来，并且不能从当在不含铁螯合剂的介质中生长时的金黄色葡萄球菌中分离出来，其中组合物保护动物对抗金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ菌株１９６３６的激发。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：DA艾默里，DE斯特劳布，L温德林，LL合朗奥尔森，
申请(专利权)人：埃皮托皮克斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]