本发明专利技术涉及一种新抗体，所述抗体与具有以下序列的肽特异性地结合：Ala-Ala-Ala-Pro-Ala-Lys-Ala-Ala-Ala-Ala-Pro-Ala-Lys-Thr-Ala-Ala-Ala-Pro-Val(SEQ?ID?No.1)，并且所述抗体不是在克氏锥虫(T.cruzi)感染宿主之后在宿主内诱导产生的。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及免疫学领域，即抗原和抗体间相互作用的领域。更具体而言，本专利技术涉及一种人工合成抗原(TCSP)在检测与美洲锥虫病(Chagas disease)不相关的抗体中的用途，所述用途使得诊断人类患者中的某些自身免疫疾病成为可能，其中所述抗原来源于单细胞寄生虫克氏锥虫(Trypanosoma Cruzi)的一个蛋白质，所述克氏锥虫能导致所述美洲锥虫病。
技术介绍
众所周知，通过干扰有效的体液免疫反应的正常成熟，以及通过使所诱导的抗体指向自身抗原，传染原能够逃脱宿主的免疫系统。此外，由于某些传染性抗原和自体抗原之间的结构相似性，某些传染原被认为能够引起具有遗传倾向的宿主中的自身免疫反应。美洲锥虫病是拉丁美洲和南美洲的地方性疾病，是在其肆虐的国家中的发病和死亡的主要原因。它在其它大洲中实际上是不存在的。每年大约16至18万人被感染，以及约50，000例患者死于该病。它是由单细胞寄生虫克氏锥虫(T.cruzi)感染引起的，所述克氏锥虫是动质体目锥虫科的成员，所述锥虫科可引发人类中的美洲锥虫病；该原生动物寄生虫是通过大量血液寄生的昆虫，特别是由锥猎蝽亚科(血液寄生的盲蝽)传染的。当寄生虫的传染形式寄生在昆虫的蜇中时，当媒介昆虫的排泄物与宿主的血液或粘膜相接触时，即发生了传染。媒介昆虫因此释放了传染性的终结寄生型的锥虫成虫形式，通过血液循环，其可移生于多种类型的细胞中。该寄生虫复杂的生命周期，使其能够逃脱宿主的免疫反应，而不会导致宿主的死亡。该寄生虫经历了以下阶段媒介昆虫中的短膜虫期阶段、哺乳动物宿主的血液中的锥鞭毛体阶段，以及细胞内的无鞭毛体阶段在该最后的阶段中，该寄生虫通过二分裂繁殖。另一种沾染途径是用受污染的血液进行输血；已开发出大量的筛选方法(参见(例如)专利EP 0976763和US 6458922)。众所周知克氏锥虫感染心脏细胞和骨骼肌细胞、神经胶质细胞以及单核吞噬细胞系统的细胞。在被动侵入宿主细胞后，寄生虫的三鞭毛细胞形式分化成无鞭毛体形式；它主动分裂，然后释放出锥鞭毛体形式，从而导致新的细胞侵染。约有30%的患有这种疾病的患者出现严重的临床心肌病型症状(参见以下文章K. Karratolios等，‘‘hflammatory Cardiomyopathy “，2006 年发表在 Hellenic Journal of Cardiology 的综述，卷 47， 第 54-65 页，以及 J. Burian 等， “Myocarditis :the immunologist ‘ s view on pathogenesis and treatment" , 2005 年发表于 Swiss Medical Weakly 的综述，卷 135,第 359-364页)；上述心肌病可以是急性的或慢性的。在受到人类免疫缺陷病毒(HIV)或美洲锥虫病范围以外的其他传染原感染的患者中，可观察到类似的心脏病。表观健康者也可能在较小程度上存在类似的心脏病；已知这些疾病是由原因不明的自身免疫机制造成的(参见以下文章F.Kierszenbaum，“ Views on the autoimmunity hypothesis for Chagas disease pathogenesis" , 2003在〃 FEMS Immunology and Medical Microbiology"，卷 1545，第 1-11 页，以及 R. Jahns等, “Pathological autoantibodies in cardiomyopathy “ , 2008 ￥ 9 月胃 ^ Τ" Autoimmunity的综述，卷41 (6)，第454-461页)。事实上，在没有确切起因的、或抗体特异性的，或特别是已知的免疫原相关的特异性的心肌病患者中，能够观察到自体免疫反应。还没有文献描述过一个确定的能导致所述自身免疫的抗原结构，并且更具体而言还没有文献描述过这样一种针对克氏锥虫(TCSP)的抗原。已经描述了针对受体(肾上腺素的或胆碱能的)的抗体，但是没有它们对于TCSP肽的特异性的任何定义；并且也没有任何描述涉及美洲锥虫病固有范围以外的克氏锥虫寄生虫的抗原。如(例如)Hoft 等的文章中所述(〃 Trypanosama cruzi Expresses Diverse Repetitive Protein Antigens" , 1989 年 7 月发表在 Infection and Immunity 的综述， 卷57 (7)，第1959-1967页)，已知克氏锥虫寄生虫生命周期的每一阶段均可表达特异性的抗原蛋白。在该出版物所描述的研究中，作者用人抗血清筛选了克氏锥虫的表达库，并发现了编码具有重复单元的多肽的cDNA，其中所述重复单元包括6-34个氨基酸。TCR70(其与 TCR69同源)的氨基酸序列高度保守，仅有一些偶然性的替换。它们频繁地出现在所有分离的片段中，以及这些重复单元的多样性表明，它们与规避免疫系统的破坏作用有关。由于这些重复单元是免疫系统的有效调制器，因此可以认为其它传染原使用类似的策略，甚至是相同的重复单元。筛选直接针对克氏锥虫的抗体的方法包括间接免疫荧光法(IFA)、间接血凝集法(IHA)和免疫酶分析技术(ELISA)，其中所述方法是在血库使用的(特别是在巴西，这项检查是强制性的)。这些市售可得的分析试剂盒大多使用未经处理的寄生虫提取物或亚细胞片断作为抗原制剂。已经发现寄生虫提取物与患有其它疾病的患者的血清发生反应，所述其它疾病如利什曼病、让氏锥虫(Trypanosoma rangeli)感染、梅毒、类风湿发热。因此， 不同的病原微生物的类似重复单元的使用使得诊断和治疗变得复杂化。此外，美洲锥虫病筛选中的假阳性反应能够导致误诊，这将伴随不必要的和/或无效的治疗。因此，人们迫切需要能够检测不同的病原微生物所使用的重复单元。但是，现有技术中没有任何文献表明或暗示在克氏锥虫中鉴定的多肽基序TCR70，存在于其他与美洲锥虫病不相关的疾病中，或者导致了自身免疫失调。现有技术中也没有表明或暗示这些重复单元能够用于开发诊断和治疗与美洲锥虫病有关或无关的心脏病或自身免疫失调的可靠工具，或有效地预防上述疾病。为此还需要提供一种免疫诊断方法，以检测能够与克氏锥虫所表达的抗原特异性地结合的病原性的抗体，所述方法优选快速的或能够以试剂盒的形式使用的方法。最后，还没有方法能够降低血液中的这些病原性的抗体的浓度。
技术实现思路
根据本专利技术，所述的问题可以通过使用与具有以下序列的肽特异性地结合的抗体得以解决Ala-A1a-A1a-Pro-A1a~Lys~Ala~A1a-A 1a-A 1a-Pro-A1a-Lys-Thr-A1a-A 1a-A Ia-P ro-Val(SEQ ID No. 1)，并且所述抗体不是在克氏锥虫感染宿主之后在宿主内诱导产生的。这些抗体本身代表本专利技术的第一主题。本专利技术的第二主题是与根据第一主题所述的抗体特异性地结合的抗原，所述抗原不包括与克氏锥虫诱导的抗体结合并且由克氏锥虫寄生虫遗传编码的抗原，即，不包括具有序列SEQ ID No. 1的抗原。本专利技术的第三主题是一种肽或蛋白质在检测和/或沉淀根据本专利技术第一主题所述的抗体本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：马安·兹雷恩，菲利普·范海姆斯，
申请(专利权)人：因菲尼迪生物标志公司，里昂公民济贫院，克劳德贝尔纳里昂第一大学，法国国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：
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