本发明专利技术公开了一种甲状旁腺激素衍生物，它具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，在第26位的赖氨酸的ε-氨基上通过谷氨酸作为间隔基连有一个具有12到40个碳原子并且选择性地含有一个可以带负电荷基团的亲脂性基团W，得到PTH的衍生物，该衍生物与PTH相比其体内半衰期大大延长，从而可以降低PTH的给药频率，提高了药物的顺应性和治疗效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种新型的甲状旁腺激素衍生物，这种衍生物的制备方法，含有该衍生物的药物组合物和这种甲状旁腺激素衍生物在治疗骨质疏松中的应用。
技术介绍
甲状旁腺激素(Parathyroid hormone, PTH)是由甲状旁腺分泌的含84个氨基酸的单链多肽蛋白质，它是调节钙、磷代谢及骨转换的最为重要的肽类激素之一。人甲状旁腺激素(hPTH)的生理功能主要是促进成骨细胞的成骨作用，刺激肾对钙的重吸收、磷的分泌和骨的重建。研究表明hPTH的活性中心位于N端1 34氨基酸肽段，通过与肾、骨组织中专一性受体结合而发挥作用。PTH是一种很好的促进骨形成的药物， 小剂量间歇性应用不仅能刺激皮质骨生长，使已丢失的松质骨重建而显著增加骨量，而且可促进骨膜形成及骨小梁连续性，从而提高骨生物力学强度。第一种用于临床治疗骨质疏松症的hPTH的类似物是rhPTH(l-34，意思是含有天然的PTH的N端的1-34个氨基酸序列的PTH类似物)，它于2002年11月获美国FDA批准， 商品名特立帕肽，为注射剂，由美国礼来公司生产，主治绝经后妇女骨质疏松症和原发性骨质疏松症，已于2003年初在美国上市。这种药物具有与天然hPTH氨基末端34个氨基酸序列完全相同的结构。hPTHl-34氨基酸序列为N’ -SerValSerGluIleGlnLeuMetHisAsnLeuGlyLysHisLeuAsnSerMetGluArgValGlu TrpLeuArgLysLysLeuGlnAspValHisAsnPhe-C'。其生物学作用亦是通过与特异性、高亲和性受体hPTH-1结合介导的。与天然的 hPTH相比，它对骨和肾具有相同的生理作用，但克服了羧基末端对骨代谢的不利影响。PTH目前的缺点主要是hPTH分子不含半胱氨酸，在体内很不稳定。PTH分子质量较小，易被肾小球滤过，因而在体内的半衰期较短，皮下给药或肌肉注射的半衰期一般在1 左右。为了达到治疗效果，一般需要频繁大剂量用药(每天皮下注射一次，连续几个月)，但如此频繁的用药方式再加上较长的治疗周期使得病人较难承受，而且临床上会造成头疼、 呕吐、发烧等不良反应，病人的顺应性差。所以目前急需有PTH的长效制剂或者类似物。为了克服上述缺点，人们需要通过对甲状旁腺激素加以修饰，以延长其半衰期。药代动力学研究表明多肽/蛋白类药物主要通过降解、排泄、以及受体介导的内吞等作用在体内被清除。其中分子量小于20kDa的多肽因子在代谢过程中易被肾小球滤过；通过肾小管时多肽因子又被其中的蛋白酶部分降解并从尿中排出，因而半衰期短。以 GLP-I为例，其体内生物半衰期一般在20min，为了达到的治疗效果，需要频繁的大剂量用药，长期的频繁注射不仅增加了病人的痛苦和治疗费用，易引发一系列严重的毒副作用。长效多肽/蛋白类药物的开发已成为对第一代基因工程多肽/蛋白药物进行二次开发的重要方向。目前延长蛋白药物半衰期的主要基于增大蛋白药物的分子量，减少肾小球滤过率；减少异源蛋白的免疫原性，从而减少其体内清除率；持续缓慢释放维持药物浓度，延长药物作用时间等二个方面考虑。常用技术有制备缓释制剂、构建突变体、化学修饰以及基因融合等。白蛋白是人血清中的主要蛋白组分，占血清总蛋白量的一半。人血清白蛋白由585 个氨基酸组成，分子量为66KD。人血清白蛋白表现出多样性，有30种变异分子。人血清白蛋白基因已经被克隆，并被成功地在多种体外表达系统中进行表达。人血清白蛋白功能可能是多方面的，但是其详细的生物学功能不完全明了。白蛋白在正常生理状况下不易透过肾小球，在血清中的半衰期达14-21天，作为血清中的主要成分，其存在可能对维持血液的稳定性有关键的作用。例如，大量白蛋白的存在可以保持血液的渗透压，离子强度等的稳定。同时，白蛋白由于具有较长的半衰期，也可以作为一种载体通过与血液中的其它因子， 包括生物活性蛋白的结合，从而保持或延长其它因子在体内的生物活性。事实上，白蛋白作为一种药物载体，在临床上已经获得了应用。使用白蛋白作为载体，既可以延长药物的半衰期，也可以提高药物的使用剂量。近年来，利用基因工程技术，将白蛋白与具有生物活性的蛋白分子进行重组表达的融合蛋白，已经成为开发长效蛋白药物的一个重要手段。此外，通过在蛋白或者多肽上共价结合一个脂肪酸，然后通过脂肪酸与白蛋白的非共价键结合可以使蛋白或者多肽在血液中的半衰期延长，目前诺和诺德公司采用该技术成功开发出了胰岛素和GLP-I的长效衍生物地特胰岛素和利拉鲁肽。
技术实现思路
本专利技术的目的即在于克服现有技术的缺点，提供一种在人体内半衰期较长的甲状旁腺激素衍生物，甲状旁腺激素衍生物意指一种分子结构与人rhPTH(l-34)分子结构相似，并具有甲状旁腺激素活性的多肽，在生理PH值下是可溶的，它可以降低PTH的给药频率，从而提高药物的顺应性和治疗效果。本专利技术的目的通过以下技术方案来实现甲状旁腺激素衍生物，它具有SEQ ID NO 1所示的氨基酸序列，在沈位置的赖氨酸的ε -氨基上通过谷氨酸作为间隔基连有一个亲脂性基团W，这个基团具有12到40个碳原子并且选择性地含有一个可以带负电荷基团。亲脂性基团W通过酰胺键与谷氨酸上的氨基相连，谷氨酸作为间隔基连接在沈位置的赖氨酸的ε-氨基上。所述的与间隔基谷氨酸上氨基结合的亲脂性取代基W衍生自含有至少6个碳原子的羧酸的酰基。酰基可为支化的，包括8-Μ原子长的碳原子主链。酰基是含至少6个碳原子的脂肪酸的酰基。酰基是含有6-Μ个碳原子的线性饱和羧酸的酰基。酰基选自十二烷酸、十三烷酸、十四烷酸或十五烷酸。亲脂性基团W连接的亲本甲状旁腺激素为ArgmpTH1—34。26位置的氨基酸是ε -酰化赖氨酸。在本专利技术的优选的实施方案中，亲脂基W由间隔基和大的亲脂性取代基构成。间隔基优选是琥珀酸，Glu或者Asp。大的亲脂性取代基优选是选择性带有氨基的直链脂肪酸。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，亲脂基W表示含有一个氨基的直链脂肪酸。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，亲脂基W具有可带负电荷的基团。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，亲脂基W具有游离的羧酸基。通式中W表示被引入到PTH中的亲脂部分。所述亲脂部分一般选自C3-39烷基， C3-39烯基和C3-39链二烯基。C3-39烷基的具体实例是庚基，壬基，i^一烷基，十三烷基， 十五烷基，十七烷基和十九烷基。上述各亲脂基团构成了本专利技术的备选实施方案。药物结构如下权利要求1.甲状旁腺激素衍生物，其特征在于，它具有SEQID N0:1所示的氨基酸序列，在沈位置的赖氨酸的氨基上通过谷氨酸作为间隔基连有一个亲脂性基团W，这个基团具有12 到40个碳原子并且选择性地含有一个可以带负电荷基团。2.根据权利要求1所述的甲状旁腺激素衍生物，其特征在于亲脂性基团W通过酰胺键与谷氨酸上的氨基相连，谷氨酸作为间隔基连接在沈位置的赖氨酸的氨基上。3.根据权利要求1所述的甲状旁腺激素衍生物，所述的与间隔基谷氨酸上氨基结合的亲脂性取代基W衍生自含有至少6个碳原子的羧酸的酰基。4.根据权利要求3所述的甲状旁腺激素衍生物，所述的酰基可为支化的，包括8-Μ原子长的碳原子主链。5.根据权利要求3所述的甲状旁腺激素衍生物，所述的酰基是含至少6个碳原子的脂肪酸的酰基本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：赵斌，彭红卫，杨伟，张宝华，董佳里，谭枫于，赵凯，
申请(专利权)人：成都金凯生物技术有限公司，苏州金盟生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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