一种甲状旁腺素定量检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种甲状旁腺素的定量检测试剂盒。本发明专利技术提供了一种甲状旁腺素定量检测试剂盒，包括异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液、碱性磷酸酶标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液和磁分离试剂；本发明专利技术所采用的检测方法是磁微粒分离化学发光免疫检测，酶标记技术，磁分离技术和化学发光技术相结合，其操作方便、简单，反应条件温和，发光值稳定且受外界条件影响较小。相比于现有检测方法，本发明专利技术具有样本处理过程简单，检测成本低，检测快速，测试结果准确、重复性好等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫检测分析
，涉及检测血清中甲状旁腺素含量的磁微粒化 学发光免疫分析试剂盒及其测试方法，尤其涉及一种甲状旁腺素定量检测试剂盒。
技术介绍
甲状旁腺素（parathyroid hormone，PTH)基因定位于11号染色体的短臂上 (11ρ15)。PTH由甲状旁腺主细胞合成和分泌。完整的人PTH为一单链多肽，由84个氨基酸 残基组成，相对分子质量为9500。在人的血液循环中，有多种PTH片段。具有生物活性的有 PT^ 84和PTH的N端片段（2000~3000)。此外，无生物活性的有PTH的C端片段（6000~ 7000)及中段氨基酸序列片段。ΡΤΗ的C端片段半衰期较Ν端片段长。血液中检测的ΡΤΗ 主要是中段和C端片段。 ΡΤΗ对维持机体钙磷平衡和骨代谢起着重要作用，其主要靶器官是骨骼和肾脏，其 次是小肠。 1)对骨的作用ΡΤΗ总的作用是促进溶骨，升高血钙。骨组织对ΡΤΗ的反应速度有 两种。①快速效应一旦细胞外液中钙离子浓度降低，ΡΤΗ可在数分钟到数小时内引起骨钙 动员，骨细胞迅速做出反应，使密度骨中的钙转运至血液，此种作用迅速但不持久。②慢效 应继骨细胞发挥作用之后，数小时到数日内，ΡΤΗ可促进前破骨细胞转化为破骨细胞，使破 骨细胞数目增加，活性增强，促进骨盐溶解和骨有机质分解。 2)对肾的作用①促进肾远曲小管和髓袢对钙的重吸收；②抑制肾近曲小管和远 曲小管对磷的重吸收；③提高肾25-(0H)-D3-l α -羟化酶的活性，促进1，25-(0H)2-D3的生 成。简言之，PTH可以促进磷排出和钙的重吸收，降低血磷，升高血钙。 3)对小肠的作用PTH能够促进1，25-(0H)2-03的生成，1，25-(OH) 2-D3有促进小肠 对钙和磷吸收的作用，因此，PTH间接促进小肠对钙和磷的吸收。 总之，PTH总的作用是升高血钙、降低血磷、酸化血液、促进骨吸收。 目前市场上常用检测试剂主要是采用放射免疫技术、酶联免疫技术、化学发光免 疫技术等分析方法。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种甲状旁腺素定量检测试剂盒。 本专利技术提供的试剂盒，为1)或2): 1)包括异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液和碱性磷酸酶标记的 甲状旁腺素单克隆抗体溶液； 所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液和所述碱性磷酸酶标记 甲状旁腺素单克隆抗体溶液的溶剂均为抗试剂缓冲液； 所述抗试剂缓冲液按照如下方法制备：将溶液A、牛血清、马血清、羊血清和防腐 剂混匀得到抗试剂缓冲液； 所述溶液A由Na+、Mg 2+、Zn2+、Trizma base、动物血清白蛋白和水组成； 2)包括所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体、所述碱性磷酸酶标记 甲状旁腺素单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液。 上述试剂盒中， 所述动物血清白蛋白为牛血清白蛋白，所述防腐剂为ProcLin-300 ; 所述溶液A、所述牛血清、所述马血清、所述羊血清、所述ProcLin-300的配比为 1000ml ：23-28ml ：1. 5-2. 5ml ：4. 0-5. 0ml ：0. 5-2. 0ml ； 所述溶液A中，所述Na+浓度为0. 1-lmol/L，所述Mg2+的浓度为lmmol/L，所述Zn2+的浓度为0.1mm〇l/L，所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0.2-1. 0%，所述Trizma base 浓度为 〇· 01-0. 5mol/L。 上述试剂盒中， 所述抗试剂缓冲液中，所述溶液A、牛血清、马血清、羊血清、ProcLin-300的配比 为 1000g :25ml :2ml:4. 5ml :1. 0ml ; 所述溶液A中，所述Na+源于NaCl，所述NaCl的浓度为0. lmol/L ; 所述 Mg2+源于 MgCl 2,所述 MgCl；^浓度为 1. 0mmol/L ; 所述 Zn2+源于 ZnCL 2,所述 ZnCL；^度为 0. lmmol/L ; 所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0. 5% ; 所述 Trizma base 的浓度为 0· lmol/L。 上述试剂盒中， 所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液由异硫氰酸荧光素标记 的甲状旁腺素单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液组成，所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺 素单克隆抗体的浓度为〇. 1-0. 5 μ g/mL ; 所述碱性磷酸酶标记甲状旁腺素单克隆抗体溶液由碱性磷酸酶标记甲状旁腺素 单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液组成，所述碱性磷酸酶标记甲状旁腺素单克隆抗体的浓度 为 0· 5-1 μ g/mL ; 所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体中的甲状旁腺素单克隆抗体 和所述碱性磷酸酶标记甲状旁腺素单克隆抗体中甲状旁腺素单克隆抗体不同。 上述试剂盒中， 上述试剂盒还包括磁分离试剂； 所述磁分离试剂为将抗异硫氰酸荧光素抗体共价连接在磁珠表面，得到磁分离试 剂； 所述抗异硫氰酸荧光素抗体为多克隆抗体； 所述抗异硫氰酸荧光素抗体和所述磁微粒的配比为30 μ g-200 μ g :lmg ; 所述磁微粒的直径为0· 5-1. 5 μ m。 上述试剂盒还包括校准品； 所述校准品由η个不同浓度的校准品溶液组成，所述校准品溶液由甲状旁腺素抗 原和校准品缓冲液组成，且所述甲状旁腺素抗原在所述校准品中为不同浓度； 所述校准品缓冲液由Na+、蛋白类保护剂、防腐剂、Trizma base、动物血清和水组 成，所述Na+浓度为0. 1-lmol/L，所述蛋白类保护剂的浓度为0. 2-1. 0%，所述防腐剂浓度 为0· 05-0. 2%，所述Trizma base浓度为0· 01-0. 5mol/L，所述动物血清的体积百分含量为 0· 05-1. 0%〇 上述试剂盒中， 所述Na+源于NaCl，所述NaCl的浓度为0. lmol/L ; 所述蛋白类保护剂为牛血清白蛋白，所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0. 5 % ; 所述防腐剂为Proclin-300,所述Proclin-300的体积百分含量为0. 1% ; 所述 Trizma base 的浓度为 0· lmol/L ; 所述动物血清为羊血清，所述羊血清的体积百分含量为0. 2%。 上述试剂盒中， 所述校准品由η个不同浓度的校准品溶液组成，η小于等于6 ;所述校准品为浓度 为 0pg/mL、64pg/mL、360pg/mL、600pg/mL、1800pg/mL、3500pg/mL 甲状旁腺素抗原溶液。 所述试剂盒还包括质控品、样本稀释液、清洗液和底物溶液； 所述质控品为2个不同浓度的校准品；所述质控品为浓度为360pg/mL和1800pg/ mL的校准品。 所述清洗液由吐温-20、氯化钠和浓度为0. 15M、pH为8. 0±0. 05的Tris-HCl缓冲 液组成，其中，所述吐温-20的体积百分含量为0. 04%，所述氯化钠的浓度为0. 25mol/L ; 所述底物溶液由二氢吖啶和浓度为0. 25M、pH为8. 0±0. 05的Tris-HCl缓冲液组 成，其中，所述二氢吖啶终浓度为〇. 25mg/mL ; 所述样本稀释液由牛血清白蛋白、trizma base和水组成，其中，所述牛血清白蛋 白的质量百分含量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甲状旁腺素定量检测试剂盒，为1)或2)：1)包括异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液和碱性磷酸酶标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液；所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体溶液和所述碱性磷酸酶标记甲状旁腺素单克隆抗体溶液的溶剂均为抗试剂缓冲液；所述抗试剂缓冲液按照如下方法制备：将溶液A、牛血清、马血清、羊血清和防腐剂混匀得到抗试剂缓冲液；所述溶液A由Na+、Mg 2+、Zn2+、Trizma base、动物血清白蛋白和水组成；2)包括所述异硫氰酸荧光素标记的甲状旁腺素单克隆抗体、所述碱性磷酸酶标记甲状旁腺素单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：关锐，郭健夫，高云，邢婉丽，
申请(专利权)人：成都博奥新景医学科技有限公司，博奥生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51